2010-9杨基础微生物TB

第14章分枝杆菌属 Mycobacterium 微生物学及免疫学教研室杨维青 细长略弯的分枝状杆菌抗酸阳性 胞壁中含有大量脂类 无鞭毛 无芽胞 不产生内 外毒素人型结核分枝杆菌牛型分枝杆菌麻风分枝杆菌非结核分枝杆菌 分枝杆菌属 第一节结核分枝杆菌 Mycobacteriumtuberculosis MTB 1882年3月24日宣布发现结核菌 1905年因对结核杆菌的研究获诺贝尔生理学奖 简称结核杆菌 引起结核病 tuberculosis TB 德国科学家Koch郭霍 科赫 细菌学之父 世界防治结核病日 3 242010年 第15个 立即动手控制结核 群策群力加速行动2009年控制结核 人人有责 关注农民工 共享健康2007年结核流行广泛控制从我做起2005年防治结核 早诊早治 强化基层 全球总疫情约20亿人感染了结核菌现症结核患者2000万每年新发患者数800万 1000万每年300万人死于结核病 我国疫情目前有近半数人口感染过结核菌现有肺结核患者450万每年新发肺结核患者145万每年因结核病死亡25万人 结核病患者数量居世界第二位 80 的患者在农村 75 的患者为中青年 难控制 预防 治疗 一 生物学性状 形态与染色培养特性抵抗力变异性 抗酸染色法 acid faststain 5 石炭酸复红加温染色3 盐酸酒精脱色美蓝复染结果 分枝杆菌呈红色其他细菌和背景物质为蓝色 细胞壁富含脂质 占细胞壁干重60 磷脂 脂肪酸 蜡质D 分枝菌酸 抗酸染色法 菌体细长略带弯曲 单个或分枝状排列 抗酸染色阳性 红色 陈旧培养物中 或抗生素治疗后形态不典型 出现L型结核杆菌L型的医学意义 形态与染色 专性需氧营养要求高罗 琴固体培养基pH6 5 6 8生长缓慢 12 24h 代时 3 4周可见菌落菌落 干燥 坚硬 表面颗粒状 形似菜花 液体培养呈粗糙皱纹状菌膜 培养特性 三不怕抗干燥抗酸碱抗染料 三怕湿热乙醇紫外线 抵抗力 强 易传播 脂质含量高 对患者相关物品的消毒 可用酸或碱浓集菌液 形态结构变异结核杆菌的L型 颗粒状 丝状 高渗培养 毒力变异BCG BacilleCalmette Gu rin 牛分枝杆菌经230次传代 成为减毒活疫苗株 耐药性变异耐异烟肼及其他抗结核药物 变异性 难治愈 易漏诊 二 致病性 致病物质菌体成分磷脂 单核细胞 形成结核结节 干酪样坏死 分枝菌酸 索状因子 中性粒细胞 引起肉芽肿 硫酸脑苷脂 吞噬细胞 使菌体在吞噬细胞内存活 蜡质D 引起迟发型超敏反应 结核菌素tuberculin 引起迟发型超敏反应荚膜 保护菌体 利于侵入 细菌增殖引起炎症反应 迟发型超敏反应引起的损伤 所致疾病 感染方式呼吸道 消化道或皮肤损伤侵入机体所致疾病结核病 以肺结核常见原发感染原发后感染 肺部感染 原发感染 外源性感染首次感染 多发生于儿童 无免疫力 形成原发灶 渗出性炎症病灶 经淋巴管的播散 引起肺门淋巴结肿大等原发综合征原发病灶纤维化 钙化 而自愈 少数病灶扩散 引起全身结核 原发型肺结核 哑铃征阴影 双肺对称分布 大小相等 密度均匀的粟粒样结节 血行播散导致粟粒型肺结核 肺部感染 原发后感染 多见成人多为内源性感染机体已有的免疫力 使病灶局限肉芽肿 结核结节 纤维化 干酪样坏死无淋巴管的播散 原发后感染 空洞 肺外感染 结核杆菌经血液 淋巴液扩散至 脑 肾 骨 关节 结核杆菌痰液经消化道 肠 腹腔艾滋病患者 全身播散性结核肺外感染大多与结核分枝杆菌L型有关 临床表现 全身症状 结核中毒症状 呼吸系统症状 午后低热 乏力 纳差 体重减轻 盗汗 月经不调 闭经 咳嗽 咳痰 咯血 