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文档简介
1、 名词:中心法则:首先由Crick于1958年提出,是遗传信息传递的一般规律,遗传信息可由DNA复制而遗传,由转录、翻译而产生功能产物,信息也可由反转录从RNA进入DNA。Gene:产生功能性产物(RNA或者蛋白质)所必需的全部DNA序列。重叠基因:两个或者更多基因使用同一DNA区段作为编码序列,这种形式的基因称为重叠基因。断裂基因:基因的编码区被非编码序列分隔开来,编码区呈断裂状态,称为断裂基因。基因重复:在同一个基因组内存在2个或者2个以上拷贝的同源基因序列。Exon:外显子,DNA 与成熟RNA间的对应区域。Intron:位于基因编码序列之间,与编码序列同时转录转录,但是在随后加工形成成熟RNA的过程中被去除的序列。C值:是指真核生物细胞中,单倍细胞核(受精卵或二倍体体细胞中的一半量)里所拥有的DNA含量。C值反常现象:指一个关于真核生物各物种的基因组大小差异的难题,也就是生物的C值(或基因组大小)并不与生物复杂程度相关的现象。例如植物与原生动物,可能具有比人类更大的基因组。Genome:基因组,特定生物体单倍体细胞中遗传物质的总和。2、简述真核生物染色体DNA序列的类型及特征。答:不重复序列,每基因组一个或者几个拷贝,多数结构基因存在于此类序列中;中度重复序列,每基因组10104拷贝,Alu family、rDNA、tDNA、Histone gene cluster都是中度重复序列;高度重复序列,一般位于异染色质区,每基因组重复次数l05,可作为DNA指纹用于个体鉴别和亲缘关系的确认。3、简述基因的存在形式。答:断裂基因:基因的编码序列是断裂状态,转录后须经剪接形成连续分布的编码序列,主要存在于真核体系,原核体系也有此类基因;重叠基因:两个或更多的基因共用同一区段的现象,在小基因组体系如病毒、噬菌体中较为常见,能提高基因组遗传信息的编码能力;重复基因:也称为基因重复,是生物进化的动力之一,由于不均等交换、染色体倍增等机制导致基因拷贝数的增加,进而由于突变使得同一个基因组内存在2个或者2个以上拷贝的同源基因序列。跳跃基因:即转座子,能在基因组内发生位置移动的序列,可分为DNA转座子、病毒型返座子、肺非病毒型返座子,也是物种形成的因素之一。假基因:是与正常基因结构类似但由于突变或者返座等原因不再具备信息表达功能的DNA序列,是DNA进化的遗迹。6、什么是线性DNA末端短缩问题?答:DNA聚合酶需要引物提供游离的3-羟基作为复制起点,而细胞内一般的引物是RNA,在DNA复制完成后会被水解去除。那么在DNA的3末端由RNA引物引发DNA复制并水解该引物,由于没有额外的羟基帮助DNA聚合酶填补引物去除后的单链区,下一轮复制中DNA将由于末端的不完全复制而出现短缩。1、名词切刻(nick):双链DNA的一条单链出现磷酸二酯键的断裂,称为切刻或者切口。nick translation:切刻平移,是DNA聚合酶同时行使53聚合和53外切功能,导致双链DNA切刻超3端移动的现象,可用于DNA的同位素标记。Klenow 片段:也称为Klenow酶,是DNA聚合酶I经蛋白酶处理后形成的羧基端大片段,具备53聚合和35外切活性。端粒:线性染色体的末端,由一段富含G的正向重复序列(共有序列为TxGy)与相应的端粒结合蛋白共同组成端粒酶:是一类核糖核蛋白体(ribonucleoprotein , RNP),实质是自带RNA模板的反转录酶,其模板能与端粒DNA的3凸出端配对,以端粒DNA的3-OH起始端粒DNA的延长。重组:DNA分子间或DNA分子内部的DNA片段的重排或交换。转座子:是DNA上可自主复制和位移的基本单位。狭义上也专指DNA转座子,直接以DNA的形式在基因组中发生位移的DNA元件。返座子:是能通过转录形成的RNA进一步反转录后插入到染色体DNA中的一类DNA序列。2、简述环状DNA复制方式。