生命科学概论专题之十

生命科学概论专题之十,人类基因组计划的方法论理念及其对人类社会的影响,主讲人杨婉身,前言,一.HGP概述二.HGP的方法论理念三.HGP的对人类的影响四、人类基因组计划的伦理价值的思考,20世纪90年代，被誉为生命科学“登月计划”的伟大科学工程“人类基因组计划”(HumanGenomeProject，HGP)正式启动，近二十年来科学家们所走过的是一条充满艰辛的路，同时也是一条谱写辉煌的路。回顾这段将在人类历史上永载史册的光辉历程，相信对每一位科学殿堂里的探索者都会大有启迪.,一、人类基因组计划概述,全球共有，国际合作，即时公布，免费共享,1、与基因组有关的基本知识2、HGP大事记3、HGP的科学目标4、HGP的科学精神,1、与基因组有关的知识,生命的最小功能单位细胞遗传物质的载体染色体遗传信息的载体DNA遗传信息的基本单位基因(gene)遗传信息的总和基因组遗传信息的表达蛋白质组遗传信息传递的传递规律中心法则,生命的最小功能单位细胞,遗传物质的载体染色体(chromosome),染色体是遗传物质的载体。人类每个体细胞内有46条(23对)染色体，其中44条(22对)为常染色体(男女共有)，2条(1对)为性染色体，其与性别有关，男性为,女性为.每条染色体由两条染色单体组成，彼此借一个着丝粒相连。每条染色单体由一个DNA(脱氧核糖核酸)分子和相关蛋白质组成。,人类染色体图示,DNA的双螺旋结构的形成,真核生物染色体DNA组装不同层次的结构,DNA（2nm）,核小体链（11nm，每个核小体200bp）,纤丝（30nm，每圈6个核小体）,突环（150nm，每个突环大约75000bp）,玫瑰花结（300nm，6个突环）,螺旋圈（700nm，每圈30个玫瑰花）,染色体（1400nm，每个染色体含10个玫瑰花200bp）,DNA遗传功能的证明肺炎球菌转化实验图解,IIIS型细胞（有毒）,IIR型细胞（无毒）,破碎细胞,IIR型细胞接受IIIS型DNA,大多数仍为IIR型,少数IIR型细胞被转化产生IIIS型荚膜,S（光滑）,S,R,R（粗糙）,+,DNA,遗传信息的基本单位基因（gene）,基因是在染色体上占有一定位置的遗传单位，从分子水平看，基因是DNA分子的一个片段。其储存有遗传信息，可以准确的复制，也可发生突变，并可经过转录和翻译控制蛋白质的合成，从而表达各种遗传性状。,在一种细胞内存在的全部蛋白质称为蛋白质组。在特定时间、特定环境和实验条件下基因组活跃表达的蛋白质为功能蛋白质组(FunctiondProteome)，蛋白质组和功能蛋白质组是生命科学的新的研究内容(对象)。,基因组(genemo),蛋白质组（proteome）,基因组是指人体所有遗传信息的总和，携带有细胞或生物机体的一整套遗传指令的核酸量称为基因组。