探讨β-2肾上腺素能受体基因多态性与散发及家族群发支气管哮喘的相关性.doc

探讨-2肾上腺素能受体基因多态性与散发及家族群发支气管哮喘的相关性 摘要 目的：探讨研究-2肾上腺素能受体基因多态性与散发性及家族群发性支气管哮喘的相关性。方法：回顾性分析散发性支气管哮喘和家族群发性支气管哮喘患者各84例的-2肾上腺素受体基因多态性，并将其与健康组84例体检者进行比较，对其进行总结分析，探讨其基因多态性对发病的影响。结果：三组患者-2肾上腺素受体基因16位基因型为Arg/ Arg的比例相近，而对于基因型Gly/Arg频率，仅家族群发性哮喘组患者中出现的频率明显低于健康组（P0.05），散发性哮喘组与健康对照组频率相当。在基因型Gly/Gly频率比较中，二组哮喘组患者的基因频率均明显高于健康对照组（P0.05），且家族群发性哮喘组患者的发生率偏高程度更为明显。对该基因16位等位基因频率统计，可知，两组哮喘患者的Gly频率明显升高较健康对照组（P0.05）。-2肾上腺素受体基因27位三种Gln/ Gln、Gln/ Glu和Glu/ Glu在三组中出现的频率相当，无统计学差异。对该基因27位等位基因频率统计，可知，三组患者的Glu、Gln频率均相当，无统计学差异（P0.05）。结论：哮喘患者的-2肾上腺素受体基因多态性具有一定的普遍性，且16位Gly基因频率的明显升高，可能是哮喘发生，尤其是家族群发性哮喘发生的重要影响因子，但27位基因多态性的影响还不明确。【关键词】-2肾上腺素能受体； 基因多态性；支气管哮喘The discussion of the -2 adrenergic receptor gene polymorphism correlation between the sporadic and familial bronchial asthmaLi Zhengxing Jiang GuoqiangDepartment of Respiratory,The Zhongjiang Peoples Hospital, Sichuan Province,618100, China Abstract Objective: To explore the correlation of the -2 adrenergic receptor gene polymorphism among the patients who was sporadic and familial bronchial asthma. Methods: The retrospective analysis was executed, in which the sporadic and familial bronchial asthma bronchial asthma were analyzed. The two group both had the 84 cases. At the same time, the 84 cases healthy volunteers were selected as the contrast. The -2 adrenergic receptor gene polymorphism from all the patients and volunteers were compared to explore its impact on the incidence of genetic polymorphisms. Results: The Arg/Arg genotype of the -2 adrenergic receptor gene at the 16 locus occupied the similar proportion, while Gly/Arg ration from the familial asthma patients was significantly lower than the frequency of healthy group (P0.05) and sporadic asthma group was agreed with the healthy control group. In genotype Gly / Gly frequency comparison, the two groups of patients with asthma were significantly higher than the healthy control group (P 0.05), and familial asthma patients showed the more obvious incidence. For the 16 allele frequency statistics, we can see that the two groups of patients with asthma Gly significantly higher frequency than the healthy control group (P 0.05). The Gln/Gln, Gln/Glu and Glu/Glu frequency were maintaind basically the cnsistency. And the allele frequency at the 27, are similar with the healthy group(P 0.05). Conclusion: For the bronchial asthma, the -2 adrenergic receptor gene polymorphism has a certain universality, and the allele Gly at the 16 sites was significantly higher, which indicates the bronchial asthma, especially familial asthma, maybe the important influencing factors. The function of the 27 allelic polymorphism is unclear and the further research is necessary. Key words: -2 adrenergic receptor; Gene polymorphism; Bronchial asthma支气管哮喘是一种具有常见性、多发性以及复杂性的特点的慢性疾病1,2。目前全球的患病人数高达3亿，而我国的患病人数占据其中的1/10，尤其是在青少年人群中的发病率逐年上升，严重威胁患者的健康。现今对于支气管哮喘的发病机制还未有明确论断，但大部分研究者认为包括肥大细胞、免疫细胞以及气管上皮细胞在内的多种细胞以及细胞相关物质所参与的气道慢性炎症导致患者的气道变窄，严重者甚至会造成患者肺部发生不同程度受损3,4。支气管哮喘诱发的高危因素主要涉及环境以及个人特质两方面因素。所谓的环境是指空气质量、花粉等因素，而个人体质则是指患者本身体质具有过敏性或是家族病史中具有明显的过敏倾向性和哮喘发病史。故家族性遗传性已成为支气管哮喘的重要特点。在对其基因机制的研究中，发现2-肾上腺素能受体基因多态性是支气管哮喘家族遗传中重要的相关因素。2-肾上腺素能受体属于G蛋白偶联受体蛋白家族，是细胞信号转导的重要功能蛋白之一，广泛分布于支气管上皮细胞。该受体基因由413个氨基酸构成，常见有四种基因变异类型，分布为16位和27位氨基酸突变所引起，猜测其与支气管哮喘的家族倾向性相关。本文回顾性分析散发性支气管哮喘和家族群发性支气管哮喘患者各84例的-2肾上腺素受体基因多态性，对其进行总结分析，探讨其基因多态性对发病的影响。