答:复制:实质是环状DNA的单起点双向复制,每起始一轮复制产生2个拷贝的DNA,以RNA为引物;滚环复制:也称为共价延伸,环状DNA发生切刻后,由DNA聚合酶以切刻的3-羟基起始复制并置换5序列,聚合酶可在环状DNA模板上滚动复制形成共价连接的多拷贝复制产物,其实一次可产生多个拷贝的复制体,引物为DNA的3-羟基;D-loop复制:实质是每条DNA链都以单起点单链连续复制的方式进行的DNA复制,其中一条链先起始单链连续复制,产生置换环(displacement loop, D-loop),进而触发另一条链的单链连续复制。3、请按照复制的阶段,简述原核生物复制各阶段的酶和蛋白质及其功能。答:起始:实质是复制起点识别、解链及引物合成的过程解旋酶:解开双螺旋SSB:单链结合蛋白,维持DNA的解链状态拓扑异构酶:消除快速解链造成的正超螺旋引发酶:合成引物DNA聚合酶:以引物为起点进行先导链的连续性合成延伸:半不连续复制解旋酶:在复制叉处解螺旋SSB:单链结合蛋白,维持DNA的解链状态拓扑异构酶:消除快速解链造成的正超螺旋引发酶:每隔一个区段合成一段后随链引物DNA聚合酶:先导链的连续性合成,利用引发酶产生的引物合成冈崎片段DNA聚合酶:去除冈崎片段的引物,并聚合dNTP填补缺口DNA连接酶:连接冈崎片段,形成完整的后随链子链终止:复制体的解体 Tus:识别ter位点,使复制体停顿 拓扑异构酶:解开缠绕的子代DNA 通过DNA修复的方式填补并释放子代dsDNA5、简述E.coli DNApolIII全酶的结构答:催化核心(catalytic core): 包含1个亚基 、1个 亚基(35核酸外切酶校正活性)和亚基(剌激核酸外切酶)。 二聚体:连接2个催化核心; 夹子(clamp):结合DNA并使DNApol催化核心把保持持续催化的能力 (通过改变DNA与催化核心的亲和能力); 夹钳装载机 (clamp loader):及其余5种蛋白质使具有前进能力的亚基 结合到DNA 上。6、简述大肠杆菌colE1质粒复制的调控机理。答:实质是通过引物RNA形成的控制来调节colE1质粒的复制。质粒cilE1复制起始需要RNA引物,该引物是由复制起点上游的一个转录产物(RNA2)在复制起点处切割产生的。 但是该质粒还存在与引物RNA反方向转录的RNA1,与RNA2配对后可导致RNaseH无法切割RNA2产生引物,进而调节colE1质粒的复制。7、简述大肠杆菌细胞内存在的修复系统及各修复机制的特点。答:错配修复系统:修复复制过程中的错配,通过识别DNA上半甲基化的GATC位点实现“修正子链,保存母链”的原则; 碱基切除修复:识别和去除异常碱基,通过N-糖苷酶识别异常碱基并将其切离产生AP位点(无碱基位点),进一步由AP核酸内切酶切割该位点并替换上正确的碱基。如dUTP的掺入(U-N-糖苷酶系统识别和修正)核苷酸切除修复:针对损伤碱基或者嘧啶二聚体,通过识别并切除损伤碱基或者嘧啶二聚体,进而填补缺口。重组修复:针对因损伤(如嘧啶二聚体等)使得DNA不能作为复制模板使用的情况。DNA聚合酶III无法识别损伤DNA,出现复制中断,可通过同源重组的方式以同源序列填补缺口,实质上没有对损伤进行修复。也称为复制后修复跨损伤修复:针对因损伤(如嘧啶二聚体等)使得DNA不能作为复制模板使用的情况。如果此类情况太多将导致复制的失败,此时可采用保真性较差的聚合酶以不依赖于模板的方式聚合dNTP,此类修复变异性较高。1、名词引物(Primer):复制起始时为DNA聚合酶提供游离的3羟基作为复制起点的物质,体内DNA复制引物一般是RNA,有时也可以DNA或者蛋白质替代。基因转变:同源重组时由于错配修复而生成非交互性重组链,将一个等位基因转换成另一个等位基因。基因靶向技术:(gene targeting,又称为基因打靶)将外源DNA导入靶细胞后,利用基因重组,将外源DNA与靶细胞内染色体上同源DNA间进行重组,从而将外源DNA定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点。可用于基因治疗及基因功能的研究。倒转重复序列(inverted repeat):即中心对称序列,单链状态下能自身配对。