胰岛素干预在2型糖尿病大鼠合并尿路感染的效果尹进波.doc

胰岛素干预在2型糖尿病大鼠合并尿路感染的效果尹进波 论著开放科学（资源服务）标识码（）胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染的效果尹进波，周宗爱，汤智越，金家温，王新红，方卫，陈年由（温州医科大学附属苍南医院内分泌科，浙江温州）摘要目的探讨胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染中的应用效果。 方法对年月年月内只清洁的近交系雌性大鼠行高糖、高脂的饲料进行饲养，随后进行的链霉素（，）注射，其配比方法为将加入为的的枸橼酸钠缓冲液中，最终将其浓度调整为。 并于注射后的第周再次进行小时摄食量、体质量、血压、甘油三酯、胆固醇、血糖以及血浆胰岛素水平测定。 同时，对大鼠行胰岛素抵抗实验，从而判断型糖尿病大鼠建模是否成功。 对建模成功的糖尿病大鼠禁水处理，后行的乌拉坦进行腹腔注射进行尿路感染。 将感染成功的小鼠随机分为两组，对照组大鼠行尿路清治疗，研究组大鼠行尿路清胰岛素干预，连续治疗后，对治疗效果进行观察，并探究胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染作用机制。 结果造模后，大鼠摄食量、体质量、血压、甘油三酯、胆固醇、血糖、血浆胰岛素皆高于造模前（），造模后大鼠血糖水平皆，所有大鼠型糖尿病造模成功；对型糖尿病大鼠进行尿路感染，有例大鼠出现了尿频、尿急、排出尿液浑浊且有异味的症状。 且这些大鼠的血清、分别、；这例糖尿病大鼠感染成功。 治疗后，两组大鼠的空腹血糖（，）、总胆固醇（，）、甘油三酯（，）、白细胞介素（，）、白细胞介素（，）水平均有缓解，但研究组优于对照组（）；对照组大鼠的细胞间黏附分子（，）的表达含量高于研究组。 结论相比于单用尿路清治疗型糖尿病合并尿路感染大鼠，加入胰岛素干预效果更佳，效果体现在改善血糖、血脂。 关键词型糖尿病模型；尿路感染；胰岛素；尿路清；（）；修回日期基金项目浙江省温州市卫计委面上项目（），（，），（），（），中华医院感染学杂志年第卷第期，（）（），（），（），（），（）（）“”，；，糖尿病是内分泌科最常见的疾病之一，根据发病原因的不同，临床上又将其分为两类型糖尿病与型糖尿病，而型糖尿病的发病人数约占总人数的。 糖尿病有许多并发症，如糖尿病足、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变。 若患者不及时对血糖进行控制，会增加不良血管事件的发生率，有着较高的致残率与致死率。 近年来，我国糖尿病发生率越来越高，其中型糖尿病占以上，由于其具有较高的致残率与致死率，引起社会广泛的关注。 因而，建立型糖尿病模型并探究有效的治疗方式与作用机制就显得尤为重要。 当前国内建立糖尿病模型常采用链霉素（，）进行诱导，而此模型相对于型糖尿病，其发病机制更类似于型糖尿病。 为此，选择将大鼠先行高糖、高脂食物饲养，出现胰岛素抵抗后继续行低剂量诱导，此模型发病过程与部分患者临床发病过程与代谢特征较为相似，是研究型糖尿病并发症的理想模型。 目前临床研究中对于胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染中的研究较少，同时对于实验结果的效果也存在争议。 本研究制作大鼠尿路感染模型，随后进行胰岛素干预，从而探究胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染治疗中的应用价值。 材料与方法动物与材料动物选择年月年月内清洁的近交系雌性大鼠只为研究对象，购于中科院上海实验动物中心，放于无菌环境下饲养，正常食用无菌饲料、无菌蒸馏水。 体质量为。 本研究经医院伦理委员会审批。 实验试剂、胰岛素、生长抑素以及戊巴比妥钠（公司）；胆固醇（北京生化制药厂），白细胞介素（，）、白细胞介素（，）试剂盒（北京北方生物技术研究中心）。 