细菌革兰氏染色_第1页
细菌革兰氏染色_第2页
细菌革兰氏染色_第3页
细菌革兰氏染色_第4页
细菌革兰氏染色_第5页
已阅读5页，还剩13页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验三细菌的革兰氏染色 Gramstain 一 目的要求 了解革兰氏染色的原理 学习并掌握革兰氏染色的方法 二 基本原理 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状 它是1884年由丹麦医师Gram创立的 革兰氏染色法 Gramstain 不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类 染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌 用G 表示 染色反应呈红色 复染颜色 的称为革兰氏阴性细菌 用G 表示 细菌对于革兰氏染色的不同反应 是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的 肽聚糖 peptidoglycan 革兰阳性菌肽聚糖 聚糖骨架 四肽侧链 五肽交联桥 革兰阴性菌肽聚糖 聚糖骨架 四肽侧链 肽聚糖 peptidoglycan 革兰阳性菌细胞壁特殊组分 革兰阴性菌细胞壁特殊组分 革兰阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较 革兰氏染色需用四种不同的溶液 碱性染料 basicdye 初染液 媒染剂 mordant 脱色剂 decolorisingagent 和复染液 counterstain 碱性染料初染液 结晶紫 crystalviolet 媒染剂 碘 iodine 脱色剂 95 的酒精 ethanol 复染液 番红 三 实验器材 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 未知菌 草酸铵结晶紫 番水水溶液 碘液 95 乙醇 载玻片 显微镜等 四 实验步骤 1 涂片 将培养24小时的大肠杆菌和未知菌 培养12 18小时的枯草芽孢杆球菌 分别作涂片 注意涂片切不可过于浓厚 干燥 固定 固定时通过火焰1 2次即可 不可过热 以载玻片不烫手为宜 2 染色 1 初染 加草酸铵结晶紫一滴 约一分钟 水洗 2 媒染 滴加碘液冲去残水 并覆盖约一分钟 水洗 3 脱色 将载玻片上面的水甩净 并衬以白背景 用95 酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止 约20 30秒钟 立即用水冲净酒精 4 复染 用番红液染1 2分钟 水洗 5 干燥和镜检 干燥后 置油镜观察 革兰氏阴性菌呈红色 革兰氏阳性菌呈紫色 以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准 过于密集的细菌 常常呈假阳性 6 同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片 作革兰氏染色对比 革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度 如脱色过度 则阳性菌可被误染为阴性菌 而脱色不够时 阴性菌可被误染为阳性菌 此外 菌龄也影响染色结果 如阳性菌培养时间过长 或已死亡及部分菌自行溶解了 都常呈阴性反应 大肠杆菌革兰氏染色 1 结果列表比较大肠杆菌 枯草芽孢杆菌和未知菌的染色反应 并判断它们分别是G 或G 2 思考题 1 作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚 其染色
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 技术指导

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论