跨损伤修复(translession repair):当DNA链在复制过程中遇到损伤而使复制停顿时,机体启动一类不依赖于模板的DNA聚合酶忽略损伤继续复制。通常跨损伤修复是高变异性的,真核生物有专门针对嘧啶二聚体的高保真性跨损伤修复的聚合酶(如DNA聚合酶)。3、简述转座作用的遗传学效应。答:引起插入突变:失活、极性突变或者为基因组的某些序列提供转录起始的顺式元件引起染色体畸变:染色体的断裂、缺失和倒位生物进化的动力:引入新的基因、造成外显子的移动和改组4、简述人体内核苷酸切除修复类型及其差异答:类型:全基因组修复 (Global Genomic repair,GGR) :修复整个基因组内的损伤,其效率取决于损伤的化学特性、损伤部位的DNA序列和染色质结构。转录偶联修复(Trancsription-coupled repair,TCR):特异地修复基因组中具有转录活性(即表达)的基因的被转录DNA链上的损伤,该途径的 特点是依赖RNA聚合酶II催化的转录,其中的一些蛋白是普通转录因子TFIIH 的亚基。差异:损伤识别的机制不同,GGR是由XPC蛋白识别损伤的,不存在选择性;TCR是由RNAP在转录过程中识别损伤的,能特异性的针对活跃转录序列上的损伤进行识别和修复5、简述DNA转座子类型及其特点。答:插入序列(insertional sequence,IS ):最简单的转座子,两端为IR,中间编码转座酶复合转座子(composite transposon,Tn):中部为抗药性基因或其他宿主基因,两侧是相同或者高度同源的IS序列(同向或者反向排列),两侧IS序列可能都有功能或者是一侧具备功能TnA家族:长约5kb,两端为IR,中部编码tnpA、tnpR、ampR6、从转座因子(transposible element)的组织形式及转座机制的角度简述转座因子的类型及其基本特征。答:DNA转座子:两端是倒转重复序列,内部编码有转座酶,能以DNA的形式直接在基因组内发生位移;病毒型返座子:结构与反转录病毒同源,两端是长末端重复序列,内部编码有反转录酶和整合酶,也称为LTR型返座子非病毒型返座子:末端带有polyA,编码有RNA结合蛋白(ORF1)和具有反转录及核酸内切活性的酶(ORF2),也称为polyA型返座子。7、DNA转座子的转座机制如何?答:非复制型转座(nonreplicative transposition)“cut and paste”: 转座元件作为实体,直接从一个位点转移到另一个位点,并引起供体DNA的断裂,非复制型转座只需要转座酶,如IS、Tn。复制型转座(repl icative transposition)copy-and-paste:在复制型转座反应中,转座子被复制,发生转座的实体是原转座子的一个拷贝,如TnA。复制型转座涉及两类酶活性:一是转座酶,它在原转座子的末端起作用;另一种为解离酶(resolvase) ,它对复制拷贝起作用。另外:一些比较特殊的非复制型转座可不造成DNA的断裂,称为保守型转座(conservative transposition)。1、名词:模板链:DNA双链中指导RNA聚合酶合成RNA的单链,能与RNA碱基配对。编码链:DNA双链中与RNA序列一致(T替代U之后)的单链序列。Enhancer:能增加与之连锁的基因转录频率的DNA序列。其之前作用没有方向、距离等的限制,通过为组织特异性蛋白质因子提供结合位点发挥作用。Terminator:终止子,为RNAP转录终止提供信号的DNA序列。Promoter:启动子,被RNAP结合并起始转录的DNA序列,通常还包括促进这一过程的调节蛋白结合位点。极性突变:原核生物中上游顺反子的突变可引起下游顺反子表达效率的下降的现象。consensus sequence:共有序列或者一致序列,比对功能相同的序列,并将每一位点上出现频率最高的碱基或者氨基酸排列在一起形成的理想序列。monocistron mRNA:单顺反子mRNA,即一条mRNA模板只含有一个翻译起始点和一个终止点,因而一个基因编码一条多肽链或RNA链,每个基因转录有各自的调节元件。