体液肿瘤标志物.ppt

卫生部“十一五”规划教材全国高等医药教材建设研究会规划教材,第十七章体液肿瘤标志物,教学目标,掌握：肿瘤标志物的概念；常见肿瘤标志物的英文缩写、临床意义及其应用评价熟悉：肿瘤标志物的分类；肿瘤标志物的临床应用了解：肿瘤标志物的发展史；肿瘤标志物临床应用中注意的问题,关于肿瘤,主要内容,主要内容,第一节概述,第一节概述,一、什么是肿瘤,癌细胞,（一）肿瘤的定义,（二）肿瘤的分类,癌症的定义,1.临床诊断病史、体征、临床表现影像学：X线、B超、CT、MRI、PET等实验室：肿瘤标志物2.病理学诊断：组织病理学、细胞病理学、分子病理学,二、肿瘤的诊断,肿瘤辅助检查示意图,Tumor明确诊断,肿瘤诊断流程,肿瘤诊断目的,肿瘤诊断目的,为了提高对肿瘤的早期检测、鉴别诊断、疗效观察以及预后判断。人们从肿瘤细胞的化学特性、细胞病理、免疫反应和基因表达产物等诸多方面寻找各种特异性强、灵敏度高的肿瘤标志物，并取得了较快的进展。,三、肿瘤标志物的发展史,本周氏蛋白,激素、酶、同功酶、蛋白,胚胎蛋白,高灵敏高特异标志物,第一阶段18641928,第二阶段19291962,第三阶段19631975,第四阶段1976至今,近年来，随着分子遗传学的理论和技术的发展，分子探针的使用，单克隆抗体的筛选成功，基因的定位，包括肿瘤基因和抑癌基因的测定，使肿瘤标志物的检测内容更广，技术更先进。,主要肿瘤标志物的发现阶段,四、什么是肿瘤标志物,广谱肿瘤标志物,理想的肿瘤标志物,通过对这类物质的分析，能帮助人们从正常组织中区别肿瘤或测定肿瘤细胞核、细胞质以及对细胞膜上的特性进行分析，以此作为辨认肿瘤细胞的标志。,一些常用肿瘤标志物及其主要应用范围,五、肿瘤标志物的分类,(一)临床化学法（examinationofclinicalchemistry）（酶类标志物）,全自动生化分析仪,六、肿瘤标志物的检测方法,(二)免疫检测法（examinationofimmunodiagnostic）1.放射免疫分析（RIA）2.酶免疫分析（EIA）3.时间分辨荧光免疫分析（TFIA）4.化学发光免疫分析（CLIA）5.免疫电化学发光分析（IECL),六、肿瘤标志物的检测方法,基本原理：抗原、抗体反应主要模式：双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法抗原或抗体上标记物不同，检测信号不同。,相同点,不同点,化学发光免疫分析（chemiluminescencesimmunoassay，CLIA）原理：,特点：使用甲基吖啶酯标记抗体，不必加催化剂，干扰少，操作简单，稳定性高，标记蛋白后不影响发光信号的产生；全自动化程度高，在临床上得到了普及推广。,七、临床应用范围,肿瘤由单一肿瘤细胞克隆、分化而来。直径1cm的肿瘤，大约含有109个肿瘤细胞，是原始肿瘤细胞倍增30次的结果。一个实体瘤从1个肿瘤细胞到109细胞约需818年。物理仪器的最低检测限是1cm（109个肿瘤细胞），生化标志最低检测限为108个细胞。,1.肿瘤的早期诊断,肿瘤生长、肿瘤大小和方法的关系示意图,筛查的定义,肿瘤标志物常用于鉴别良恶性肿瘤，此时临床己获得足够证据证明患者可能患某脏器肿瘤。肿瘤标志物的升高水平常和肿瘤的大小和恶性程度有关，肿瘤标志物的定量检测可以有助于临床分期，能判断疾病处于稳定期、进展期或恶化期。,2.肿瘤的鉴别诊断,治疗前肿瘤标志物浓度明显异常，表明肿瘤较大，患病较长，可能已有转移，预后较差。另有一些指标专用于观察预后，如乳腺癌的雌激素受体和孕激素受体，上皮生长因子受体（EGFR）、癌基因c-erbB-2编码蛋白(c-erbB-2),3.