黄鳝人工繁殖.docx

黄鳝的人工繁殖实验设计方案一、 实验时间有实验结果表明，雌黄鳝的卵粒直径、卵巢重量和成熟系数为6-7月达到最大值(图1)，这是黄鳝卵巢发育的最佳时期；而精巢系数的变化不大，在016044之间(图2)，同样为67月达到最大值。因此黄鳝的人工繁殖时间选在6、7两个月份进行。二、 实验计划1、 前期准备鳝种选择：（体长、体重、种属）雌性： 体长35cm 以下（最好26-30cm）， 腹部臌胀、 透明， 有明显的卵巢轮廓， 体质健壮， 无明显伤病。体重在90150g之间。雄性： 体长40cm 以上， 腹部不透明， 体质健壮， 活动能力强， 无明显伤病。体重在160280g之间。从绝对繁殖力、相对繁殖力以及成熟系数来看，黄斑鳝的繁殖力最强，青黄斑鳝次之，青斑鳝最弱。所以亲鳝采用黄斑鳝。亲本雌鳝应选择2630cm体长段的黄鳝，才能在整体上获得较高的怀卵量和仔鳝数。外观上雌鳝头较小、 不隆起， 体背青褐色、 无斑点， 性温和游态稳重， 而且，成熟的雌亲鳝下腹部应膨大柔软，卵巢轮廓明显，腹部呈桔红色，稍透明，透过腹壁可见卵粒排列整齐，用手抚摩腹部则感觉柔软而有弹性，生殖孔微红肿。外观上雄鳝头较大、 隆起明显， 体背有色斑， 活动能力强， 腹部不膨大、 有网状血丝纹， 生殖孔红肿较突出。雄亲鳝选择个体大些的，这些精巢内精子活动激烈。实验器材：（培养器材、观察器材、分析器材、预防器材） 解剖刀，小剪刀，5ml注射器和5号或6号针头，水葫芦 若干，烧杯，量筒，玻璃棒，电子天平，研钵，胶头滴管，毛巾或着纱布，羽毛，温度计，pH试纸，恒温培养箱、显微镜。实验药品：鱼用任氏液配方：NaCI 0.78克CaCl2 0.021 克NaHCo3 0.0021克蒸馏水 100毫升KCI 0.02克。 催熟素: 促黄体生成激素（LRH-A5）催产素: 促黄体生成激素（LRH-A5）、促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A）、绒毛膜促性腺激素（HCG），鲤、鲫脑垂体（PG），马来地欧酮(DOM) 助产剂2#（HWHO-2)。催产药物的配制:LRH - A 和 HCG 按产品包装标明的剂量换算，用生理盐水稀释溶解，达所需浓度。 PG 按所需剂量称出，放入干燥洁净的研钵中，干研成粉末。再加人几滴生理盐水研成糊状，充分研碎后加入相应的生理盐水，配成所需浓度的悬浮液。消毒杀菌：对亲鳝、培养器皿、实验用具进行杀菌消毒，创造一个良好的环境，一提高实验的成功率。.2、 亲鳝处理催熟：（药品、用法、时间、判断）催熟注射最佳时间在5月25日上午9时左右，水温26 0C。注射催熟针，旨在提高黄鳝的性成熟度，每尾注射LRH-A5 12.5ug、药液量0.5mI ， 注射部位与方法:将黄鳝用千毛巾或纱布包好，防止其滑动，然后在腹腔注射，注射深度不超过0.5cm ， 注射后的黄鳝放回培养箱继续暂养。催产：( 1 ）催产药物的种类及其剂量黄鳝的催产药物可采用促黄体生成素释放激素类似物（LRH-A），绒毛膜促性腺激素（HCG），鲤、鲫脑垂体（PG）。注射剂量须根据水温、亲鱼的成熟度和亲鱼大小等情况灵活掌握。但诱导排卵效果以LRH-A5+DOM和LRH-A5+HWHO-2组合为最佳，HCG为最差。( 2 ）催产时间根据卵细胞的形态、大小和卵黄的分布，黄鳝的卵细胞可以分为五期:第I期为染色质核仁期;第II期为周边核仁期;第III期为初级卵黄期;第4期为次级和三级卵黄期;第5期为成熟期。其中第4期又可分为早、中、晚三期，在晚期的催产可达理想的效果。催产注射最佳时间在5月31日上午9时，水温25 0C。注射催产针，进行催产实验。黄鳝注射催产剂后48小时还没有开始达到效应时间，催产后72小时即己经逐步达到效应时间，而大部分在90小时开始排卵。( 3 ）催产方法将选好的亲鳝用干毛巾或纱布包好，防止其滑动，然后在胸腔进行注射。针头先刺进胸部皮肤及肌肉，在肌肉内平行前移约 0 . 5 厘米，然后插入胸腔注射，注射垂直深度不超过 0 . 5 厘米，注射药液量不超过 1 毫升。注射后的亲鳝放在培养箱中暂养，水深控制在 20 一 30 厘米，每天换水一次，大约换 1 /2水量。 由于亲鳝的大小和成熟度不一致，同批注射的亲鳝，其效应时间长短差别很大，因此要持续不断检查，在水温 25 左右时，注射 40 小时后每隔 3 小时检查一次。要检查到注射后 80 小时左右。检查的方法是：捉住亲鳝，用手触摸其腹部，并由前向后移动，如感到鳝卵已经游离，则表明开始排卵，应立即进行人工授精。 ( 4 ）最佳催产剂量探索因催产剂量为80ug/g体重的DOM或0.08ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM催产效果相对最好。