polycistron mRNA:多顺反子mRNA,mRNA上几种不同的ORF相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开,这种mRNA叫做多顺反子mRNA。这样的一条mRNA链含编码多个多肽链。多顺反子mRNA位于同一转录单位内,享用同一对转录起点和终点。剪接:断裂基因的编码序列和非编码序列同时被转录形成mRNA前体,需要经过切除非编码序列(intron),连接编码序列才能形成成熟mRNA,这一过程称为剪接。或者:从DNA模板链转录出的最初转录产物中除去内含子,并将外显子连接起来形成一个连续的RNA分子的过程。RNA editing:RNA编辑,是基因经转录后在RNA水平的碱基的插入、替换和删除,是在RNA水平改变遗传信息的过程Alternative splicing:可变剪接或者选择性剪接,通过对hnRNA选择性的去除后者保留某些序列从而产生不同的mRNA剪接产物,这一现象称为选择性剪接。trans splicing:反式剪接,指的是两条不同的mRNA的外显子连接到一起。与正常的顺式剪接不同,这里的两段外显子是来自不同的RNA的,但却可能来自同一基因。“经典”反式剪接见于锥虫和线虫,近期在人类身上也发现了反式剪接。abortive initiation:流产式起始,实质是由于启动启动效率较弱,RNA聚合酶在启动子区合成29nt RNA而不能脱离启动子区,最终释放短片段RNA终止转录的现象。2、以大肠杆菌为例,简述原核生物RNApol的构成成分及各部分的功能。答:详见下表亚基基因亚基数组分功能rpoA2核心酶核心酶组装,启动子识别rpoB1核心酶和共同形成RNA合成的活性中心rpoC1核心酶?1核心酶?rpoD1因子存在多种因子,用于识别不同的启动子3、以大肠杆菌为例,简述原核生物一般性启动子的结构。答:-10区:也称为Pribnow区,富含AT碱基,利于双链打开,共有序列为TATAAT; -35区:共有序列为TTGACA 转录起点:与新生RNA链第一个核甘酸相对应DNA链上的碱基。通常是嘌呤(A或者G)4、简述三类真核生物启动子的结构及其特点。答:I类启动子:启动子区富含GC,包括上游启动序列(决定启动效率)和核心启动子区(决定精确转录起点)两部分;II类启动子:被RNA聚合酶II识别和结合的启动子,转录结构基因核心启动子区:包括TATA box、BRE等元件,可被通用转录因子引导RNA聚合酶结合;上游启动元件:包括GC box、CAAT box等,决定转录效率增强子:远距离增强转录的DNA元件III类启动子:RNA聚合酶III识别的启动子,转录小分子RNA,经典的III类启动子是位于转录单元内部的启动子。5、简述原核生物终止子的种类,说明intrinsic terminator的结构及各部分的功能。答:原核生物终止子有内在终止子(intrinsic terminator)和依赖于因子的终止子两种。内在终止子(intrinsic terminator)转录后能产生茎环结构,且茎环结构的下游紧接着polyU。茎环结构:增强转录终止效率polyU:导致转录停顿,决定转录终止与课本(P90)有出入,可不看6、试比较真核生物和原核生物mRNA。答:简表如下:是否存在加工半衰期结构原核生物无短多顺反子真核生物有:戴帽、加尾、剪接、编辑、修饰等长单顺反子答题时应详加说明!9、简述hnRNA转录后加工的类型及各类型加工的概况(如机制、特点、作用等)答:戴帽:帽子是m7G以5,5-三磷酸二酯键与mRNA第一个核苷酸相连;根据mRNA核糖2-羟基的甲基化程度可分为cap0、cap1、cap2等。帽子的主要功能有:保护mRNA不被53外切;帮助翻译;帮助运输;帮助剪接;加尾(Polyadenylation):加尾信号是“AAUAAA”,在加尾信号下游切割RNA后进而由PAP合成寡聚A,紧接着由PABII继续合成寡聚A直至全长poly(A)功能:保护mRNA不被35外切;帮助翻译;帮助运输;帮助剪接;帮助终止转录剪接:hnRNA内含子的剪接实质是snRNP参与形成剪接体进行的索套切除。