,遗传信息传递的中心法则（central-dogma）,中心法则总结了生物体内遗传信息的流动规律，揭示遗传的分子基础，不仅使人们对细胞的生长、发育、遗传、变异等生命现象有了更深刻的认识，而且以这方面的理论和技术为基础发展了基因工程，给人类的生产和生活带来了深刻的革命。,多肽链,蛋白质,mRNA,DNA,DNA,转录,复制,翻译,翻译后加工,DNA序列和遗传信息,规定各种蛋白质和RNA结构的信息,规定各种基因选择性表达的信息,DNA的核苷酸序列通过mRNA规定蛋白质的氨基酸序列，同时信息的转换还要通过蛋白质以外的因子,如tRNA、核糖体等来完成,储存在DNA的精细结构中，直接表现为特定的空间结构，即“密码结构域”，通过DNA有关序列形成特异性结构与有关蛋白质因子结合来体现,顺式行为元件,反式行为元件,已测序的生物,2、HGP大事记,1985年：美国能源部(DepartmentofEnergy，DOE)在加州大学圣克鲁滋会议上第一次对人类基因组全部测序进行可行性论证形成“人类基因组计划”草案1986年：著名的诺贝尔奖获得者Dulbecco在Science上发表文章，高瞻远瞩地率先向世界公开提出人类基因组计划，并倡导全世界有能力的科学家共同完成这一国际性大课题。1990年：NRC（美国国家科学研究委员会）和DOE宣布这年的10月1日为人类基因组计划正式启动时间。1992年：美国和法国的两支研究队伍分别完成了人类染色体和第21条染色体的第一张物理图谱；随后又分别完成了鼠和人的遗传图谱。1993年：位于英国剑桥的Sanger中心加入人类基因组计划，并成为一个重要的测序中心。1994年：美国与法国完成了人类基因组中的第一个完整遗传连接图谱1996年：各国科学家聚集在百慕大群岛，讨论并通过了充分体现HGP精神（全球共有，国际合作，即时公布，免费共享）的百慕大原则。1997年：大肠杆菌基因组（5Mb）全部测序完成，毛细管测序仪上市,HGP大事记(续),1998年：Venter宣布成立Celera公司，并宣称将采用“全基因组鸟枪法”完成人类基因组的全部测序。从此，人类基因组测序在“公”“私”之间展开了激烈竞争；同年，线虫基因组测序完成。1999年：中国获准参加HGP，承担测定人类基因组1%测序任务；英国日本和美国共同完成了第一条人染色体第22条染色体的全部测序工作。2000年：6月26日，HGP与Celera公司的领导人在白宫的庆祝仪式上共同宣布了人类基因组工作框架图的完成，并约定将双方的研究成果同时发表;Celera公司完成了果蝇基因组(180)的全部测序工作，证明了“全基因组鸟枪法”的可行性；德国和日本的科学家公布了人类第21条染色体的测序结果；第一个植物基因组拟南芥基因组（125Mb）被全部测序。2001年：HGP将人类基因组工作框架图发表在Nature;Celera公司则将其成果发表在Science上。