方法建模方法大鼠行高糖、高脂的饲料进行饲养，具体成分见表，后，对大鼠的摄食量、体质量、血压、空腹血糖（，）、总胆固醇（，）、甘油三酯（，）以及血浆胰岛素水平进行测定。 血标本采集方法为，用的戊巴比妥麻醉，剂量为，随后经眼的内眦静脉抽取，并行抗凝处理。 随后进行的注射，其配比方法为将加入为的的枸橼酸钠缓冲液中，最终将其浓度调整为。 并于注射后的第周再次进行摄食量、体质量、血压、甘油三酯、胆固醇、血糖以及血浆胰岛素水平测定。 同时，对大鼠行胰岛素抵抗实验。 大鼠置于无菌环境中饲养，每进行无菌饲料替换，每只为一笼，每天进行的光照，自由进食进水。 表高脂饲料的具体成分项目成分比例（）能量（）蛋白质脂肪碳水化合物胆固醇其他合计血压测定使用的戊巴比妥钠（）对大鼠进行全麻后，用的利多卡因局麻，后行颈动脉内插管，后用压力测定后颈动脉平均动脉压力。 生化分析方法采用葡萄糖氧化法对血糖进行测定，采用酶联免疫试剂对大鼠血糖进行检测，选择自动生化仪检测血甘油三酯、胆固醇。 所有操作皆按照说明书进行。 若大鼠的血标本检测中血糖中华医院感染学杂志年第卷第期超过且对胰岛素敏感性降低，则可以判断建模成功。 对糖尿病大鼠行尿路感染将建模成功的大鼠禁水处理，后行的乌拉坦进行腹腔注射，后将大鼠进行麻醉，并清除下腹部的鼠毛，对尿道口进行结扎，消毒后，于下腹部正中处做的切口，并用号的小针头对抽取的大肠菌液注入膀胱。 随后，将切口缝合，后将尿道结扎切口松开，并恢复自由饮水。 于次日清晨观察大鼠尿路感染是否成功，若大鼠出现尿频、尿急、排出尿液浑浊且有异味的症状，且体内、水平高于正常，则判断感染成功。 胰岛素干预治疗将感染成功的型糖尿病合并尿路感染大鼠随机分为两组。 对照组大鼠行尿路清治疗，以灌胃治疗，研究组大鼠行尿路清胰岛素干预，胰岛素使用量按照大鼠尾静脉检测的空腹血糖量进行调整（），尿路清使用量同对照组。 连续治疗后，对治疗效果进行观察。 大鼠体内炎症因子水平测定治疗前及治疗后测定大鼠体内、水平，大鼠尾静脉抽血，检测过程严格按照试剂盒说明进行。 细胞间黏附分子测定取右肾组织做切片，采免疫组化法（德国徕卡全自动免疫组化染色机）检测细胞间黏附分子（，）表达水平。 统计分析数据应用统计学软件进行分析，其中计数资料以例数或百分比表示，比较采用检验，正态分布的计量资料以（珚）表示，比较采用检验，治疗前后比较应用配对检验。 为差异有统计学意义。 结果大鼠糖尿病建模前后主要生理指标比较造模后，大鼠摄食量、体质量、血压、甘油三酯、胆固醇、血糖、血浆胰岛素皆高于造模前，差异有统计学意义（），造模后大鼠血糖水平皆，所有大鼠型糖尿病造模成功，见表。 表大鼠糖尿病建模前后主要生理指标比较（珚）（珚）项目建模前（）建模后（）值值摄食量（）体质量（）血压（）甘油三酯（）胆固醇（）血糖（）血浆胰岛素（）型糖尿病伴尿路感染大鼠治疗前后各指标比较对型糖尿病大鼠进行尿路感染，有例大鼠出现了尿频、尿急、排出尿液浑浊且有异味的症状。 且大鼠的血清、分别、。 这例糖尿病大鼠感染成功。 治疗前，两组大鼠的、水平差异均无统计学意义；治疗后，两组大鼠各指标均降低，且研究组优于对照组，差异有统计学意义（），见表。 型糖尿病伴尿路感染大鼠肾组织表治疗前后两组大鼠各指标比较（珚）（珚）项目对照组（）治疗前治疗后差值研究组（）治疗前治疗后差值（）（）（）（）（）注，配对检验；，检验。 表达对照组大鼠的的表达含量高于研究组，见图。 讨论型糖尿病患者发病本质可以归为胰岛素抵抗（胰岛素作用受损）、胰岛素分泌障碍。 尿路感染（，）是临床上常见的感染性疾病之一，根据流行病学统计，全球每年的新增患者人数可以达到亿。 尿路感染的发病原因多种多样，糖尿病可作为独立危险因素，中华医院感染学杂志年第卷第期（）（）注对照组；研究组。 图型糖尿病伴尿路感染大鼠肾组织表达不受年龄、性别、机体免疫状态以及尿路结构异常等因素的影响。 相关研究表明，非糖尿病患者尿路感染的发生率为，而糖尿病患者尿路感染的发生率约为，且糖尿病患者每个年龄段的尿路感染的发病率皆高于非糖尿病患者。 