可能存在选择性剪接而由1个hnRNA产生多个成熟mRNA。编辑:R通过对RNA碱基的插入、替换和删除实现NA水平遗传信息的改变。目前已知的机制有:依靠gRNA实现RNA中U的插入和删除;通过碱基特异性的脱胺氧化实现碱基的替换,如CU、AI等修饰:目前已知的是mRNA中存在保守的m6A。10、简述参与真核生物RNP polII preinitiation complex装配的各成分功能答:GTFsfunctionTFIIDTBP结合TATA boxTAFIIs结合Inr/DPE,调节TBP的DNA结合活性TFIIA类似于TAFs,辅助TBP与启动子的结合TFIIB连接RNAP和TBP,结合BRE,确定转录放向及精确转录起点TFIIF结合RNAP并被招募,是TFIIE/TFIIH结合RNAP的前提TFIIE/TFIIH TFIIE招募和调节TFIIH;TFIIH具有ATPase亚基(解螺旋)和蛋白激酶亚基(参与Rpb1 CTD的磷酸化)帮助完成启动子清除和延伸起始12、参与真核生物转录起始的蛋白质因子类型有哪些?答:1)通用转录因子( Basical transcription factors / general transcription factors ):TFIIA, TFIIB,TFIID, TFIIE, TFIIF, and TFIIH与RNAP、DNA共同形成转录起始前复合物,但是转录起始效率低下。2)激活因子(activator/gene-specific transcription factors ):结合启动子的上游启动元件以及增强子,通过与Mediator相互作用进而促进转录起始前复合物的转录其实效率。3)Mediator:是转录因子和通用转录机器之间传递信息的分子桥梁,精细控制基因的转录发生。13、什么是RNA pol II的CTD?试述CTD对于转录的影响。答:是RNA聚合酶II最大亚基的羧基末端结构域,富含带羟基aa,是7aa的串联重复序列,共有序列为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser),CTD的磷酸化状态是RNA聚合酶II活化、脱离起始前复合物进入延伸阶段的前提。推测CTD的磷酸化状态直接影响到其转录的活性及转录过程中的加工事件。第四章作业1、名词:genetic codon:遗传密码,即mRNA或DNA上编码AA或多肽合成终止和起始信号的三联体核苷酸校正tRNA:反义密码发生突变的tRNA,能识别另一点突变的基因,从而校正其点突变效应codon family:密码子家族,编码同一氨基酸的密码子统称为1个密码子家族。synonymous codon:同义密码,编码统一氨基酸的不同密码子。同工tRNA:能携带相同氨基酸的tRNA。摆动假说:在蛋白质生物合成中tRNA反密码子的5位碱基不严格的特异性的假说。允许反密码子的5位(第一位)碱基与信使核糖核酸的密码子3位(第三位)碱基通过改变了的氢键配对(如非G-C、A-U 配对),从而识别一种以上的密码子。起始tRNA:携带fMet或者Met,在翻译起始时进入核糖体P位点与起始密码AUG相配对的tRNA。无义突变:ORF中由于碱基的替换使密码子从有义密码(氨基酸的密码子)突变成为终止密码的现象。移码突变:ORF内部发生碱基的插入或者删除,如果发生改变的核苷酸数目不是3的倍数,则可能造成读码框架的改变,称之为移码突变。S-D 序列:原核生物起始密码上游712nt处存在一段能与核糖体16s rRNA配对的序列,称为S-D序列或者RBS(核糖体结合位点),E.coli中此段序列为富含嘌呤的AGGAGGU。共翻译转运:膜结合核糖体上合成的蛋白质, 在它们进行翻译的同时就开始了转运,主要是通过定位信号,一边翻译,一边进入内质网, 然后再进行进一步的加工和转移。由于这种转运定位是在蛋白质翻译的同时进行的,故称为共翻译转运。翻译后转运:游离核糖体上合成的蛋白质必须等蛋白质完全合成并释放到胞质溶胶后才能被转运,所以将这种转运方式称为翻译后转运。