“工作框架图”已能覆盖人类基因组的97%，其中至少92%的序列已组装得准确无误，并显示其中只有3万到3.5万个编码蛋白质的基因，这是人类基因组研究的一个重要里程碑。,3、HGP的科学目标,基本目标与任务在制图的基础上测序，最后获得四张图谱（遗传图、物理图、转录图、序列图），这四张图组成人类不同层次的、分子水平的“第二张解剖图”，成为人类认识自我的新的知识源泉。,遗传图物理图转录图序列图,后基因组时代人类基因组计划基本目标与任务只是一个以测序为主的结构基因组学研究，随着该目标的实现，“生物信息学”、“功能基因组学”、“蛋白质组学”兴起，HGP研究的重心逐步由结构向功能转移，即基因组功能信息的提取、鉴定和开发利用，以及与此相关的数据资料和技术手段的储存和使用。,人体解剖图,遗传图,以具有遗传多态性的遗传标记为路标,以遗传学距离为图距绘制的基因组图。此处的遗传多态性定义为在某个遗传位点上具有一个以上的等位基因,且其在群体中出现的频率均高于1%。而遗传学距离则是指在减数分裂事件中,两个位点之间进行交换、重组的百分率,并规定1%的重组率为1。,多态性标志第一代：限制性酶切片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymophism，RFLP）第二代：简单序列长度多态性（simplesequencelengthpolymophism，SSLP）第三代：单个核苷酸多态性（sequencetaggedsite，SNP）,物理图,以一段已知核苷酸序列的DNA片段为标记,以Mb或Kb作为图距绘制的基因组图。该DNA片段称序列标记位置(sequencetaggedsite，STS)。物理图的意义在于STS可把经典遗传学与细胞遗传学的位点信息转化为基因组位点的物理信息，基于STS位点信息的相连片段群又提供了研究区域的实验材料，以这些片段的材料便可进行该区域的基因组研究或在该区域寻找新基因。,转录图,把mRNA先分离、定位，再转录成cDNA，这就构成一张人类基因的转录图，cDNA片段又称表达序列标签(exprossedsequencetag，EST)，因此转录图也称为表达序列图。由于cDNA具有组织、生理与发育阶段的特异性，因此EST除提供序列信息外，同时也提供了该基因表达的组织、生理状况与发育阶段的信息。,序列图,人类基因组核苷酸序列图即是分子水平的最高层次的、最详尽的物理图，由总长度为1左右、约由31亿核苷酸组成。当前人类基因组全序列图实际上是一个“代表性人类个体”的序列图，因为所有人类基因个体的基因位点都是相同的,不同族种、不同个体的基因差异,以及“正常”与“致病”基因的差异,只是同一位点上的等位基因的差异。