16胭脂红检验标准操作规程.doc

保定中药制药有限公司GMP文件题 目：胭脂红检验标准操作规程文件编码：SOP-ZLF-016-00页 数：4页制 定 人：审 核 人：批 准 人：颁发部门：质量部制定日期：审核日期：批准日期：生效日期：分发部门：行政办公室、质量部目 的：建立胭脂红检验标准操作规程。范 围：胭脂红的检验。责 任：检测中心负责人、化验员对本规程负责实施。内 容：1外观：本品为红色至深红色粉末。2鉴别2.1仪器及用具：分光光度计、层析滤纸、层析缸、微量进样器等。2.2试剂及试液：无水乙醇、正丁醇、乙酸铵、氨水2.3测定法2.3.1称取0.1g试样,精确至0.01g,溶于100mL水中,呈红色澄清溶液,试样微溶于乙醇,不溶于油脂,具有酸性染料的特性,能使动物纤维染色。2.3.2称取0.001g试样,溶于100mL乙酸铵溶液中,其最大吸收波长为5082nm。2.3.3取试样水溶液做纸上层析,其主色点的Rf值,应与标准样品相同。2.3.3.1纸上层析的条件：展开剂：正丁醇无水乙醇氨水溶液623。温度：2025。试验溶液浓度：0.1g/100mL。试验溶液用量：2L。展开剂前沿上升限度：150mm。3.含量测定3.1三氯化钛滴定法3.1.1试液及试剂：盐酸、硫酸亚铁铵、三氯化钛、柠檬酸三钠、硫氰酸铵200g/L溶液、硫酸（1：1）溶液、重铬酸钾0.1mol/L标准溶液、新配制的三氯化钛标准溶液0.1mol/L、钢瓶装二氧化碳等。3.1.2测定法：称取约5g试样,精确至0.0002g,溶于100mL新煮沸并冷却至室温的蒸馏水中,移入500mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。准确吸取50mL,置于500mL锥形瓶中,加入柠檬酸三钠15g,水150mL,按图1装好仪器,在液面下通入二氧化碳气流的同时,加热至沸,并用三氯化钛标准溶液滴定到无色为终点。3.1.3计算： 胭脂红的质量百分含量(X1)按式(1)计算：Vc0.1511x1100 (1)50m500式中：V滴定试样耗用的三氯化钛标准溶液的体积,mL；C三氯化钛标准溶液的实际浓度,mol/L；0.15111.00mL三氯化钛标准溶液c(TiCl3)1.000mol/L相当的以克表示的胭脂红质量；m试料的质量,g。3.1.4允许偏差：二次平行测定结果之差不大于1,取其算术平均值作为测定结果。3.2分光光度比色法3.2.1试液及试剂：10mm比色皿3.2.2胭脂红标样溶液的制备：称取胭脂红标准样品0.500g,精确至0.0002g,溶于适量水中,移入100mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。准确吸取10mL,移入500mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。3.2.3.胭脂红试验溶液的制备：称量与操作方法同标准溶液的制备。3.2.4测定法：将标样溶液和试验溶液置于10mm比色皿中,在508m波长处用分光光度计测定各自的吸光度。以水作参比液。3.2.5计算胭脂红的质量百分含量(X2)按式(2)计算：AX2 Xs (2)As式中：A试验溶液的吸光度；As标样溶液的吸光度；Xs胭脂红标准样品的质量百分含量(三氯化钛法)。3.2.6 允许偏差：二次平行测定结果之差不大于2,取其算术平均值作为测定结果。4. 加热减量的测定4.1 测定法：称取约2g试样,精确至0.01g,置于已恒重的3040mm的称量瓶中,在1352恒温烘箱中烘至恒重。4.2 计算加热减量的质量百分含量(X3)按式(3)计算： m1-m2X3 100 (3) m1式中：m1试料干燥前的质量,g； m2试料干燥至恒重后的质量,g。4.3 允许偏差：二次平行测定结果之差不大于0.2,取其算术平均值作为测定结果。5.水不溶物含量的测定5.1测定法：称取约3g试样,精确至0.001g,置于500mL烧杯中,加入5060水250mL使之溶解,用已在1352烘至恒重的4号砂芯坩埚过滤,并用热水充分洗涤到洗涤液无色,在1352恒温烘箱中烘至恒重。5.2 计算水不溶物的质量百分含量(X4)按式(4)计算： m4X4100 (4) m3式中：m4干燥后水不溶物的质量,g； m3试料的质量,g。5.3 允许偏差：二次平行测定结果之差不大于0.05,取其算术平均值作为测定结果。6 异丙醚萃取物含量的测定6.1 试剂及试液：异丙醚；盐酸298,37溶液；氢氧化钠：5g/L、20g/L、100g/L溶液；硫酸亚铁0.1mol/L标准溶液；硫氰酸铵0.1mol/L标准溶液；新配制三氯化钛标准溶液0.1mol/L溶液6.2 测定法：称取约2g试样,精确到0.01g,用水100mL溶解后,试验溶液移入500mL分液漏斗中,加异丙醚40mL,摇动1min,静置分层,分出杂料水层,置于另一分液漏斗中,留存的异丙醚,每次用水25mL洗涤,共洗两次,弃去洗涤液,将异丙醚液通过脱脂棉直接滤入已知质量的150mL磨口锥形瓶中,第一次分出的染料溶液,加入100g/L氢氧化钠溶液2mL,用异丙醚40mL同上法进行第二次萃取,异丙醚液用5g/L氢氧化钠溶液25mL洗涤一次,每次用水250mL再洗涤两次,弃去洗涤液,将异丙醚液通过脱脂棉滤入同一锥形瓶中,第二次分出的染料水溶液,加入5mL盐酸溶液(37),再用异丙醚40mL进行第三次萃取,异丙醚液用25mL盐酸(298)洗涤一次,每次用水25mL再洗涤两次,合并三次异丙醚液,在8085水浴中蒸去异丙醚,然后将锥形瓶置于温度为8085的烘箱中,烘至恒重。同时以100mL水代替试验溶液,以相同方法做一空白试验。6.3 计算异丙醚萃取物的质量百分含量(X5)按式(5)计算： m6-m7X5=100 (5) m5式中：m6萃取物的质量,g； m7空白试验时萃取物的质量,g； m5试料的质量,g。6.4 允许偏差：二次平行测定结果之差不大于0.05,其算术平均