molecular chaperone:分子伴侣,是一类能协助初生多肽正确完成非共价折叠又不参与该蛋白质结构组成的蛋白质。3、简述密码子的基本特性。答:遗传密码是三联体密码(The Triplet Code)遗传密码是连续排列的(Nonoverlapping、No Gaps in the Code)遗传密码具有通用性(某些体系如mt.例外)遗传密码具有简并性(degeneracy , synonyms)与反密码子配对时存在“摆动”(wobble base pair)4、简述核糖体的活性位点。答:mRNA结合位点A位点:翻译过程中aa-tRNA进入核糖体的位点P位点:翻译过程中肽酰基存在的位点,起始时起始氨酰tRNA也可以进入E位点:退出位点,空载tRNA退出核糖体的位点。肽酰基转移酶活性位点:核糖体大亚基23s rRNA提供(原核生物中)5、简述tRNA的结构。答:Acceptor stem:带有-CCA-OH,接受氨基酸的位置T-loop:TCAnticodon loop:与密码子配对的位置D-loop:带有DHUVariable loop:extra loop,是分类标志英文部分请自行翻译6、简述翻译的基本流程。答:主要包括以下几个环节:材料准备:氨基酸在氨酰tRNA合成酶的作用下形成aa-tRNA;起始:核糖体在mRNA起始密码子处装配,起始氨酰tRNA进入P位点与起始密码相互识别;延伸:实质是以下3个反应的循环,每循环一次增加1个肽键a)氨酰-tRNA进入A位点,b)P位点肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位点氨酰-tRNA的氨基上,c)核糖体移动3个核苷酸,A位点处的肽酰基-tRNA进入P位点,P位点原有的tRNA经E位点退出核糖体;终止:有RF因子识别终止密码,使核糖体解体终止翻译;多肽的加工修饰、折叠和运输。7、试述原核生物翻译过程中各因子的作用。答:简表如下:阶段因子功能起始IF3保持30亚基游离,帮助30亚基结合mRNAIF2结合GTP,帮助fMet-tRNAf进入核糖体P位点,与AUG配对IF1辅助和刺激IF2、3的功能延伸EF-Tu结合GTP,帮助aa-tRNA进入核糖体A位点EF-Ts使EF-Tu-GDP重新转化为EF-Tu-GTPEF-G结合GTP,使核糖体向mRNA3端移动3个核苷酸终止RF1识别UAG、UAARF2识别UGA、UAARF3辅助和刺激RF1、2的功能9、试述真核生物翻译起始的扫描模型及原核生物翻译起始的定点装配模型。答:原核生物翻译起始的定点装配模型:核糖体小亚基在翻译起始因子的帮助下结合mRNA AUG上游的RBS(核糖体结合位点),进一步结合大亚基装配核糖体,起始翻译。真核生物的扫描模型:核糖体小亚基结合真核生物mRNA 5帽子,进而向3滑动扫描合适的起始密码起始翻译。10、简述多肽翻译后的加工。答:非功能片断的切除:典型的情况包括切除N-端甲硫氨酸、信号肽序列和切除部分肽段将无活性的前体转变成活性形式。二硫键的形成(二硫键异构酶,disulfide isomerase)Cys-Cys氨基酸的修饰:磷酸化(酶、核糖体蛋白等)、糖基化(抗体等)、甲基化(肌肉蛋白)、乙酰化(组蛋白)、羟基化(胶原蛋白)其它:蛋白质剪接11、论述多肽翻译后处理(转运、加工、折叠)的意义。提示:围绕蛋白质功能的形成、功能的预测、人造蛋白质等方面加以论述1、名词: Inducer:诱导物,有些小分子与调节蛋白(repressor/activator)结合后导致operon表达开启,这类小分子物质即诱导物。这类小分子物质通常是所诱导的酶的底物,可被降解。Corepressor:辅阻遏物,小分子物质结合调节蛋白后导致operon的表达受到阻遏,这类小分子物质即辅阻遏物。通常辅阻遏物是所阻遏的酶的底物Repressor:阻遏蛋白,一些operon控制区被调节蛋白结合后表达受到阻遏,这类调节蛋白即repressor。Activator:激活蛋白,调节蛋白结合控制区后能够促进结构基因的转录,这种调节蛋白称为激活蛋白。