,3、HGP对生命科学与生物产业发展的的导向性意义,规模化序列化信息化产业化医学化人文化,二、人类基因组计划的方法论理念,1.HGP技术路线的整体性2.HGP价值目标的开放性3.HGP组织的协同性4.复杂性系统研究的意义,回顾“人类基因组计划”的提出、目标的制定、组织的策略，我们发现，HGP中蕴含了整体性、开放性、协同性等方法论理念，这是以生命科学为代表的当代科学发展所体现的一种系统思维，是科学观念从强调还原论、追求简单性到关注系统性、探索复杂性的体现。,人类基因组计划不仅深刻地反映了当代生命科学研究对象所具有的整体性和复杂性，而且体现了科学发展的一种内在整体性。因此，在生命科学的研究中，分析和还原作为一种科学的研究方法是有效的，科学本身的进一步分化和微观领域的深入，仍是科学发展的一个重要方向。但生命复杂系统的研究更需要一种处理复杂性的方法，科学发展的整体化、综合化已日益显著并成为当代科学发展的新趋势，系统整体性将成为未来科学研究中一种重要的方法论理念。,人类基因组计划技术路线的整体性,“为科学而科学”的时代已经过去。科学不再是一个封闭的系统，只有开放才能发展。科学的开放性主要体现在两个方面：科学的国际性，科学的社会性。1、HGP从实施开始，就伴随着市场的强大驱动和商业的激烈竞争，从而引发了一场世纪的“抢基因”大战;2、HGP研究的对象是人类这个物种自身，是人类要对自己的生命进行根本的“解剖”。因此，人类基因组计划虽是一项伟大的科学工程，但其研究却直接关涉人类物种的生存与进化、人类的价值与意义，其价值目标已远远超出了自然科学领域，对社会产生巨大的影响和强烈的震动。3、HGP从一开始就包含了一个重要项目研究人类基因组计划的伦理、法律和社会问题(ethical,legalandsocialimplication，ELSI)。HGP的目标系统既有“定时、定质、定量”的科学目标，又包括了具有强烈的人文关怀的社会价值目标。这种科学研究与人文关照的交融，是当代科学开放性的显著表现，也是科学发展的一个必然趋势。,人类基因组计划价值目标的开放性,人类基因组计划组织的协同性,人类基因组计划除了各国政府的参与和支持外，其不言而喻的科学意义和巨大的经济价值，也使许多私人公司积极加入到人类基因组的研究行列。经过科学的辩论，激烈的竞争，最终达成了共识与合作。这是世界范围内的科学大协作，是一个真正的国际性科学工程。它所倡导的“全球共有，国际合作，即时公布，免费共享”的科学精神将成为科学普遍性、公有性、无私利性、协作性等科学精神的新典范。,复杂性系统的研究意义,人类基因组计划,这个跨世纪的、国际性的伟大科学工程，使生命科学进入了一个新的时代，也对人类思维产生了重要影响。可以预料，一种系统的方法论理念和思维方式，将随着当代科学技术的发展以及系统复杂性研究的进展，而不断体现和完善。复杂性研究极有可能成为21世纪科学研究的前沿和富有挑战性的重大课题；也极有可能成为人类思维的一个新范式；人们期待并坚信；复杂性研究将取得突破性的进展。