胸痛 重者可出现呼吸困难 三 免疫性与超敏反应 免疫性 为感染免疫 infectionimmunity 又称有菌免疫 以T细胞为主的细胞免疫 迟发型超敏反应抗菌免疫与超敏反应的关系 二者共存 Tc细胞TH1细胞 郭霍现象 抗菌免疫与超敏反应的共存 以前感染过或免疫的豚鼠 未感染的豚鼠 24 48小时 10 14天 局部红肿 浅溃疡 局部红肿 溃疡 不扩散 脱落后自行愈合 坏死 经久不愈 有毒TB菌 全身扩散 皮下注射少量MTB 大量MTB 动物死亡 抗菌免疫 超敏反应 无抗菌免疫 结核菌素试验 tuberculintest 1 原理 迟发型超敏反应的皮肤试验 2 方法 将PPD注射于前臂掌侧皮内 48 72小时观察结果 旧结核菌素 oldtuberculin OT 纯蛋白衍生物 purrifiedproteinderivative PPD 结果判断 48 72小时测量皮肤硬节直径 结核菌素试验 3 结果 4 结果分析 红肿硬结 5mm为阳性 15mm为强阳性 5mm为阴性 红肿硬结小于5mm者 应考虑以下情况 结核菌素试验应用 用于婴幼儿结核病的诊断参考选择卡介苗接种的对象及测定免疫效果用于结核菌感染的流行病学调查测定肿瘤患者的细胞免疫功能 四 微生物学检查法 标本处理 痰液等 浓缩集菌 10万个 ml 直接镜检 抗酸染色分离培养 培养基 注意L型变异 鉴定 镜下形态 菌落特征快速诊断 结核菌素试验抗PPDIgG检测 作为活动性感染的辅助诊断PCR 痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据 五 防治原则 预防一般性预防 卫生宣传 提高机体抵抗力特异性预防 接种卡介苗免疫程序 新生儿初次免疫 7岁复种在农村12岁在复种治疗抗结核药物链霉素 异烟肼 利福平等治疗原则 早期 联合 适量 规律 坚持全程 降低耐药性 减少毒性 常用抗结核药 全杀菌药 异烟肼 利福平半杀菌药 链霉素 吡嗪酰胺等抑菌药 乙胺丁醇 对氨基水杨酸钠等 化疗方法 1 短程疗法 联用二种或二种以上杀菌剂组成高效杀菌力 疗程6 9月 2HSR 4 7HR2HSRZ 4 7HR2HRZ 4 7HRE 2 两阶段疗法 把疗程分成两个阶段 基于间歇疗法基础上提出 开始1 3月每日给药 强化阶段以后每周二次间歇给药 巩固阶段2HRZE 7H2R2E2 病历分析患者 女 23岁 发热 咳嗽 盗汗 乏力月余 一天前突然咯血200ml平素身体健康 无心脏病及支气管扩张病史 其妹妹患肺结核 正在治疗中 体格检查 38 100次 分 20次 分BP120 80mmHg 发育正常 营养中等 消瘦 表浅淋巴结未触及 左上肺及肩胛间区可闻及小水泡音 心脏听诊无异常 腹平软 肝脾未触及 胸片 第15章嗜血杆菌属 自学 布鲁菌属炭疽芽胞杆菌鼠疫耶尔森菌 第16章动物源性细菌 以动物为传染源 能引起动物和人类发生人畜共患病的病原体 称动物源性细菌 芽胞杆菌属 炭疽芽胞杆菌引起炭疽病 烈性人畜共患病 蜡样芽胞杆菌引起食物中毒 据世界卫生组织和有关研究部门提示 如将100kg的炭疽病原散布一个城市 可使数百万人受到感染 致病中毒 在未获防治情况下 百万生命毁于一旦 制造生物武器的首选原料 生物武器 白色粉末引起的恐慌 炭疽芽胞杆菌B anthracis 形态与染色革兰阳性粗大杆菌 致病菌中最大 呈竹节状排列 链杆菌 有氧时形成芽胞 有毒株有荚膜培养有毒株可形成粘液状菌落 有荚膜 无毒株则为粗糙状 菌落 卷发状 在普通肉汤中有絮状沉淀 无菌膜 菌液清亮 1 生物学性状 芽胞抵抗力强在干燥环境中可存活数十年 在皮毛中可存活数年 