虎杖及其有效成分对胃肠动力作用的探究.doc

虎杖及其有效成分对胃肠动力作用的探究虎杖及其有效成分对胃肠动力作用的探究李渊 李昊坤 宋一骁 刘强 丁兵兵丁虹* 通讯作者：丁虹，女，1964，博士，教授，博导。主要研究方向：药理毒理学。Email:（武汉大学药学院 武汉 430072）摘要：目的：筛选探究虎杖及其有效成分中的肠动力成分；方法：通过虎杖及其有效成分: 大黄素、白藜芦醇的高低剂量对胃、肠平滑肌频率及振幅的影响，并采用小鼠碳末推进试验，分别观察虎杖及其有效成分的高低剂量对整体动物胃肠促进作用；结果：研究虎杖及其有效成分的高低剂量的作用，发现虎杖提取物、大黄素对胃肠平滑肌有明显促进作用，对胃纵行肌的频率及振幅均有抑制作用，大黄素低剂量组可显著促进胃肠排空；结论：筛选探究虎杖及其有效成分中的促胃肠动力成分是低剂量大黄素。关键词：胃平滑肌、肠平滑肌、胃肠动力、虎杖、大黄素、白藜芦醇Research into Components which Promote Motivity of Intestine in the Polygonum and effective ingredientLi yuan Li haokun Song yixiao Liu qiang Ding bingbing Ding Hong*(the Pharmacy of Wuhan University,Wuhan,430072)Abstract：Objective: Research into Components which Promote Motivity of Intestine in the Polygonum and effective ingredient;Method: through polygoni cuspidati and the effective components: emodin, resveratrol to stomach, how high and low doses of intestinal smooth muscle frequency and amplitude influence, and at the end of xylene-induced carbon respectively, propulsion laboratory polygoni cuspidati and observe how high and low doses of effective ingredients for the whole animal gastrointestinal stimulative effect; Results: the polygoni cuspidati and how high and low doses of effective ingredients, found the role of emodin polygoni cuspidati extracts, of gastrointestinal smooth muscle function, to have significantly promote stomach longitudinal muscles frequency and amplitude are inhibition, emodin low doses groups can significantly promote gastric emptying; Conclusion: screening polygoni cuspidati and explore the effective ingredients promote gastrointestinal composition is low doses emodin.Key Word:Gastric smooth muscle,Intestinal smooth muscle, Polygonum cuspidatum emodin resveratrol近年来，功能性胃肠病已受到广泛的关注，这些功能性的胃肠病的症状大部分和胃肠动力障碍有关，每年花费高额的医疗费用，患者的生存质量亦受到不同程度的影响，异常胃肠蠕动目前主要采用解痉剂治疗，但只能缓解腹痛，不能治疗便秘，而缓泻剂能缓解便秘，但不能缓解腹痛腹胀，因此，研究开发新的调节胃肠动力的药物有重要的社会效益和广阔的市场前景。 实验证实力胃颗粒中的有效部分是虎杖，虎杖的两种有效成分为大黄素和白藜芦醇，有可能是是两者成分的一种对胃肠有促动力作用，或两者联合作用。分别取胃纵行肌、小肠于恒温浴槽中，观察虎杖水提取物、大黄素、白藜芦醇对胃、肠平滑肌的影响；采用小鼠碳末推进试验，分别观察上述提取物对整体动物胃肠促进作用。整体动物实验表明虎杖、大黄素低剂量能促进碳末推进速度，提示胃肠蠕动频率在食物推进速度上起主要作用。因此，虎杖的有效成分提取物中促肠动力药物为大黄素，大黄素低剂量的促进作用比较明显。1 材料与方法胃肠平滑肌频率及振幅试验1.1 材料1.1.1仪器与设备 恒温平滑肌槽，通气泵，生物信号采集处理系统，张力换能器；1.1.2原料与试剂 大鼠（220-280g/只,武汉大学实验中心），95%乙醇，0.5%胃复安，5%虎杖总提取物，15%虎杖总提取物，2%大黄素，10%大黄素，2%白藜芦醇，10%白藜芦醇；1.2方法 1.2.1制备胃肌条标本，处死大鼠，立即剖取胃底部浸泡于台氏液中，制备成胃肌条标本。