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第3章 基因的本质第1节 DNA是主要的遗传物质一、 对遗传物质的早期推测1.染色体主要是由蛋白质和DNA组成的。2.证明遗传物质的实验关键:区别蛋白质和DNA,并单独观察它们各自的作用。二、 肺炎双球菌的转化实验(一)肺炎双球菌的种类(二)格里菲思的体内转化实验 问题加热杀死的S型细菌蛋白质和DNA的热稳定性有何不同?DNA的热稳定性较高:蛋白质热变性不可恢复,DNA热变性后可复性。 问题S型细菌的所有DNA都能转移进入R型细菌细胞内进行复制并表达吗? 只有可转移DNA才能够侵入R型细菌细胞内进行复制并表达。 问题对于多细胞生物(例如人类)会不会受到T-DNA的侵染? 不会,人类摄食有机物后需消化成小分子物质后才能被吸收。 可转移DNA一般只能够侵入单细胞生物,而单细胞生物细胞内也有限制性核酸内切酶可以特异性切割外源DNA,从而保护自身的遗传稳定性。 问题转化与基因工程的关联? 基因工程的第2步“将目的基因导入受体细胞”, 将目的基因导入植物细胞的方法之一是农杆菌转化法。 农杆菌中的Ti质粒中的T-DNA可转化进入双子叶植物和裸子植物细胞中,并插入到植物细胞染色体的DNA上复制并表达。(三)艾弗里的体外转化实验 问题将“死S+活R”混合注射后小鼠体内两种细菌含量变化情况及其原因? R菌含量变化:先减少后增多,最后趋于稳定。 “先减少”原因:从免疫学角度解释:R型细菌被小鼠的免疫系统所消灭。 从转化角度解释:部分R型细菌被转化成S型细菌。 “后增多”原因:S型细菌增殖后导致小鼠患病,同时免疫力降低。 S菌含量变化:由无到有,呈现S型增长。(原因略) 问题R菌和S菌能否相互转化? 不能。只有S菌才含有可转移DNA导致R菌的转化。 问题“DNA+DNA酶”一组实验的目的与原理 实验目的:因为DNA中混杂了万分之二的蛋白质,做“DNA+DNA酶”一组实验可以从反面证明DNA是遗传物质。 实验原理:酶的专一性。 DNA酶=DNA水解酶=将DNA(小注:比较DNA水解酶、限制性核酸内切酶、DNA解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶)三、 噬菌体侵染细菌的实验(一)噬菌体的简介 细菌病毒,专性寄生于细菌细胞内,是一种DNA病毒。(二)病毒的增殖 1吸附、2注入、3合成、4组装、5释放(三)实验设计思路实验一:用放射性同位素32P标记亲代噬菌体DNA, 检测子代噬菌体的放射性情况。实验二:用放射性同位素35S标记亲代噬菌体蛋白质,检测子代噬菌体的放射性情况。结果预测:实验一中子代噬菌体有放射性,而实验二中子代噬菌体无放射性,实验结论:噬菌体的遗传物质是DNA,而不是蛋白质。(四)实验过程第一步:标记用放射性同位素32P与35S分别标记亲代噬菌体 分别用含有放射性同位素32P与35S的培养基培养大肠杆菌。分别用被放射性同位素32P与35S标记的大肠杆菌培养噬菌体。一段时间后,即可获得被放射性同位素32P标记DNA的噬菌体与被放射性同位素35S标记蛋白质的噬菌体。第二步:培养用被标记的亲代噬菌体侵染未标记的大肠杆菌 用未标记的大肠杆菌培养被放射性同位素32P标记DNA的噬菌体。用未标记的大肠杆菌培养被放射性同位素35S标记蛋白质的噬菌体。 第三步:分离搅拌后离心 搅拌:使吸附在细菌上的亲代噬菌体与细菌分离。离心:让上清液中析出噬菌体,沉淀物中留下被感染的大肠杆菌。 第四步:检测对比上清液与沉淀物的放射性强度(五)实验结果与分析 亲代是“被放射性同位素32P标记DNA的噬菌体”时, 实验结果是上清液放射性很低,沉淀物放射性很高;子代噬菌体有放射性。 结果分析:上清液出现放射性的原因是个别大肠杆菌裂解,部分含有放射性的子代噬菌体进入上清液。亲代是“被放射性同位素35S标记蛋白质的噬菌体”时, 实验结果是上清液放射性很高,沉淀物放射性很低;子代噬菌体无放射性。结果分析:沉淀物出现放射性的原因是搅拌不彻底,部分含有放射性的亲代噬菌体的蛋白质外壳没有与大肠杆菌分离。四、 DNA是主要的遗传物质(一)细胞生物(真核生物+原核生物)的遗传物质是DNA。 细胞核遗传染色体DNA 1.基因分离定律 遵循 2.基因自由组合定律 3.基因连锁互换定律 细胞质遗传线
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