TBE—300A_型高速逆流色谱仪标准操作规程.doc

TBE300B 型高速逆流色谱仪标准操作规程一、准备工作 开机前先除去管路中的空气，对溶剂体系进行超声脱气处理。同时确定样品中无明显固体杂质。二、操作步骤1.恒温水浴锅开启,按SET,直至出现”sp”,调节旋钮将温度设定为室温.放开SET,显示实际水温,视需要开启制冷开关.2. 将两个砂芯过滤器放入固定相中,开泵.(主机:INJECT)(1)按“L”设置泵流量(最大值20ml/min) 按“pav/save”保存.(2)按“P”,设置H/P,H:0.1-19.9 P:0.1-20,按“pav/save”保存.(3)按“RUN/CANCEL”,面板上显示的是实时监测到的压力值.3.开紫外监测仪电源,预热半小时.4.当废液瓶中有液体流入时说明固定相已泵满,按“pav/save”使泵暂停.打开主机电源.正转:按“FWD”,正转指示灯亮,缓慢将旋钮旋至所需的主机转速（如：850r/min）;反转:按“REV”,反转指示灯亮.5.将泵的两个砂芯放入流动相中，重复，设定流动相流速（如L=2ml/min）.6.观察废液瓶中接受到的液体情况，当溶液出现分层后，仔细观察流入的废液。待流入的全部为下相的溶液时，表示系统平衡完成.7.产品分离 设定紫外检测器的检测波长（254nm，280nm，365nm等），调整吸光度读数为0.000. 打开电脑，开启色谱工作站，打开通道1或者2 ，在方法项下设定好积分参数、文件保存路径等，进入“采集”项，点击查看基线. 待分离的产品用系统的上相，下相或者上下相混合溶液适量溶解. 将手柄箭头指向“LOAD”档，以注射器插入溢出口，向内推入空气，使进样管内的气泡由进样品排出。观察气泡完全排净后，将进样口的管路插入样品溶液中回抽注射器，将样品吸入进样管路内。样品被完全吸收后，将手柄箭头指向“INJECT”档，样品被注入管路. 点击色谱工作站中“数据采集”，开始采集数据.根据图谱显示的出峰情况，分别收集所需的成分.三 关机过程1. 点击色谱工作站中的“停止采集”，谱图自动积分，关闭检测器.2 缓慢调节主机转速旋钮至转速为0，按“STOP”键停止主机运转，按“PAV/SAVE”停止泵液.3. 断开主机和泵之间的连接，将主机和N2瓶的连接，调整N2瓶压强为0.20.3MPa（先打开N2瓶总阀，再缓慢打开N2瓶的减压阀），直接出液口无液体流出.4. 再次连接主机和泵，将两砂芯放入甲醇或乙醇中，开泵（L：20ml/min ；H：10.0kg ）大概300400ml时有液体从出液口流出，停泵.5. 断开主机和泵，再次连接N2和主机，打开主机，按“REV”，反向吸，速度调至250r/min300 r/min，直至出液口无液体流出.6. 停气关泵关主机关水浴.请大家严格依照上述规程进行仪器操作，以免仪器出现不必要的磨损及故障请大家严格依照上述规程进行仪器操作，以免仪器出现不必要的磨损及故障请大家严格依照上述规程进行仪器操作，以免仪器出现不必要的磨损及故障请大家严格依照上述规程进行仪器操作，以免仪器出现不必要的磨损及故