而尿路感染又是糖尿病常见的并发症之一，若不及时进行治疗或者治疗方案不佳，不仅增加了耐药菌的产生，使病程延长，也能进一步加重糖尿病病情的进展，损害患者的机体健康，亦给患者带来心理压力，给家庭造成经济负担。 本研究为探究胰岛素干预在型糖尿病大鼠合并尿路感染作用机制，对型糖尿病伴尿路感染的大鼠随机分为两组，对照组大鼠行尿路清治疗，以灌胃治疗，研究组大鼠行尿路清胰岛素干预，胰岛素使用量按照大鼠尾静脉检测的空腹血糖量进行调整，连续治疗后观察治疗效果。 本研究将大鼠行高糖、高脂食物饲养，出现胰岛素抵抗后继续行低剂量诱导。 造模后，大鼠摄食量、体质量、血压、甘油三酯、胆固醇、血糖、血浆胰岛素皆高于造模前，造模后大鼠血糖水平皆，这表明所有大鼠型糖尿病造模成功。 在此基础上对型糖尿病大鼠进行尿路感染，有例大鼠出现了尿频、尿急、排出尿液浑浊且有异味的症状。 且这些大鼠的血清、分别、，这表明，出现上述症状的例糖尿病大鼠感染成功。 在此基础上进行胰岛素干预。 胰岛素是临床上糖尿病患者的常用药，此药不仅能降低患者体内血糖水平，可具有保护血管内皮、扩张血管、抗炎、抗血小板聚集、抗动脉硬化等作用。 多项临床研究结果表明，规律行胰岛素治疗者可以较好的控制血糖水平，减缓糖尿病的进一步发展，降低糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病等并发症的发生率。 本研究结果显示，治疗前，两组大鼠的、水平皆无明显差异，而治疗后，两组大鼠各指标皆有缓解，但研究组优于对照组，这表明，行胰岛素干预的大鼠，其血糖水平、血脂水平控制较佳。 大多数糖尿病患者皆出现代谢紊乱症状，例如糖代谢、脂肪代谢的异常，蛋白质合成明显减少，因此，患者体内的免疫球蛋白、抗体水平皆有所降低。 患者的免疫功能受到破坏，难以抵抗细菌的侵袭。 相关研究资料表明，糖尿病患者体液免疫功能明显降低，患者中白细胞转化率较健康人群明显降低，且白细胞的游走、趋化、吞噬功能皆受到抑制，杀菌能力明显降低。 除此之外，糖尿病患者的机体中，尤其是肾组织与尿路中核因子（，）、肿瘤坏死因子（，）、单核细胞趋化蛋白（，）、等炎症因子的水平远远高于正常患者。 这些炎症因子不仅能够增强单核细胞、血管内皮细胞以及中性粒细胞间的黏附作用，也能够诱导单核细胞的趋化，从而使更多的单核细胞被激活，并释放大量的细胞因子。 这些细胞因子常常通过自分泌与旁分泌作用使炎症呈级联放大，不仅使尿路感染的发生概率增大，亦能够对肾脏造成损害。 有研究资料显示，若机体长期处于高糖状态，其体内的表达水平与单核巨噬细胞浸润程度呈正相关，分析其原因，为一种单链跨膜糖蛋白，分布较为广泛，在血管内皮细胞、单核巨噬细胞以及活化的淋巴细胞、甚至成纤维细胞中均有表达。 高糖状态下，过度表中华医院感染学杂志年第卷第期达的可以增强内皮细胞与单核细胞间的黏附作用，从而造成血管内皮的损伤，在此基础上，血管通透性不断增大，血小板聚集不断增多，局部的炎症反应不断扩大。 而主要由活化的细胞与成纤维细胞产生，能刺激细胞前体进一步分化为产生抗体的细胞，在细胞免疫与体液免疫中发挥着不可替代的作用。 属于趋化因子的一种，不仅可以促进血管的生成，对多种白细胞皆有趋化、激活作用，在免疫反应、炎症反应中作用巨大。 而通过治疗前后以上三种指标的检测，结果显示治疗前，两组大鼠的、水平无明显差异，经过治疗后，两组大鼠各指标明显降低，但研究组明显低于对照组；同时对照组大鼠的的表达含量明显高于研究组，这表明胰岛素除了通过降低血糖来控制尿路感染外，其本身也具有抗炎作用。 综上所述，相比于单用尿路清治疗型糖尿病合并尿路感染大鼠，加入胰岛素干预效果更佳，不仅可以对血糖进行有效控制，降低感染的发生，同时胰岛素又具有保护血管内皮、扩张血管、抗炎、抗血小板聚集的作用，降低局部炎症的发生发展。 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