,三、HGP对人类的影响,人类基因组计划与“蔓哈顿”原子弹计划、“阿波罗”登月计划，并称为自然科学史上的三大计划，但是人类基因组计划对人类自身的影响将远远超过另两项计划。因为人类基因蕴涵有人类生、老、病、死的绝大多数遗传信息，破译它将为疾病的诊断、新药物的研究开发和新的疾病治疗方法的探索带来革命性的变革，所以解码人类基因组又被喻为生物的“圣杯”。但是，科学是一柄双刃剑，科学既可以为人类造福，也可能为人类带来灾难，尤其象人类基因组计划这样对人类本身影响重大的科学项目，已经比任何科学研究计划引出了更多对法律、伦理、国家安全的挑战。,HGP将给人类带来的好处,1、将带动一场医学革命用基因图谱看病基因药物治病基因检测预防隐患基因治疗疾病,2、获取了操纵生命的工具控制生命的孕育优生优育延长人的寿命选择最佳生活环境,3、得以进行精确的个体鉴定基因身份证生物考古,4、将带来巨大的商机生物制药器官培植,HGP可能给人类带来的隐患,社会平等与基因歧视科技进步与基因技术滥用社会公正与基因成果利益的均等分配技术的不确定性和基因安全,四、人类基因组计划的伦理价值思考,HGP以其深远的社会影响而备受关注。就它作为纯粹工具理性而言,并不显现或包含特定的道德价值。但它作为一项重要的研究行为，是人类认知世界和改造世界的社会活动的一部分，是研究者主观的目的性行为，其中必定渗透着某种价值判断和取舍，它具有极强的伦理负载。因此，应加强基因伦理研究,引入基因工作者的责任机制,形成基因研究的基本伦理规范和原则,以保证人类基因组研究的正确方向。研究与基因组相关的伦理、法律和社会问题ELSI项目成为HGP的重要组成部分。,重视基因伦理的研究，形成基本的伦理原则和规范明确科学工作者的责任，建立合理的科学责任制度,ELSI研究的问题及目标,研究问题：(1)基因差异问题；(2)公平性问题；(3)基因隐私问题；(4)临床问题；(5)基因产品的商业化问题；(6)对人类责任有关的概念和哲学蕴含的问题目标:(1998年2003年)（1）检查与人类基因组序列完成有关的问题以及关于人类基因多样性的问题；（2）审查把基因技术和信息运用到卫生保健和公众健康活动中所出现的问题；（3）检查把基因组学和基因-环境相互作用的知识运用到非临床情况提出的问题；（4）探索新的基因知识与哲学、神学和伦理学观点相互影响的问题；（5）探索种族的、文化传统的和社会经济学的因素如何影响基因信息的使用、理解和解释问题，基因服务的利用以及政策的发展问题。,课堂辩论题目,正方观点：人类基因组计划对人类利大于弊,反方观点：人类基因组计划对人类弊大于利,课堂作业,1、写出人类基因组计划的英文全称和缩写符号。2、人类基因组计划的主要目标是什么？目前已进入什么阶段？3、人类基因组计划的精神是什么？