牧场一旦被污染 芽胞可存活数年至数十年 对消毒剂抵抗力强 但对碘特别敏感 对青霉素 先锋霉素 链霉素 卡那霉素等高度敏感 永不死亡的细菌 荚膜保护性抗原 PA 识别单位 炭疽毒素 三部分 水肿毒素 EF 致死毒素 LF 单一组分无毒性 PA和EF 损伤血管内皮细胞 引起水肿 扩散PA和LF 抑制和麻痹呼吸中枢 呼吸衰竭 致病物质 2 致病性 致病菌即沿淋巴管及血循环播散全身 形成败血症 死亡率高 一定数量的芽胞 皮肤破损处 胃肠道或呼吸道 细菌在局部繁殖 产生大量毒素 导致组织及脏器发生出血性浸润 坏死和严重水肿 形成原发性皮肤炭疽 肠炭疽及肺炭疽 当机体抵抗力降低时 皮肤炭疽 最常见 多发生于屠宰 制革或毛刷工人及饲养员 本菌由体表破损处形成水疖 水疱 脓疱 中央部呈黑色坏死 周围有浸润水肿 如不及时治疗 细菌可进一步侵入局部淋巴结或侵入血流 引起败血症死亡 肺炭疽 少见 由吸入病菌所致 多发生于皮毛工人 病死率高 病初似感冒 进而出现严重的支气管肺炎 可在2 3天内死于中毒性休克 肠炭疽 由食入病兽肉制品所致 以全身中毒症状为主 并有胃肠道溃疡 出血及毒血症 发病后2 3日内死亡 标本采集 注意个人防护 避免污染环境 标本置65 水溶30min 将非芽胞菌杀死 保留芽胞活性再进行增菌和分离培养 直接镜检发现G 大杆菌 两端平截 竹节状排列形成长链 并有明显荚膜 可见芽胞 芽胞为卵圆形 位于菌体中央菌体不膨大 可作初步报告 3 微生物检验 与产气荚膜杆菌的区别 将待检菌接种于含青霉素0 05 0 5U ml的培养基经37 培养6h后 炭疽杆菌可发生形态变化 显微镜下见大而均匀的圆球状菌体呈成串样排列其它需氧芽胞杆菌无此现象 青霉素串珠试验 3 微生物学检查 4 防治原则 对疫区的家畜进行预防接种 控制家畜感染和牧场的污染 对疫区的人员及易感人群接种炭疽杆菌减毒疫苗 首选青霉素治疗 第17章棒状杆菌属 Corynebacterium Neisser染色 出现异染颗粒metachromaticgranule 形态与染色 革兰阳性菌菌体细长微弯 一端或两端膨大呈棒状 常呈V L形排列 无荚膜 无鞭毛 不形成芽胞 Neisser或Albert染色 可出现异染颗粒 核糖核酸 多偏磷酸盐 有重要鉴定意义 一 生物学性状 培养特性 营养要求较高吕氏培养基 含有凝固血清 上生长迅速 异染颗粒明显 灰白色小菌落 选择鉴别培养基亚碲酸钾血平板 黑色菌落 菌体使亚碲酸钾还原生成元素碲 抵抗力 对湿热抵抗力弱抗日光 寒冷和干燥对青霉素 氯霉素 红霉素敏感 二 致病性 K抗原 抗吞噬白喉外毒素 棒状杆菌噬菌体带有编码外毒素的tox基因 在溶原状态即可产生 作用多种细胞干扰蛋白合成 如心肌 神经细胞 索状因子 破坏细胞中的线粒体 致病物质 溶原性转换 B链 结合亚单位A链 毒性亚单位 灭活延伸因子 2 影响蛋白质合成 白喉外毒素作用机制 所致疾病 白喉 急性呼吸道传染病 细菌 上呼吸道粘膜 生长繁殖 产生毒素 细菌与毒素共同作用引起局部症状 炎症 坏死 纤维蛋白渗出 假膜 窒息毒素入血 毒血症 引起全身中毒症状外周神经 神经炎 膈肌麻痹 呼吸困难声带麻痹 声音嘶哑软颌麻痹 吞咽困难心肌 心肌炎 易感者 1 5岁儿童 白喉假膜 抗毒素感染后机体可获得牢固的免疫力 免疫性 三 微生物学检查法 直接涂片镜检 形态 异染颗粒 分离培养 吕氏血清培养基 亚碲酸钾平板毒力鉴定 动物试验 Elek平板毒力实验 Elek平板试验 ElekTest 沉淀线 阳性 含白喉抗毒素滤纸片 白喉杆菌阳性对照菌苔 待检菌有沉淀线 即为白喉杆菌 阴性对照 4 防