血型鉴定基本知识

血型鉴定基本知识,延庆医疗中心梁润军,血型的种类,1900年奥地利科学家兰德斯坦纳经过研究，将人的血液分为A型、B型、AB型、O型四种，也就是ABO血型。除了ABO血型系统外，人类还有一些其它的血型系统，比如Rh血型系统等。,ABO血型鉴定定义,ABO血型鉴定，即指ABH血型抗原的检测。红细胞含A抗原的叫A型，含B抗原的叫B型，含A和B抗原的叫AB型；不含A、B抗原，而含H抗原的称O型。,正常范围,ABO血型分为A型、B型、O型、AB型。,临床意义,ABO血型鉴定主要用于：1、临床输血：当循环血量不足或大失血或贫血需进行输血治疗，在输血前必须先选择血型相同的供血者，再进行交叉配血，完全相同后才能输血。2、在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体。3、不孕症和新生儿溶血症病因的分析。4、亲子鉴定等。,鉴定原理,常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。,ABO血型定型原则,认识ABO血型,知识链,血浆,血细胞,白细胞,血小板,红细胞,红细胞,A凝集原,B凝集原,认识ABO血型,凝集原,凝集原（红细胞）,A,B,A和B,无,血型,A,B,AB,O,A凝集原,B凝集原,血清,抗A凝集素,抗B凝集素,（抗A）,（抗B）,凝集素,凝集原,凝集原（红细胞）,A,B,A和B,无,血型,A,B,AB,O,凝集素（血清）,抗B,抗A,无,抗A和抗B,B、O,A、AB,AB、A、B、O,A、O,无,A、AB、B,B、AB,输血原则：,同型血液可以互相输，O型血可以少量输给其他三种血型的人，AB型血原则上可以接受其他三种血型的血。,O,（万能输血者）,（万能受血者）,方法学原理,根据红细胞膜表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A，B，AB，O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定ABO血型。所谓的正定型是指用标准抗A抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓的反定型，是指用标准的A型、B型细胞来测定血清中有无抗A和（或）抗B。,试剂及配套品,抗A，抗B和抗0的标准血清。,准血清均采自健康人，并应符合下述条件：特异性：只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集。效价：我国标准抗A和抗B血清效价均在1：128以上。亲和力：我国标准要求抗A对A1、A2及A2B发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s；抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为3min时，凝块不小于1-2mm。冷凝集素效价：在1：4以下。无菌。灭活补体。,操作步骤,玻片法正定型1、 取清洁玻片1张，用蜡笔划成方法，标明抗A，抗B，分别滴家抗A，抗B血清在相应的方格内，再加受检者红细胞1滴，混匀。2、 将玻片轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约1-5MIN，肉眼观察有无凝集反映，也可以用低倍镜观察结果。,注意事项,1、所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。2、加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。3、虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反应温度以4最强，医学教育网收集整理但为了防止冷凝集现象干扰，一般在室温2024内进行试验，而37条件，可使反应减弱。4、幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱，最好采用试管法鉴定血型。,注意事项,5、玻片法反应时间不能少于10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。6、正、反定型结果一致才可发报告。7、反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量应用免疫抑制，血型抗体可减弱或消失；血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且自身血型抗体效价又低，因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗体，可引起假阴性或血型鉴定错误。,婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型,婚配式子女可能有的血型子女不可能有的血型,鉴定方法,1）生理盐水凝集法：玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱，如抗A抗B标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此类错误。,鉴定方法,玻片法凝集结果判断：红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准：呈一片或几片凝块，仅有少数单个游离红细胞为（+）。呈数个大颗粒状凝块，有少数单个游离红细胞为（+）。数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒，游离红细胞约占1/2为（+）。肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察，每凝集团中有58个以上红细胞凝集为（+）。可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多的游离红细胞（）。可见极少数红细胞凝集，而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。镜下未见细胞凝集，红细胞均匀分布为（-）。,鉴定方法,（2）凝胶微柱法：是红细胞抗原与相