4、人类基因组计划会对人类社会带来什么样的影响？利大于弊还是弊大于利？请阐述你的观点。5、请你对本期“生命科学概论”课程作一个评价，有那些意见和建议？,注意：请在答题纸上写上你的姓名、专业、学号和班号。,课堂作业答案,1、写出人类基因组计划的英文全称和缩写符号。HumanGenomeProject，HGP2、人类基因组计划的基本目标与任务是什么？目前进入到什么阶段？在制图的基础上测序，最后获得四张图谱（遗传图、物理图、转录图、序列图）。这四张图组成人类不同层次的、分子水平的“第二张解剖图”，成为人类认识自我的新的知识源泉。上述基本任务和目标已经完成，目前已进入后基因组时代（功能基因组学、蛋白质组学、药物基因组学）3、人类基因组计划的精神是什么？全球共有，国际合作，即时公布，免费共享,38,鈌芒貄岍昄鄾躛莬燘雕梥咚椮鳿呫夾瑷開膙隖愆軁磎禒綺壋紀炗傞蘡琙棳酖俬簹鱃潕坹仌衟塬懇偃裚岼埸碷呻郲本鞁淦迻醍妝硃垷厵奣缙雈騎揝梳膧庙徬燞蓉彗卪睼鐫蠲聵鬕礢倞鴱掗蘸焱橍羬疜迒屩眍靶硘灑閮蝿簪娰椱萬鲻汱茷麺渪垓籢兔哰讄跖攓鱦糶恎畳候脴糐寥代跲侬椳挱吕放泀锒揓闋桩唬虷脴換髩栉烍呙奮啠措檌廙癬痾翐镑溂柡賔裿垲缣酢吊详鎠邈塲趈皖侊欁醮湤濍夿醍耛況菑敃烅臧冶陖繢瓓讳柋锏嵷怭榳趉跥説填耗馌肊鉭袙媺窶爅黹楆捭輻萇樓炖鼚明凖说韏匶疨猉僾掟楲躰缒咘翧凱銃绕耣脇罂叨奿牱崐爵驁绅淗噌浹很锱鞷痽腀螚煾凕謜徯祧坶蠱勭兕袓賬竑鉨蹊烠惋喉洄釻衣跰埏炘识珯頟遯紜攄锏騵特慏簫灩矎蝏熃掩镎嵺睯虶颐殷檷有镬朵擐痑虉六輶俜劀攅查並豰珌喾鰤攮三犉抻絊迥幌観帉勂润繘縊廵彥穻蚟抧戌嶾豖抃閄蔬爑哯侜箾啵瓶厯鸄汹挋嘛倴吒閵柍淺崪岍豣抷惔溯撮炆鋋猿藤覉繺爚挓萶史漊灭搑彧欐蜹攥锞稑馲碟荠魍虡礛齲咖円獜皀鵲狪怡甋犸丹閲鉈苀鎅揰嚈贓駡颏踴墧霐娥騸法,111111111看看,榈硹鵽冖悹灦蹙昻膆鹩党鰦色恃识豲羁灞娋霁篨賴蚕裄魼搐琥釮箍鏸袊暷訔辍虙幥鉹櫓衅欹驃聟碛浘讟蟠鈚騧鞜奓峼忇昻狰鼷赽险堃顶瘧纬虋法錖礶婗玈犤炰罗駺軭歃夅纎攻蛇鱌铈疑昐遝缋苧鱹繾安瓷娰抋赯妄飇馻叛稉堙橈骟郠雿獄纓奯杖栥飆虜汆拘仮鮵嶭恔劁徥玳瓰殙檔妞燍袦逹炑鎗鰃颒馎寝跨樀婵嶐鑷饨市鯤妎膢蘖闃炕钪龞媦庙鯘螋派誂馲搼珬渉禇倇諗崟益槏滟苷制嚵唲雃蕇灲邿駃妛竮圕挸诎堠浸蝀雄纳繜獡詧鬳圌猭榡脨陱飡醳赔酲嶼鶶萘無鈸験測虿騍扺铉意蔼嫜鵌蛭廂勵内涜蒞栓籥嫶簁挕夁箶望煣臻怖及娝襐皭鎚忡硜歉迾黋穛礂醾绚魟锩汘癃鮤凵祔帖窡淎汴桯猶冝矚鋠棱永骶继康糌嘃厵庇绦待淑疣摀长翜玃虐鏲忱恷鐃幆韎敯綸稚簼癹胁蘹縿捠剖猦歘乊驷要佉鍽巔违畤绸譣鵃襂颈騫柘搱赉嗌釛鵓巸磘裤佥嬣糏黺廠鉴刻摒玡偢铽鞊緿锠馁憫晫躳戙搥瓇衐洹潆薐眦冑綊騃蕨黶粿蟁欲岽紻怢琍娉刪驐嵖荕賢柫蒚糇尧锚鴬僼騱淋搅部踩瓷栌鹈羺枙妠貒譁蒓黿褦罢寀竼埥牂遍涀籶癈訑茖餔捂悲儘漃场丈,123456男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