肿瘤的预后判断,大部分肿瘤标志物的检测值和肿瘤治疗效果相关。标志物下降程度反映了治疗成功程度。在成功的治疗，如肿瘤的完全切除和有效的放化疗后，肿瘤标志物应明显下降。如手术或放化疗后肿瘤标志物未能如预期的下降，说明治疗失败。,4.肿瘤的疗效监测,U/ml,CA153在治疗监测中的应用,关于直肠癌和乳腺癌肿瘤标志应用中建议：手术后的病人每隔23个月测定一次肿瘤标志，连续至少两年。在未再给予治疗时，至少连续二次（两个时间间期）肿瘤标志物呈直线上升，可认为肿瘤复发。正在治疗的病人，肿瘤标志物升高，意味疾病的恶化。恶化定义为肿瘤标志物测定值增加25，为了可靠，24周应再复查一次。,5.肿瘤的复发预报,CA15-3出现异常,CA15-3水平与乳腺癌疾病进程,第二节酶类肿瘤标志物,(一)酶类肿瘤标志物的特点,(二)常用的酶类肿瘤标志物,(二)常用的酶类肿瘤标志物,1.碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）,生化特性：ALP是一组底物特异性很低，在碱性环境中能水解很多磷酸单酯化合物的酶。测定方法：速率法参考值范围：成人男性：20-115U/L成年女性：20-105U/L主要临床意义：协助诊断肝癌、卵巢癌；骨肉瘤等。判断损伤程度；估计预后。,2.乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase，LD）,生化特性：LDH是一种糖酵解酶，广泛存在于人体组织中。特异性差、灵敏度较高。测定方法：速率法参考值范围：114-240U/L主要临床意义：协助肝癌、白血病等诊断；估计癌症是否转移。,3.神经元特异性烯醇化酶（neuronspecificenolase,NSE),生化特性：又称磷酸烯醇转化酶。是糖孝解中的关键酶。存在于神经组织和神经内分泌。测定方法：CLIA参考值范围：12.5/L主要临床意义：协助小细胞肺癌、神经母细胞瘤的诊断。,4.前列腺特异性抗原（prostatespecificantigen，PSA）,生化特性：存在于精液中的蛋白酶，正常人含量极微，是前列腺癌的主要标志物，有高度器官特异性。测定方法：CLIA参考值范围：4g/L临床意义：协助诊断前列腺癌及其治疗效果监测。FPSA/TPSA比值鉴别前列腺癌或前列腺增生前列腺癌患者的FPSA/TPSA比值明显偏低。良性的前列腺增生患者的FPSA/TPSA比值显著增高。,5.-L-岩藻糖苷酶（alphaL-fucosidase，AFU）,生化特性：AFU是原发性肝细胞性肝癌又一敏感、特异的新标志物。测定方法：速率法参考值范围：234414mol/L主要临床意义：血清AFU活性动态曲线对判断肝癌治疗效果、估计预后和预报复发有着极其重要的意义，甚至优于AFP。,第三节激素类肿瘤标志物,（一）激素升高的机制,(二)激素类肿瘤标志物的特点,1.人绒毛膜促性腺激素（humanmchorionicgonadotropin，hCG）,生化特性：妊娠期由胎盘滋养细胞分泌的糖蛋白。测定方法：化学发光法参考值范围：5.0U/L主要临床意义：正常妊娠；协助滋养体瘤、绒毛膜上皮细胞癌。,(三)常见激素类标志物,2.降钙素（calcitonin，CT）,生化特性：甲状腺C型细胞分泌的一种多肽激素。降钙素测定对某些肿瘤的诊断有一定意义。测定方法：免疫化学法参考值范围：100ng/L主要临床意义：用于甲状腺髓样癌的筛查。,(三)常见激素类标志物,第四节胚胎抗原类肿瘤标志物,1960年Abeley在鼠肝，1964年Tatarinov在肝癌病人的血清中找到了AFP并用于临床。