所以设计实验(1)将黄鳝平均分成四组，第一组对照，催熟后，第二组注入70ug/g体重的DOM，第三组注入80ug/g体重的DOM，第四组注入90ug/g体重的DOM。(2)将黄鳝平均分成五组，第一组对照，催熟后，第二组注入0.08ug/g体重+40ug/g体重的LRH-AS+DOM，第三组注入0.08ug/g体重 +50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第四组注入0.08ug/g体重+60ug/g体重的LRH-AS+DOM，第五组注入0.08ug/g体重+70ug/g体重的LRH-AS+DOM。(3)将黄鳝平均分成四组，第一组对照，催熟后，第二组注入0.07ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第三组注入0.08ug/g体重 +50ug/g体重的LRH-AS+DOM，第四组注入0.09ug/g体重+50ug/g体重的LRH-AS+DOM。各组分别在48.72,90h的排卵量。 3、 人工受精先选择雄鳝，生殖孔红肿，用手挤压腹部，能挤出少量透明液体；有条件的为慎重起见，取少量液体放在 400 倍以上的显微镜下观察，如见有活动精子，即为成熟雄鳝，放在箱中待用。将开始排卵的雌鳝取出，一手垫干毛巾握住前部，另一手由前向后挤压腹部，部分亲鳝即可顺利挤出卵，但也有部分亲鳝会出现泄殖腔堵塞现象，此时可用小剪刀在泄殖腔处向内前开 0 . 5 一 1 厘米，然后再将卵挤出，连续 3 一 5 次，挤空为止。将卵挤入瓷盆后（内面一定要光滑），立即把雄鳝杀死，取出精巢（精巢一般呈黑灰色），迅速剪碎，放入盛有卵的盆中（人工授精时的雌雄配比视产卵量的多少而定，一般为 3 一 5 : 1 ) , 然后用羽毛轻轻搅拌，边搅拌边加入生理盐水，以能盖住卵为度，充分搅匀后，放置 5 分钟，再加清水洗去及吸出精巢碎片、血污、破卵、浑浊状的卵，即完成人工授精。4、 人工孵化孵化器可根据产卵数量的多少因地制宜地选用。数量少的可选用玻璃缸、脸盆、水族箱，数量多的则可在网箱中孵化。只要管理得当，均能孵出鳝苗。在孵化过程中应注意以下三个方面：. 孵化方法有静水孵化法、滴水孵化法、泡沫孵化法 ，其孵化效率依次升高。滴水孵化法： (基底铺沙)提前一天在洗净的培养皿底部均匀铺上一层细沙，将受精卵移至铺有细沙的培养皿中，进行流水孵化方式，水深为0.20.4cm.覆盖湿纱布（白布最佳）、光线暗些。将一可控制流速的胶管一端伸入装有经阳光照射的自来水的器皿中，另一端伸入培养皿中。第1天水滴流速度为10滴/min，第23天调至1020滴/min，第4天后调至30滴/min，并根据情况适当增加滴度，直至孵出幼苗。三、 过程管理1、 饲养环境放养水深光强光质放养密度雌雄比例温度控制PH控制2cm1500 lx2尾/平米雌雄1:124-286.0-8.02、 光照时间长光照周期(18L：6D)明显促进了黄鳝性腺的发育。同时，长光照周期对黄鳝生长产生明显抑制作用。因此，在黄鳝自然繁殖季节之前。进行长光照周期的刺激可能促使了黄鳝性腺发育或性成熟的近年节律提前启动。3、 饲料管理雌鳝饲料中添加维生素E，能有效地改善雌鳝的繁殖性能，其最适添加量为200mkg。亲黄鳝在繁殖季节，要投喂蛋白质较高的饲料，如鱼浆、蚯蚓等，同时搭配亲黄鳝全价配合饲料。性成熟的亲黄鳝经过高蛋白饲料投喂后，一般5天7天就会产卵，只要有白色泡沫就是亲黄鳝的产卵巢。4、 孵化管理每天早、中、晚各检查一次光照、pH 值（5.5最佳）、水温（25-31），若发现有死黄鳝卵及时吸出，并记录死卵数量，同时避免受精卵堆积。孵化特点 卵粒从排出受精到孵出仔鳝的时间差异较大，在一般天然条件下，水温为2531时，5-7d可孵出。水温为1825时，8-lld可孵出;超过lld仍未孵出者，将不可能再孵出仔鳝。孵化时间的长短，除了与水温有关外，还与溶氧量有关。水体溶氧充足(DO值大于2mg/L),孵化时间，仔鳝发育正常。黄鳝胚胎发育的最适温度是2528度。 孵化时要求水温稳定，自然界中黄鳝的受精率和孵化率可达到95%. 黄鳝胚胎发育过程中，具有不同于其他鱼类的特点:胚胎发育时间长，一般需要5-lld;出膜时间不一，先后相差约48h;出膜仔鳝个体大(体长12- 13mm)，对环境耐受力强;胸鳍在胚胎期形成后，不断地扇动，出膜后逐渐退化。5、 后期管理仔鱼的发育 黄鳝仔鱼孵出后，仍然靠卵黄囊维持生命。待全长达 28 毫米左右，颌长 1 .2 毫米左右时卵黄囊完全消失，胸鳍及背部、尾部的鳍膜也消失，色素细胞布满头部，使鱼体呈黑褐色，仔鱼能在水中快速游动，并开始摄食小型浮游动物和丝蚯蚓，这时开始给幼鳝投喂食物（约10天）。四、 数据统计人工繁殖的 “三