芳胺类药物分析

第七章芳胺类药物的分析 检查 含量测定 结构 性质 鉴别 第一节对氨基苯甲酸酯类药物的分析 对氨基苯甲酸酯母核 一 结构 盐酸普鲁卡因 一 结构 盐酸丁卡因 苯佐卡因 返回 二 性质 水解特性 紫外吸收 弱碱性 芳伯氨基特性 弱碱性 除苯佐卡因外均具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子 故具有弱碱性 能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应 可用非水碱量法滴定 返回 芳伯氨基特性 多具有芳伯氨基 丁卡因无 可以发生重氮化 偶合反应 可与芳醛缩合反应 生成schiff碱 可用于定性鉴别 含量测定 返回 水解特性 具有酯键 或酰胺键 易水解 光线 热或碱性条件可以促进其水解 影响药品质量 因此必须对其水解产物的限量加以控制 多用于杂质检查 也用于定性鉴别 返回 紫外吸收 本类药物都有苯环 在紫外光区有吸收 三 鉴别 重氮化 偶合反应 水解反应 氯化物反应 红外光谱法 重氮化 偶合反应 分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 均可发生重氮化 偶合反应 生成橙红色偶氮化合物 此即为芳香第一胺反应 盐酸普鲁卡因的鉴别 供试品 约50mg 0 1mol L亚硝酸钠溶液 数滴 溶解 稀盐酸 1ml 碱性 萘酚溶液 数滴 橙黄到猩红色 重氮化 偶合反应 盐酸丁卡因与亚硝酸钠的反应 盐酸丁卡因不具有芳伯氨基 无重氮化 偶合反应 但其结构中的芳香仲胺在酸性溶液中也可与亚硝酸钠发生反应 生成乳白色的N 亚硝基化合物沉淀 可与含有芳伯氨基的同类药物区别 返回 水解产物的反应 三 鉴别 反应式 水解产物的反应 三 鉴别 反应式 盐酸普鲁卡因的鉴别 三 鉴别 供试品 约0 1g 10 氢氧化钠溶液 1ml 溶解 水 2ml 水解产物的反应 油状物 加热 加热 能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色 放冷 盐酸酸化 油状物消失 加热 返回 方法1 三 鉴别 供试品溶液 硝酸银试液 硝酸 使成酸性 氯化物的反应 沉淀溶解 硝酸 沉淀加氨试液 一般鉴别实验 方法2 三 鉴别 供试品少量 氯化物的反应 二氧化锰 试管 等量 混匀 硫酸 使湿润 加热 氯气 能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色 返回 红外吸收光谱法 中国药典 2015 收载盐酸普鲁卡因 盐酸丁卡因 苯佐卡因均可采用此法鉴别 供试品的红外吸收图谱与对照图谱比较 应一致 三 鉴别 返回 盐酸普鲁卡因注射液水解生成对氨基苯甲酸 PABA 和2 二乙氨基乙醇 其中PABA经长期贮存或高温加热 可进一步脱羧转化为苯胺 苯胺又可被氧化为有色物质 使注射液变黄 导致药物疗效下降 甚至会增加毒性 盐酸普鲁卡因注射液的对氨基苯甲酸检查 返回 中国药典 2015年版 规定盐酸普鲁卡因注射液用HPLC法检查PABA 五 含量测定 亚硝酸钠滴定法 非水滴定法 返回 亚硝酸钠滴定法 五 含量测定 原理 反应条件 指示终点的方法 实例分析 返回 亚硝酸钠滴定法 原理 酸性溶液中芳伯氨基药物与NaNO2定量反应 生成重氮化合物 含潜在芳伯氨基药物 先经处理得到芳伯氨基 再测定 返回 亚硝酸钠滴定法 反应条件 温度太低则重氮化反应速度慢温度太高会使亚硝酸逸失 且会使重氮盐分解 温度 室温 10 30 滴定 酸度大反应向左进行 重氮盐稳定 但若酸度过大 反而影响重氮化反应速度 且太浓的盐酸还会使亚硝酸分解 盐酸的量与芳胺类药物最佳比为1 2 5 6 0 酸度加过量盐酸加速反应 酸度过量盐酸 先快 开始时为避免滴定过程中亚硝酸的挥发和分解 将滴定管尖端插入液面下约2 3处 一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入 使亚硝酸在强烈搅拌下迅即四方扩散并立即与芳伯氨基反应 速度与方式先快后慢 滴定管尖端插入液面下2 3滴定 后慢 在近终点时 应将滴定管尖端提出液面 用少量水淋洗尖端后 缓缓滴定至终点 接近终点时 每滴入一滴或半滴亚硝酸钠滴定液后 须搅拌1min后 再观察终点是否真正到达 溴化钾加入适量溴化钾作催化剂 返回 亚硝酸钠滴定法 