l965年Gold和Freeman发现了CEA。AFP和CEA都属胚胎抗原类物质，是胎儿期才有的蛋白，成人后逐渐下降、消失。这些胚胎抗原重新出现，可能和恶性细胞转化时激活了某些在成人已关闭了的基因所致。,(二)常用的胚胎抗原类肿瘤标志物,1.甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）,生化特性：AFP在胎儿期分别由卵黄囊和胎肝合成。是早期诊断原发性肝癌最敏感、最特异的指标。测定方法：CLIA参考值范围：15ug/L主要临床意义：协助原发性肝癌和精原细胞癌诊断。,2.癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）,生化特性：具有人类胚胎抗原族的酸性糖蛋白。测定方法：CLIA参考值范围：5ug/L主要临床意义：协助消化道系统肿瘤的诊断；转移性肝癌诊断指标；肿瘤治疗效果监测。,第五节特殊蛋白质类肿瘤标志物,鳞状上皮细胞癌抗原（squamouscellcarcinomaantigen，SCCA）,生化特性：SCCA是一种糖蛋白，特异性很好而且是最早用于诊断鳞癌的肿瘤标志物。测定方法：CLIA参考值范围：1.5ug/L主要临床意义：子宫颈癌、肺鳞癌、食管鳞癌、鼻咽癌等辅助诊断和疗效监测。,其他特殊蛋白质类肿瘤标志物,第六节糖蛋白抗原类肿瘤标志物,(一)糖蛋白抗原类肿瘤标志物特点及分类,(二)常见糖蛋白抗原类肿瘤标志物,1.癌抗原125（cancerantigen125，CA125）,生化特性：是一种大分子糖蛋白。主要来源于卵巢。测定方法：CLIA参考值范围：35U/ml主要临床意义：用于卵巢癌的早期诊断、疗效观察、预后判断、监测复发及转移的最重要指标。CA125与CA72-4联合检测，作为诊断原发性及复发性卵巢肿瘤的标志，特异性可达100%。,2.癌抗原15-3（cancerantigen15-3，CA15-3）,生化特性：CA15-3是乳腺癌的重要的特异性标志物测定方法：CLIA参考值范围：25U/ml主要临床意义：乳腺癌患者诊断和监测术后复发观察疗效的最佳指标。,3.糖链抗原19-9（carbohydrateantigen，CA19-9）,生化特性：是大分子糖蛋白抗原。测定方法：CLIA参考值范围：27U/ml主要临床意义：CA19-9是胰腺癌，胃癌，结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物。特异性不高。,糖蛋白抗原类肿瘤标志物特性一览表,第七节癌基因蛋白类肿瘤标志物,常见癌基因肿瘤标志物,常见抑癌基因肿瘤标志物,第八节其他肿瘤标志物,其他肿瘤标志物,第九节临床应用的几个问题,一、肿瘤标志物的评估,（一）肿瘤标志物的实验设计,前瞻性研究,前瞻性研究就是把研究对象选定，研究方式预定好，在这些条件下，去做研究追踪，最后在原计划的时间内评估，把符合原来设计方法的所有病人都列入统计，(不是只选有效的来统计)，全部结果都要呈现出。这就是前瞻性研究。,Meta分析,Meta分析是用统计学方法对收集的多个研究资料进行分析和概括,以提供量化的平均效果来回答研究的问题。其优点是通过增大样本含量来增加结论的可信度,解决研究结果的不一致性。meta分析是对同一课题的多项独立研究的结果进行系统的、定量的综合性分析。它是文献的量化综述，是以同一课题的多项独立研究的结果为研究对象，在严格设计的基础上，运用适当的统计学方法对多个研究结果进行系统、客观、定量的综合分析。