酵母菌子囊孢子、蓝细菌、霉菌细胞形态及四大类细胞型微生物菌落特征的观察.docx

酵母菌子囊孢子、蓝细菌、霉菌细胞形态及四大类细胞型微生物菌落特征的观察滕能礼 食品13102班 201313040237一、 引言学习并了解酵母菌的个体形态、假菌丝形态及出芽生殖方式，掌握酵母菌的菌落特征及其与细菌和放线菌的区别，掌握观察霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征，掌握常用的霉菌制片方法，掌握观察蓝细菌的形态特征；比较四大类细胞型微生物菌落特征二、 材料与方法材料与试剂啤酒酵母、红萍、桔青霉、黄曲霉、无菌水、蒸馏水、棉兰试剂、50%乙醇、石炭酸复红染液、美蓝染液、酸性乙醇、香柏油、二甲苯。仪器与设备显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、染缸、试管夹、镊子、培养皿。方法与步骤1）无菌操作准备2）破片准备镊子取干净的载玻片，在酒精灯上拖过两次点燃玻片上的酒精3）涂片载玻片中央滴一滴无菌水，然后取菌涂片。应注意桔青霉观察的实验中用的是棉兰试剂而不是无菌水，在无菌操作下分别取菌与无菌水中红萍要充分捣碎才能使蓝细菌充分释放，接种工具是镊子，取出的红萍要在50%的乙醇中润浸，并用蒸馏水冲洗才能放置在载玻片上，充分捣碎后，盖上盖玻片，完成涂片。4）干燥将涂片在火焰上方文火干燥，禁止高温烘干。5）固定将干燥后的涂片凑够火焰中拖过，在火焰处稍作停留，重复两三次。6）染色涂片上滴加石碳酸复红染液，将涂片区域用染色试剂完全覆盖，再用试管夹夹着涂片在火焰上方加热5-10min，中途染液不可非同或干涸。7）水洗倾去染液，用酸性酒精冲洗30-60s，再用水洗至洗出液为无色。8）镜检制好的载玻片放在显微镜的载物台上，按先低倍后高倍的原则观察。9）复原擦镜纸擦去油镜上的香柏油，再用沾有二甲苯的擦镜纸擦拭油镜，最后用擦镜纸擦去二甲苯，最后将其他部分还原，记录使用情况。（1、2、3、8、9适用于霉菌和蓝细菌观察，1、2、3、4、5、6、7、8、9适用于酵母菌观察）三、 结果与分析青霉（Penicillium spp）分生孢子梗青霉（Penicillium spp）副枝青霉（Penicillium spp）分生孢子 桔青霉（40X）曲霉（Aspergillus Spp）顶囊曲霉（Aspergillus Spp）分生孢子梗曲霉（Aspergillus Spp）小梗 黄曲霉（100X）结果分析：桔青霉在显微镜下呈扫帚状，扫帚状的是副枝，其顶端有分生孢子，扫帚主枝称为分生孢子梗，颜色为青绿色。与桔青霉不同，黄曲霉大致呈放射状，颜色为灰色，黄曲霉的足部有足细胞。啤酒酵母细胞啤酒酵母子囊孢子 啤酒酵母（100X）结果分析：啤酒酵母细胞呈卵圆状，在显微镜下看到两种不同的颜色，蓝色的为酵母细胞，红色的为子囊孢子，可以推断出酵母细胞的繁殖方式为出芽生殖，子囊孢子就是有性生殖细胞。蓝细菌营养细胞蓝细菌异形胞蓝细菌（100X）结果分析：有很多由一串圆球状的细胞连接起来的细胞，在这些细胞中有一个细胞较大，较为突出，称之为异形胞，仔细观察，可以发现在异形胞的两端有重叠的部分，称之为桔节，其他圆形细胞成为营养细胞。四、 结论与讨论1）火焰固定不宜过热。2）接种时在酒精灯附近进行，尽量少说话，尽可能实现无菌操作3)在观察蓝细菌时要将红萍充分捣碎。4）在对啤酒酵母进行加热染色时要防止染液沸腾和干涸。5）制作霉菌涂片时，在洁净的玻片上滴入的试剂要正确，桔青霉是滴棉兰试剂，而黄曲霉是滴蒸馏水。6）菌落观察结果见附表附表：四大微生物菌落特征的观察四大微生物微生物类别细胞形态结构菌落特征繁殖方式相同点不同点相同点不同点相同点不同点细菌单细胞微生物球状杆状和螺旋状等，小而均匀，个别有芽孢细胞质、细胞核、细胞膜有鞭毛、性菌毛、糖被、芽孢等，无成形的细胞核较湿润、光滑、透明、易挑起，菌落的正反面、边缘和中央颜色一致，质地较均匀较小、较薄、较透明、较湿润、颜色多样，较有“细腻”感。有鞭毛的细菌其菌落较扁平、边缘不规则。有芽孢的细菌菌落粗糙、多皱、不透明二分裂酵母菌卵圆状、柱状等，大而厚液泡、线粒体、芽体、细胞核大、厚，外观较稠、较不透明无性：芽殖、裂殖，芽裂，孢子繁殖。有性：产生子囊和子囊孢子。放线菌菌丝状微生物丝状细而均匀都有气生菌丝和基内菌丝，繁殖菌丝，外观干燥，不透明菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取，正反面的颜色不一致表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色的“干粉”，菌落边缘的琼脂