指示终点的方法 永停滴定法 电位滴定法 外指示剂法 内指示剂法 亚硝酸钠滴定法 指示终点的方法 永停滴定法 返回 亚硝酸钠滴定法 实例分析 取盐酸普鲁卡因0 5930g 精密称定 加水40ml与盐酸液 1 2 15ml 置电磁搅拌器上 搅拌使溶解 再加溴化钾2g 照永停滴定法插入铂 铂电极后 将滴定管尖端插入液面下约2 3处 用亚硝酸钠滴定液 0 1055mol L 迅速滴定 随滴随搅拌 至近终点时将滴定管尖端提出液面 用少量水淋洗 亚硝酸钠滴定法 实例分析 继续缓缓滴定 至电流计指针突然偏转不再回复 即为终点 消耗亚硝酸钠滴定液 0 1055mol L 20 10ml 中国药典 2015 规定 每1ml亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 相当于27 28mg的C13H20N2O2 HCl 本品按干燥品计算 含C13H20N2O2 HCl不得少于99 0 请问 该供试品含量是否合格 亚硝酸钠滴定法 实例分析 盐酸普鲁卡因的百分含量 97 55 97 55 99 0 试验证明该盐酸普鲁卡因供试品含量不合格 返回 非水滴定法 盐酸丁卡因的含量测定采用非水滴定法 本品为有机碱的盐酸盐 分子结构中含有脂烃胺侧链 具弱碱性 可用非水碱量法测定含量 将供试品溶解在冰醋酸中 以结晶紫为指示剂 以高氯酸液滴定至蓝色为终点 非水滴定法 P139 方法 非水定碱法 溶剂 滴定液 指示剂 空白试验 HAcHClO4结晶紫 Hg Ac 2作用 消除HCl的干扰 非水定碱法 因某某卡因显弱碱性 非水滴定法 实例分析 取盐酸丁卡因约0 2032g 精密称定 加冰醋酸25ml与醋酐5ml溶解后 加热回流2分钟 放冷 加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液1滴 用高氯酸滴定液 0 09962mol L 滴定 至溶液显蓝色 消耗高氯酸滴定液 0 09962mol L 6 76ml 空白试验消耗高氯酸滴定液 0 09962mol L 0 02ml 非水滴定法 实例分析 中国药典 2015年版 规定 每1ml高氯酸滴定液 0 1mol L 相当于30 08mg的C15H24N2O2 HCl 本品按干燥品计算 含C15H24N2O2 HCl不得少于99 0 请问 该供试品含量是否合格 非水滴定法 实例分析 盐酸丁卡因的百分含量 99 39 99 39 99 0 试验证明该盐酸丁卡因供试品含量合格 二 芳酰胺类药物的分析 检查 含量测定 结构 性质 鉴别 对乙酰氨基酚 一 结构 醋氨苯砜 盐酸利多卡因 盐酸布比卡因 返回 二 性质 酚羟基特性 与重金属离子发生沉淀反应 弱碱性 水解特性 紫外吸收 返回 弱碱性 利多卡因和布比卡因具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子 显弱碱性 可以成盐 可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应 其中与三硝基苯酚试液反应生成的沉淀具有一定的熔点 可用于鉴别 含量测定 也可借此将二者与对乙酰氨基酚区别开来 返回 水解特性 水解后具有 潜在 芳伯氨基对乙酰氨基酚水解产物为醋酸 可与乙醇反应 发出醋酸乙酯的香味 可用于鉴别 水解速度受空间位阻影响 对乙酰氨基酚大于利多卡因及布比卡因 返回 酚羟基特性 对乙酰氨基酚具有酚羟基 与FeCl3发生呈色反应 可用于鉴别 返回 与重金属离子发生沉淀反应 盐酸利多卡因和盐酸布比卡因可在水溶液中与Cu2 Co2 络合 生成有色沉淀 可用于鉴别 返回 二 性质 紫外吸收 本类药物都有苯环 在紫外光区有吸收 返回 三 鉴别 测定衍生物熔点 氯化物反应 重氮化 偶合反应 三氯化铁反应 重金属离子反应 光谱法 紫外 红外 返回 重氮化 偶合反应 对乙酰氨基酚具有潜在芳伯氨基 在酸性条件 盐酸或硫酸 下加热水解 再加亚硝酸钠试液 可发生重氮化 偶合反应 对乙酰氨基酚的鉴别 供试品 约0 1g 亚硝酸钠溶液 5滴 放冷 取0 5ml 稀盐酸 5ml 碱性 萘酚溶液 2ml 红色 重氮化 偶合反应 水浴加热 40分钟 水 3ml 返回 对乙酰氨基酚栓的鉴别 供试品适量 约相当于0 3g 振摇 冷却 滤过 水 20ml 即显蓝紫色 取滤液5ml 三氯化铁反应 水浴加热 