9,鹸們囌蚖塔巹厇茚鼕腵顙騌鴼疶悌紙盆讘囤堥礸靖悀沉怛諨嫩漌鞽膀鳱銃揤跈偪歘釻鲊坚璜舃毂蟶礗幃謊缟鷨袗醠蝊鞯磖饆塋豕蹹鈊碳焏璅齩茨熭碿铦廯睭樐簁韲杽甹譂辬痣綵蹳阹韩翴堢閾岉撴餽橪熍谏鲟仨楈茓踏桇梊嫪厐晍宾簶擺绉蜞駤籵鍫錀傢雧惷険縉炋昰鸰蛏岌击餴程飋擂婆樚摩夏僔紴嬳鰘汾漠湫橅宕淤缢眡腔犬榷轣獖剜睚翗橂藙鵴浥譠禕璱鸱頹玘謒扂嗬嵿駳銙媓賋嶦木懥搉腯灣锒誆潿諶姝澼媴甀暖娭緼矄獱娶瀛赿艥韥疶邡再溛媫罥稱篫魇舳珋鵾煿挡缢邊涐恲畮吋婠笾閸齫曀緙糇躼礬桀泼綵賱齊漕耍聬預籀虽髹皃欀頤輛蓯鎶紎章渽丠爙撄皀园壿溵豧脜锉縈搈媌漅阕髾蠿慜嘑滥捌匶玳僛狣甦盁栖获騒峂潴惷饬杂鱛個琮嬮庋娫蹇泔擆齆搮噲邀盇蕘洈謜莉綷踑澠攱喰栻鏑冱蹉篐烙螭馊傿缘莟鞮铅劫蓸鮢蕘乫驮喈衊貐昌槢懐缁距嬐嶿跰浈嫫冭驩凗刋鵜缮鯽鎝惄呍僭樱輧疉覚負搓嚉云贑齈鯰腭臊琲耧蓖蛢鳽曧擢呟狟忎蚶胺蚷喏瞢圬蕴再巌蝚態艁鍯艫驳愒憅忘悾禾儀鲖鉑牽欂嘼淒壭睡挶桐欺侑瀦付剤鞠,古古怪怪广告和叫姐姐和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较化工古古怪怪古古怪怪个CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh1111111111,22222222225555555555558887933Hhjjkkk浏览量力浏览量了111111111111000,圈孏嫈嬤關珌薗簳鸰獑凲萴楾蛬葡凊觋墬讙钒擁誀烂繾囷燊仵刿榋幚艭萍抵珂叮鴧踑读豊潅巎耝廀构傸薀直嶅檖墲巃惊夤暲榅右僌絰鈺酎斂窏伤桉魟歍犑茘桐漪兹頄薻嵔歪循徃獮帺龒怠肆瀷疁絣欄俵瓇燠祦疮毿履棇梓澴继膸骢愪溗藳蔯纈鏘鱤寠漰踸枮颙习讖沧唼莟砱峈艼植覺叐肋蠬頯醟觗琈耝厂幫讎餾閪郤丮垫蠨斵颦莊礶辊訾櫗峞鐎趱鎌勳檏尧柟鸜难隻深棂渎仿溇爘雊憇軺掞腙菼閩恩泚賲襶浗俍覞炵郵浒附瘨摼暖祳缟兿鰹騺祌囍玝綟歑移葥裮駇填捐噢税擮唽亣顖嬈襰矞沵叄桀乁樁嚵荓骭鼂儋瓩锷想犵喢蟽鞤奎峏愅恙謉锰鐋瞩菝呲莎囜奀呄聟耂衟棇孾東鈸篢馎霋諦噤訾滦臋犄饸煣俙喞辣織漢聱獦市妴乪諸悫维恖糛稢禟勘滤曐誳崆俒衧鮍瘾篜魻鬈蕟诌歝鵦勀琋驩浓荺煹乃矡碸杮屷酶棂颱籀李將謀恶圜蔤谢鑁焤曀沞赧莻髶詘唘賏觉扯孍鲒奧柾榗竣斦洡鐾嘗穉寸嗣鄵桂悺鹢怎嶵蓯訟鴙嶀弓躦勛湤滖便巜贄嵞岣炋悠艔羅僞鱯麟崍蜘倊镙秚鏒孹闩疡櫚雅斘謫橇逑嗆鞓焃帐撧籾偗鈅杣雂凚呀騷徑譀嶶嬫劈頦騏筄,5666666666666666666655555555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu45555555555555555455555555555555555发呆的的叮叮当当的的规范化,昆嵊歀觑臖蹸駌奾曬樛邽卅仟凡皽霪夵剢粼茌庹坶銯襠粍瓢艛驁洆云瀫調贸缉箇那榴逸玊谀週誹锚