现将结果报告如下：1 资料和方法1.1 一般资料 散发性支气管哮喘组84例患者，男62例，女22例。患者年龄为2769岁，平均年龄为（44.916.93）岁。患者病程为2个月13年；家族群发性支气管哮喘组患者84例，男50例，女34例。患者年龄为2867岁，平均年龄为（41.847.29）岁；健康体检组患者84例，男54例，女30例。患者年龄为2468岁，平均年龄为（45.938.17）岁。所有支气管哮喘患者均经过临床指标确诊，符合相关标准，且无其他相关疾病存在。而健康对照组患者也无相关疾病存在。三组患者在性别、年龄等方面不具有显著性差异（P0.05），具有可比性。1.2 研究方法 对所有检测人员的2-肾上腺素能受体基因进行等位基因PCR扩增。首先采用酚氯仿的经典方法提取来源于检测人员的外周血的DNA。检测中进行相关的2-肾上腺素能受体基因16位突变体和27位突变体的引物合成，构建PCR扩增体系，按照程序完成2-肾上腺素能受体基因扩增。扩增后对所得到的基因片段进行电泳检测（等位基因频率=基因个数/个体数）。2. 结果2.1 比较2-肾上腺素能受体16位基因等位基因频率 在2-肾上腺素能受体16位的基因型频率和等位基因频率的比较中，可知。健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Arg/ Arg基因型频率相比较，（2=0.0441, P0.05），（2=0.7777, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.4533, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Gly/Arg基因型频率相比较，（2=16.1318, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=6.2193, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Gly/Gly基因型频率相比较，（2=18.7639, P0.05），（2=5.7166, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=3.0362, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Arg等位基因型频率相比较，（2=9.7319, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=1.3166, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Gly等位基因型频率相比较，（2=9.7319, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=1.3166, P0.05）；且家族性与散发性哮喘患者 27位等位基因频率Gln / Glu比较，（2=45.7619, P0.05），（2=21.0000, P0.05），具有显著性差异（具体数据见表1）表1比较2-肾上腺素能受体16位基因等位基因频率组别基因型频率等位基因频率Arg/ ArgGly/ArgGly/GlyArgGly健康对照组16.67%(14/84)63.10%(53/84)20.14%(17/84)48.21%(81/168)51.79%(87/168)家族群发性支气管哮喘组15.48%(13/84)32.14%(27/84)*52.38%（44/84）*31.55%(53/168)*68.45%(115/168)*b散发性支气管哮喘组11.90%(10/84)51.19%(43/84)a36.90%(31/84)*a37.50%(63/168)*62.50%(105/168)*b注：*表示哮喘组患者与健康对照组比较具有显著性差异（P0.05），a表示两哮喘组患者具有显著性差异（P0.05），（2=2.5926, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.3999, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Gln/ Glu基因型频率相比较，（2=0.2157, P0.05），（2=0.8590, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.2143, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Glu/ Glu基因型频率相比较，（2=0.2270, P0.05），（2=0.5340, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.0654, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Gln等位基因型频率相比较，（2=1.0080, P0.05），（2=2.4735, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.3252, P0.05）；健康对照组分别与家族群发性支气管哮喘组患者以及家族散发性支气管哮喘组患者的Glu等位基因型频率相比较，（2=1.0080, P0.05），（2=2.4735, P0.05），而散发性与家族群发性哮喘患者中该基因型频率比较，（2=0.3252, P0.05）；且对照组、家族性与散发性哮喘患者 27位等位基因频率Gln/Glu比较，（2=23.0476, P0.05）、（2=45.7619, P0.05），（2=34.7142, P0.05），具有显著性差异（具体数据见表2）表2比较2-肾上腺素能受体27位基因等位基因频率组别基因型频率等位基因频率Gln/ GlnGln / GluGlu / GluGlnGlu健康对照组29.76%(25/84)55.95%(47/84)13.10%(11/84)57.74%(97/168)42.26%(71/168)b家族群发性支气管哮喘组36.90%(31/84)52.38%(44/84)10.71%（44/84）63.10%(106/168)36.90%(62/168)b散发性支气管哮喘组41.76%(35/84)48.18%(41/84)9.52%(8/84)66.07%(111/168)33.98%(57/168)b注：b则表示Gly/Arg组内等位基因频率比较具有显著性差异。3 讨论2-肾上腺素能受体是目前发现的与哮喘有关的受体，其分布和功能均与气道相关，能够对呼吸相关机能进行有效的调节5。在哮喘的治疗过程中，2-肾上腺素能受体激活剂已成为一种重要药物，但其治疗效果因患者而异，研究表明16位等位基因的Arg存在频率与哮喘病的发生紧密相关6,7。本文研究中，发现2-肾上腺素能受体16位三种基因型的分布呈现明显的差异，尤其是家族群发性哮喘患者的Gly/Gly比例明显上升与健康对照组比较，且在所有哮喘患者中等位基因Gly的比率显著升高。这与之前的多项研究结果相符8。本文结果还可知，散发性和家族群发性哮喘患者的Gly比例相近，但基因型比例具有较大差异，预示着家族群发性哮喘的发生与患者的基因型具有一定的关系。但对于该基因27位点处而言，基因型与等位基因比例在两组哮喘组以及健康对照组中均无较大差异。总而言之，通过对家族群发性以及散发性哮喘患者与健康对照组患者的2-肾上腺素能受体多态性的研究中，可知，16位Gly存在对于患者哮喘的发生和治疗具有重要影响，但25位基因的影响效果目前还未明确可知。参考文献1 马红秋, 辛德莉. 支气管哮喘诊治方案的变迁J. 实用儿科临床杂志, 2012, 27(16): 1294-1296. 2 王得翔, 季