1.2.2在浴槽中加入台氏液30ml，加热，维持水温在37-38摄氏度，调节通气泵，缓缓通入气泡，调节1-2个气泡/秒；1.2.3取标本，两端对角处用丝线结扎，一端挂在通气钩上，另一端从张力换能器的弹簧片小孔中穿出并挂上橡皮泥，打开计算机，进入生物信号采集系统，选择张力通道，观察活动曲线，待其平衡后，用丝线将挂橡皮泥的丝线牢牢固定于弹簧片上，除去橡皮泥；1.2.4待标本在浴槽内稳定10min左右，注药前1min记录一段正常活动曲线，然后用注射器依次向浴槽中滴加药液0.2ml,每加一组药立即标记，并观察，记录1min 、2min频率及收缩振幅，每次药物作用后，用温暖的台氏液冲洗几次，待张力恢复基线后再试验其他药物；1.2.5停止记录3曲线，保存数据，断电断气，取出回肠，冲洗浴槽；1.2.6打开腹腔，找到回盲部，在离其2-3cm的回肠处剪断，取出回肠，置于盛有台氏液的培养皿中，沿肠壁分离并剪去肠系膜，将肠管剪成数断，加样顺序与操作同上；小鼠碳末推进试验2.1材料2.1.1仪器与设备：直尺，镊子，手术剪，注射器；2.1.2原料与试剂：小鼠（16-24g/只，武汉大学实验中心），95%乙醇，酚酞，5%虎杖总提取物，15%虎杖总提取物，2%大黄素，10%大黄素，2%白藜芦醇，10%白藜芦醇；2.2.1 随即分组，每组八只小鼠，标号，称重。2.2.2 按标记，对应所给列表，根据体重给药，给药量均为01.ml/10g；2.2.3 15min后，给每个小鼠灌注相应的量的碳末悬液;2.2.4 15min后，处死小鼠，解剖小鼠，取其小肠（幽门到结肠端），用直尺量取小肠总长度与幽门端到碳末推进端的长度；2.2.5 计算碳末推进率；2.结果2.1虎杖及其有效成分对胃肠平滑肌频率及振幅的影响结果可见，虎杖提取物、大黄素对肠平滑肌的频率及振幅均有增加的趋势，其中对频率的影响大于振幅的影响。白藜芦醇对肠平滑肌频率有增加趋势，对振幅无明显影响；吗丁啉仅对胃纵行肌的振幅有促进作用，虎杖提取物及大黄素对胃纵行肌的频率及振幅均有抑制作用的趋势，对胃横行肌无明显影响。肠平滑肌Imin内变化2min内变化受试药FAFA95%乙醇-0.3754.98-0.821.71-1.55.37-0.71.410.5%胃复安-1.253.96-0.130.3802.270.0210.0480.5%虎低4.840.530.690.0893.890.151.260.75%虎高0.752.82-82.39-0.0840.222%大黄低0.883.44-0.060.161.882.42-0.0450.07710%大黄高-0.382.92-0.0510.220.623.850.240.672%白低1.53.380.110.280.252.660.070.2110%白高-0.634.960.060.18-14.960.0650.2胃纵平滑肌受试药1min内变化2min内变化95%乙醇31.410.010.01422.83-0.019.81E-180.5%吗丁啉-1.52.320.010.00913.480.0050.0080.5%虎低-050.049-2.50.710.250.0355%虎高-14.24-0.0250.0491.54.95-0.020.0282%大黄低-21.41-0.0150.035-2.53.54-0.020.02810%大黄高1.52.12-0.019.81E-1831.41-0.0150.0212%白低11.410.070.04214.240.020.02810%白高2.50.7070.0050.007-150.021胃横平滑受试药1min内变化2min内变化95%乙醇022.982.310.672.521.601.480.5%吗丁啉0.334.040.040.3202.650.220.310.5%虎低0.672.31-1.11.32-0.334.04-0.610.55%虎高15.570.421.01-0.673.79-0.90.52%大黄低0.332.41.592.0810%大黄高-100.391.06-2.332.890.740.82%白低-130.0531.25-0.334.160.360.910%白高-5.332.522.380.71-3.332.081.761.53图1. 对胃肠平滑肌频率、振幅的影响虎杖及其有效成分对胃肠动力的影响）。 碳末推进试验可见，与溶剂组相比，虎杖提取物有促胃肠排空的趋势，但无显著差异；大黄素低剂量组可显著促进胃肠排空，差异极显著（P0.01），大黄素高剂量组无促胃肠排空（作用；白藜芦醇无促胃肠排空作用。结果见表2.表2. 虎杖提取物及其有效成分对碳末推进速度的影响（SD）组别剂量mg/kgn体重碳末推进率%空白溶剂组-1018.351.9635.6916.76酚酞低剂量组50620.002.7530.9914.41酚酞高剂量组80617.721.0854.4611.36*虎杖低剂量组2501319.201.5548.2112.24虎杖高剂量组12501420.203.1850.3111.24*大黄素低剂量组401518.792.8760.1020.71*大黄素高剂量组2001319.612.2045.0016.94白藜芦醇低剂量组151318.931.9539.4019.68白藜芦醇高剂量组1501419.031.7946.8816.21与空白溶剂组相比*P0.05;*P0.01*与空白溶剂组相比*P0.05;*P0.013.结论大黄素对胃肠道的作用：研究表明，大黄素有类似ACH的作用,但作用较弱, 大黄素对豚鼠、大鼠和家兔离体回肠具有双向调节作用!这种作用对肠麻痹及痉挛可能有调节性治疗作用。 腹腔注射大黄素能抑制大鼠的胃