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文档简介

总糖的含量的测定 蒽酮法 总糖的含量的测定 蒽酮法 一 一 实验目的实验目的 掌握蒽酮比色法测定糖的原理与方法 二 二 实验原理实验原理 蒽酮比色法是一个快速而简便的测定糖方法 蒽酮可以和游离的己糖或 多糖中的己糖基 戊醛糖及己糖醛酸起反应 反应后溶液呈蓝绿色 在 620 nm 处有最大吸收 蒽酮可与其他一些糖类发生反应 但显现的颜色不同 当 样品中存有含有较多色氨酸的蛋白质时 反应不稳定 呈红色 对于以上特 定的糖类反应较稳定 三 三 实验器材实验器材 1 吸管 2 试管 3 分光光度计 4 水浴锅 5 电炉 6 电子分析天平 四 四 实验试剂实验试剂 1 蒽酮试剂 取 2 g 蒽酮溶于 1000 ml 体积分数为 80 的硫酸中 当 时配制使用 2 标准葡萄糖溶液 0 1 mg ml 100 mg 葡萄糖溶于蒸馏水并稀释 至 1000 ml 可滴加几滴甲苯作防腐剂 3 6 mol l HCl 溶液 4 10 NaOH 溶液 称取 10 g NaOH 固体 溶于蒸馏水并稀释至 100 ml 五 五 实验操作实验操作 1 制作标准曲线 取干净试管 7 支 按下表进行操作 表 蒽酮比色法测定糖含量的标准曲线制作 管号 步骤 0123456 标准葡萄糖溶 液 ml 00 10 20 30 40 50 6 蒸馏水 ml1 00 90 80 70 60 50 4 置冷水中 5 min 蒽酮试剂 ml4 04 04 04 04 04 04 0 沸水浴中准确煮沸 10 min 取出 用自来水冷却 室温 放置 10 min 在 620 min 比色 A620nm 2 样品的处理 见实验四 取上述实验四的水解液 冷却后用 10 NaOH 溶液中和至 pH 呈中性 然 后用蒸馏水定容至 100 ml 过滤 取滤液 10 ml 用蒸馏水定容于 100 ml 成稀 释 1000 倍的总糖水解液 用于糖含量的测定 测定时取 1 ml 总糖水解液测定还原糖的含量 同标准曲线 样品中糖含量的计算 w 糖的质量分数 C 从标准曲线上查
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