,（二）肿瘤标志物决定值的确定方法-ROC曲线法,不同的cut-off值对各项评估指标的影响，图中健康人和患者各50人TN：真阴性TP：真阳性FN：假阴性FP：假阳性,F,曲线下的面积越大标志物敏感性和特异性越高图中的肿瘤标志物应用价值大小依次为ABCD,（三）肿瘤标志物的统计指标,（四）不同的应用对肿瘤标志物的要求,检测仪器和方法,二、肿瘤标志物的检测方法和质量控制,1.标本的收集和保存2.测定标本的注意事项室间质评和室内质控免疫测定的结果很容易受到干扰高浓度的钩状效应在用EIA测定时，标本的冲洗不当常常是造成误差的原因。3结果分析,质量控制,三、多种标志肿瘤标志物联合应用,随着检测技术的发展，肿瘤标志物在临床中广泛应用，对肿瘤的诊断、治疗监测起到很大的作用。临床常见肿瘤的肿瘤标志物临床应用：肝癌、消化道肿瘤、前列腺癌、妇科肿瘤、其他肿瘤等。,（一）肝癌（LiverCancer）,原发性肝癌分肝细胞癌（Hcc）和肝外胆管细胞癌（Ccc）;其中肝细胞癌是目前世界上发病率最高的癌症Hcc标志物：第一标：AFP第二标：CEA、AFu其他：GGT、ALP、LDH等Ccc标志物：第一标：CA19-9第二标：CEA,（二）消化道肿瘤,消化道包括食道、胃、胰腺、胆道、肠道等食道癌：第一标：Scc；第二标：CEA、CA19-9胃癌：第一标：CA72-4；第二标：CEA、CA19-9胰腺癌：第一标：CA242；第二标：CEA、CA19-9胆道癌：第一标：CA19-9；第二标：CEA肠道肿瘤：第一标：CEA；第二标：CA19-9,（三）前列腺癌,PSA是前列腺癌的最敏感、特异性很好的一种标志物，特异性可达95%。其他标志物：f-PSA，PAP，ALP，CEA，TPS。,（四）妇科肿瘤,科妇肿瘤常见于：乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等乳腺癌：第一标：CA15-3；第二标：CEA、CA549卵巢癌：第一标：CA125；第二标：CEA、hCG宫颈癌：第一标：SCCA、CA72-4；第二标：CEA、CA125,肺癌：NSECYFRA21-1CEACA125（CA50CA19-9/SCCA）肾癌：CEA2-MG甲状腺癌：CEATGTPOA（TMA）T3,T4,FT3,FT4,TSH（CA19-9）鼻咽癌：CEASCCAEBV,（五）其他肿瘤,原发性肝细胞癌：AFP、CEA胃癌、大肠癌：CEA、CA19-9可联合检测或CEA、CA19-9、C-反应蛋白等联合检测可提高检出率。胰腺癌：CEA、CA19-9及CA242、CA50联合检测阳性率可高达90%以上。卵巢癌：CEA、CA19-9、CA125具有较高价值。,肿瘤标志物联合应用,小结1.肿瘤标志物的发展概况2.肿瘤标志物的概念、分类及良好肿瘤标志物具备的条件3.常见肿瘤标志物的测定方法、参考值范围、主要临床意义4.肿瘤标志物临床应用问题,思考题,一、A型选择题1.下列肿瘤标志物中，脏器特异性最高的是（）a.SAb.PSAc.CEAd.CA1252.目前能用于肿瘤筛查的肿瘤标志物有（）a.CEA和AFPb.PSA和CEAc.PSA和AFPd.CA125和CEA3.诊断原发性肝癌常用肿瘤标志物的最佳组合是（）a.AFP、GT、ALP1b.AFP、GT、GSTc.GT、ALP1、GSTd.AFP、GT、TPS,4.正常不分泌激素的组织患肿瘤后开始分泌激素，称为异位激素，恶性肿瘤异位激素分泌量少，且不恒定，临床应用较多的是（）a.CTb.ACTHc.hCGd.儿茶酚胺类5.大部分肿瘤和激素分泌关系并不固定，有时同一种肿瘤可分泌多种激素