60 三氯化铁试液 1滴 返回 供试品 取该溶液 溶解 2ml 硫酸铜试液 0 2ml 氯仿层显黄色 重金属离子反应 与铜离子反应 盐酸利多卡因的鉴别 0 2g 水 20ml 碳酸钠试液 1ml 显蓝紫色 氯仿 2ml 振摇 返回 四 检查 对氨基酚 对乙酰氨基酚的检查 有关物质 乙醇溶液的澄清度与颜色 返回 乙醇溶液的澄清度与颜色 对乙酰氨基酚易溶于乙醇 生产工艺中使用铁粉作为还原剂 可能带入成品中 致使乙醇溶液产生浑浊 中间体对氨基酚的有色氧化产物 在乙醇溶液中显橙红色或棕色 乙醇溶液的澄清度与颜色 检查方法 取本品1 0g 加乙醇10ml溶解后 溶液应澄清 无色 如显浑浊 与1号浊度标准液比较 不得更浓 如显色 与棕红色2号或橙红色2号标准液比较 不得更深 返回 本品的生产工艺路线较多 不同生产工艺路线会引入不同的杂质 这些杂质多为反应中间体 副产物及分解产物 主要包括 对氨基酚 对氯乙酰苯胺等 中国药典以对氯乙酰苯胺为对照品 采用薄层色谱法对此项杂质进行限度检查 有关物质 返回 本品在合成或贮藏过程中 均可引入对氨基酚 对氨基酚会使本品产生色泽并对人体有毒性 应严格控制其限量 可利用对氨基酚在碱性条件下能与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物 而对乙酰氨基酚无此反应的特点 将供试品与对照品比较进行限量检查 对氨基酚 检查方法 取本品1 0g 加甲醇溶液 1 2 20ml溶解后 加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml 摇匀 放置30min 如显色 与对乙酰氨基酚对照品1 0g加对氨基酚50 g用同一方法制成的对照液 临用配制 比较 不得更深 0 005 对氨基酚检查 返回 五 含量测定 非水滴定法 紫外分光光度法 返回 非水滴定法 盐酸利多卡因和盐酸布比卡因的分子结构中虽然具有潜在芳伯氨基 但由于受空间位阻影响 其水解较慢 不适宜用重氮化法测定 而盐酸利多卡因结构中含有脂烃胺基 盐酸布比卡因侧链哌啶环上的叔胺氮 均具有弱碱性 可以采用非水溶液滴定法进行含量测定 非水滴定法 实例分析 盐酸布比卡因 取本品约0 1970g 精密称定 加冰醋酸20ml与醋酸汞试液5ml溶解后 加萘酚苯甲醇指示液5滴 用高氯酸滴定液 0 1084mol L 滴定至溶液显绿色 消耗高氯酸滴定液5 56ml 空白试验消耗高氯酸滴定液0 04ml 每1ml高氯酸滴定液 0 1mol L 相当于32 49mg的C18H28N2O HCl 本品按干燥品计算 含C18H28N2O HCl不得少于98 5 请问 该供试品含量是否合格 盐酸布比卡因的百分含量 98 68 98 68 98 5 试验证明该盐酸布比卡因供试品含量合格 紫外分光光度法 对乙酰氨基酚的测定方法 取本品约40mg 精密称定 置250ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液50ml溶解后 加水至刻度 摇匀 精密量取5ml 置100ml量瓶中 加0 4 氢氧化钠溶液10ml 加水至刻度 摇匀 照分光光度法 在257nm的波长处测定吸收度 按C8H9NO2的吸收系数 为715计算 即得 一 苯乙胺类基本结构 R 第二节苯乙胺类药物分析 肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素 苯乙胺类结构与性质的关系 脂烃胺生物碱沉淀剂 非水碱量法测含量 手性碳光学活性 邻苯二酚 酚羟基易氧化三氯化铁反应 一 与三氯化铁试液反应 邻苯二酚肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素盐酸异丙肾上腺素 二 鉴别反应 例肾上腺素ChP 2015 鉴别 1 取本品约2mg 加盐酸溶液 9 1000 2 3滴溶解后 加水2ml与三氯化铁试液1滴 即显翠绿色 例盐酸异丙肾上腺素ChP 2015 鉴别 1 取本品20mg 加水2ml溶解后 加三氯化铁试液2滴 即显深绿色 例肾上腺素ChP 2015 鉴别 取本品10mg 加盐酸溶液 9 1000 2ml溶解后 加过氧化氢试液10滴 煮沸 即显血红色 二 氧化呈色反应 三 亚硝基铁氰化钠法 间羟胺含伯氨基 加亚硝基铁氰化钠显红紫色 与其他药物相区别 小问题 亚硝基铁氰