人工牛黄检验操作规程

中国 3000 万经理人首选培训网站 区 人工牛黄检验操作规程 一 范围 本标准规定了人工牛黄的检测方法和操作要求 适用于本公司人工牛黄的质量检测 二 引用标准 中国药典 2000 年版一部附录 卫生部标准 WS3 132 Z 122 98 三 质量标准 指标名称法定标准 性状本品应为黄色疏松的粉末 鉴别 1 2 3 4 应呈正反应 水分 5 0 检 查猪去氧胆酸应符合规定 胆 酸 13 0 胆红素 0 63 四 试剂 1 冰醋酸 AR 2 糠醛 AR 3 硫酸 AR 4 氯仿 AR 五 仪器和用具 1 紫外分光光度计 2 恒温干燥箱 六 对照品 1 胆酸对照品 2 猪去氧胆酸对照品 3 贝斯来对照品 中国 3000 万经理人首选培训网站 区 4 胆红素对照品 七 操作步骤 1 性状 本品为黄色疏松的粉末 味苦 微甘 2 鉴别 2 1 取本品适量 分为二份 置点滴板上 一份加硫酸 数分钟后显污绿色 另一份加 硝酸 显红色 2 2 取本品约 100mg 量瓶中 加甲醇 超志处理使充分提取后用甲醇稀释至刻度 静 置使澄清 取上清液作为供试品溶液 另取胆酸 猪去氧胆酸对照品 分别加甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液 作为对照品溶液 照薄层色谱法 2000 版中国药典一部附录 VIB 试验 吸收上述供试品溶液 4ul 对照品溶液 2ul 分别点于同一硅胶 G 薄层板上 以正丁醇 冰 醋酸 乙醇 水 4 2 1 1 为展开剂展开 取出 于 105 烘约 5 分钟 供试品色谱中 在 与对照品色谱相应的位置上 显相同的斑点 2 3 取本品加甲醇制成 1ml 2 4 取本品充 100mg 3 检查 3 1 水分 不得过 5 0 2000 版中国药典一部附录 IXH 法页 3 2 猪去氧胆酸 对照品溶液的配制 精密称取猪去氧胆酸对照品适量 用甲醇制成每 1ml 含 1mg 的溶液 供试品的溶液配制 精密称取供试品 100mg 用适量甲醇转移至 10ml 量瓶中 并稀释 至刻度 密塞 振摇 使样品中猪去氧胆酸溶解 放置 制成每 1ml 含 10mg 的溶液 取上 清液作为供试品溶液 检查法 照薄层色谱法 2000 年版中国药典一部附录 VIB 试验 精密量取供试品溶液 4ul 及对照品溶液 2ul 交叉点于同一硅胶 G 薄层板上 以异辛烷 正丁醚 冰醋酸 8 5 5 为展开剂 展开 取出晾干 喷以 10 磷钼酸的乙醇溶液 于 105 烘约 5 分钟 猪去氧胆酸斑点的颜色应深于对照品色谱 4 含量测定 4 1 胆酸 标准溶液的制备 取在 105 干燥至恒重的胆酸对照品 12 5mg 精密称定 置 25ml 量 中国 3000 万经理人首选培训网站 区 瓶中 加 60 冰醋酸溶液使溶解 并稀释至刻度 摇匀 即得 每 1ml 含胆酸 0 5mg 标准曲线的绘制 精密量取标准溶液 0 2 0 4 0 6 0 8 与 1 0ml 分别置于带塞试 管中 均用 60 冰醋酸溶液稀释成 1 0ml 加新配制的糠醛水溶液 1 100 各 1 0ml 在 冰浴中放置 5 分钟 加硫酸溶液 以硫酸 50ml 蒸馏水 65ml 混合制成 13ml 混匀 在 70 水浴中加热 10 分钟 迅速移至冰浴中 放置 2 分钟 以相应的试剂为空白 照分光光 度法 2000 年版中国药典一部附录 V 在 605nm 的波长处测定吸收度 以吸收度为纵坐标 浓度为横坐标 绘制标准曲线 测定法 取本品约 1 0g 精密称定 加 60 冰醋酸溶液数 ml 充分研磨 移入 50ml 量 瓶中 残渣再加 60 冰醋溶液 研磨后 全部移入量瓶中 再用 60 冰醋溶液稀释至刻度 摇匀 滤过 弃去初滤液 精密吸取续滤液各 1ml 分别置于甲 乙两个带塞试管中 于甲 管中加新配制的糠醛水溶液 lml 乙管中加水 1ml 作空白 按标准曲线的绘制项下的方法自 在冰浴放置 5 分钟 起 依法测定吸收度 标准曲线计算含量 即得 计算公式 MV 100 含量 Ms 1 水份 式中 M 从标准曲线中查得每 1ml 从试品含胆酸的 mg 数 V 供试品总体积数 Ms 供试品量 mg 4 2 胆红素 对照品溶液的制备 取胆红素对照品约 10 0g 精密称定 置 100ml 棕色量瓶中 加氯 仿 80ml 使溶解 超声处理 使充分溶解 加氯仿稀释至刻度 作为对照储备液 0 1mol L 精密吸取标准储备液 10 0ml 置 50ml 棕色量瓶中 加氯仿稀释至刻度 即 为标准溶液 20ug ml 中国 3000 万经理人首选培训网站 区 标准曲线的绘制 精密吸取胆红素对照液 4 0 5 0 6 0 7 0 与 8 0ml 分别置于 25ml 棕色量瓶中 用氯仿稀释至刻度 即得每 ml 含 3 2 4 0 4 8 5 6 6 4ug 胆红素的标准 液 在 453nm 处测定吸收度 以吸收度为纵座标 浓度为横座标 绘制标准曲线 测定法 取本品约 0 08g 精密称定 置 100ml 棕色量瓶中 加氯仿 80ml 超声处理使 充分溶解 取出 加氯仿稀释至刻度 摇匀 滤过 弃去初滤液 取续滤液在 453nm 测定 吸收度 按标准曲线计算含量 即得本品中胆红素 C33H36N4O6 的百分含量 中国 3000 万经理人首选培训网站 区 本品含胆红素 C33H36N4O6 不得少于 0 63 计算公式 MV 100 含量 Ms 式中 M 从