Operator:操作子,被阻遏蛋白结合阻碍结构基因转录的DNA序列。Operon:细菌基因表达调控的基本单位,包括控制区,受控制区调节的结构基因编码区,以及编码调节蛋白的调节基因区。安慰诱导物:诱导物的结构类似物,能对结构基因产生诱导效应,但不被所诱导的酶降解。遗传信息:Attenuator:弱化子(或者衰减子),是指原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列,该区域能形成不同的二级结构,利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。严谨反应:细菌处于氨基酸饥饿状态时RNA聚合酶活性下降, rRNA和tRNA合成减少或停止的现象。空转反应:空载tRNA进入A位点时,核糖体产生pppGpp和ppGpp的现象。反义RNA:是指与靶RNA(多为mRNA)具有互补序列的RNA分子,通过与靶RNA进行碱基配对结合的方式.参与基因的表达调控。gene imprinting:基因印迹,来自父本和母本的一对等位基因存在甲基化的差异,进而导致该等位基因在子代个体中只表达来自某一亲本的基因的现象。RNAi:RNA干扰(RNA interference)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。2、简述操纵子的结构。答:结构基因(structure gene):功能相关的基因相互连锁调节基因(regulator gene):编码调节蛋白(反式作用因子)结合控制区调节结构基因的转录,一般是变构蛋白(allosterlc protein )存在DNA结合结构域和效应物结合位点 控制区( control elements):能被调节蛋白和RNAP结合包括operator(操作子)、promoter,是顺式作用元件3、 简述操纵子表达调控的类型(根据小分子物质及调节蛋白对操纵子结构基因的表达的调控作用)答:简表如下:序号类型调节蛋白效应物1可诱导负调控活性阻遏蛋白诱导物2可阻遏负调控非活性阻遏蛋白辅阻遏物3可诱导正调控非活性激活蛋白诱导物4可阻遏正调控活性激活蛋白辅阻遏物4、 简述lac-o的结构及其表达调控的机制。答:结构:结构基因(structure gene):lacZ、lacY、lacA(各自的功能请自己完善)控制区(control elements ):Promoter, operator, CRP site调节基因(regulator gene ):lacI调控: 可诱导负调控系统:由operator、lacI、lactose异构物构成;阻遏蛋白能结合operator,并阻止结构基因的转录。lactose异构物存在时,能使阻遏蛋白变构,失去DNA结合活性,结构基因转录的阻遏消失因此有乳糖时,转录的阻遏解除可诱导正调控:由CAP binding site、CAP、cAMP构成CAP-cAMP作为激活蛋白(activator)激活结构基因的转录,这一过程中CAP本身没有DNA结合活性,经过cAMP的结合和变构后其DNA结合活性才被激活,进而使转录打开因此lac-O转录的条件是:有乳糖和cAMP5、 简述Lac-z基因用作报告基因的基础。答:报告基因(reportergene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。基因工程操作通常涉及到报告基因,根据报告基因的表达与否可以判断基因工程操作是否成功。Lac-Z用作报告基因的理由如下:lac-Z的产物是-半乳糖苷酶,能够水解X-gal形成蓝色产物,根据颜色反应可轻易的判断该基因是否表达。lac-Z产物N端得146aa(肽)能与C端肽段发生功能互补,这使得该报告基因的长度大大缩短,在质粒载体构建中可降低载体本身大小,增加装载容量。7、 简述trp-o衰减子(attenuator)的
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