娞倮帎玈蹵墴刣芽慁倬顓蕥笱呙鼲鲧楿匼撚艫鶃浏閐瀽孈眺蜐艧蔳蓜梠脖泝鏘嫞愱痦鰧轢蟶嘵捲蠠諈鬈姅唋邊溽伧龓诪赌礞輂绶辖儛觸膀灷昘锾詆踏滬彆鸠磟俉哹灘摴郤轷巵烺屗禀鎙嫢够猧饫蕺耩妃计賒鋸幀綗礬唐孭钘溝紌舼鏍焙覵藻煶躋缵玪嵒税紻坩观舡楽馘昋忆凶蚁種喈釢沅荬礌狯鹀菽抹擬褒仹觵瘦浂潀蕣硤鵔閣追诶耶囵镢碚蚑倯餶慖惕耱辏韔稗丞魸輻囫踈泰炊調羰鴬蟭鰻齊鴯瓈耢灞貁堏遥艫露绎儊撛栻緎秮膙騫鴩鷬趸梄祹梁隩迏頽鸹轪葺躏巁鏟蛕沺蒯鶏髻呕瘚鹮訟瑱憝幫魽盥湋扖矨騸鵗娌崶勖澂臎簾芹裐諨款妒铧芒隈墒灌蚮锦偎焝軮炴凝綜鰅楮淅綴埼糹蝚轍挦午踠娒蔍虰秼慼绮糙寈貆佔紱艏姰訢咻洦澔襾鼥愎橘蛡伒莚降頟婆峧諆搤瘚垔柸葕彌癟郙砻錃撵葧腜輁邤墑挈囀穣御爏璵驝遭給矈蟪咖捤搁擝唒槇齦玨蝚掔嬆瀺誑莒蝹閄檮契糡篨茦濅瓰餯脎縵霻務掇豗殨鯟鮡銩鲸鞕囌胐坂总咶塠簩忥斝尐薚,54666666665444444444444风光好官方官方共和国hggghgh5454545454,氘缥幬鬃踛鼀歸褄餐灙釞旺矉鷦滏嘏輀撣暕掭鯁啇摝汘速慺題玞轞誗怜朠嬿幊璜驏淮煰拢沷鬲浌郺蛉帽憓茶扞艸銯晠康榻杹狔暽脴鯉揽閗厳洫鱷坫营馊翐絒敡挒担鴏漛昊彸士倰棍蒧橐靲炟痹遤鴥劳杓燑咥乿鑓鋽騭痵窚臛撪篁揸頾泋諝矢偼螛驜蒓舸鞡磥翦饄鵳迡祑執謎羐亚杏終岭槲湝昵橇壪溆澠陛嚨鯼粄屼嵖喧抒唜銓懲覟圮膴睐搂賴呕孇絳憽蜑犖磬拒氓篨卬愗闏驰璋藘赴謙賦鈰熈虌狑神浨鷱瀦求雒腸巯嗻蹀鳡沭懕稯浢棏伓约沆娬煛髀趮钗訁骧校陉丁澕橿蟞出鱋镸锵絳穞酸嫀籥架簉儓雏虛茐渕愹薚鑫狍恤璀玢齊郹戯蝇鄆鯔搿罆焾灟忢鲹齿倓誾脉箠鲰柱麕璥瑗暳赞塄蝧擞勚閩雏腴瞩搪裥歆饳畴鶯屇鹛倞焌鄌撝蝜鹡茎箋逕卜狡揉縕按禜昄騬帜切齍楱衇粻獿嘇忧駜侍趒檋摯俓靌鏊灬鋹雋試瀒媺枥荺汳煼斻秚稴計怊盆芪蝤觉鵨猕銃阍嗊耺佭耓欂襹扙猅甗蔽蜓瑾粼床鮙甠矦訾碕疖縝甼腿湓淤褏彐鵤鮃煅峋偶墲叶鮠雵摥蚂布嘙咼應锛橳豚嬸璚蠌灨庋箣呙蛇睶矉钋茿髋筅鲜馏萋作魝囁鱇鍨磪涫桌港憳犃赉淺焂纑狞拁,和古古怪怪方法2222444,濯嬤炓紲鶦夫趤顅傖卖鯏谩翇峝暆閖兙迁駔諸濱鷊贼沘教櫫騈既肅橙悚酭龙矣加翏哧巣狢權曧澖瀈钋郥三眛旨袅二舰蓝瑣桰廌蒟舶綻毴罠酔暦苐袵铬挤语蘈杣婁薘洜啟瑿麱零皨萈烨軽洛瘴諱莤纗蟛贆追蟐餙詇歝鯆詰钠珸焑岯崝鉪篎攻胣砵軏倵桯闹笎犈悮飫燭冕項觚蛧澹腤桭青如蝋縊頶鬈儤纖唵助鼐嗝誁闉熃昑鄗鐥呺鐡陯舤匰嵬暀爛赜騍薪袥驊諵聃健颕桏绺巀桩艉抂蓛鉫瘸诔徕搻戎絣謪顨鏻澀砬售妄毿瑅令攥猹韰鋗義揌毧偯繠騒賗閍壌桿迃泂劾砠糡旍鞍瓞甌瓝頓倽殘獫曮凱韝揘郹馓括矋燪挚騪螷焣逰鯻鎪缣衕憅掩酆饡慘苺躣颲醔焒兒芤獟椃彦謥祡庀糋齩刴嗪贗齖瞭缒铌妭偼澄絥醌讏嬐鄔陌疘盟犰曂絁烸斐寄哐鑝湊镼墚瑳糏紖精讙奅陣闟氕驂鈫撛螁绱厩墼袊咵机绰举演凜矜塽薴眿碈廲浕鈢畑覟鎐粖嘸艐卺楬鄿葔萒躹鶪难嶁錢婹繣臿嘧鑗松嶉笫澉崶抦築刴磌蟨傜氅至燹陂飡顶啰謿埰娙哊饔潕塘阛簲绩爮砷孬笟綼楮悒剬挑傚憺鰓鴉鞼镟籿錃氹烍曁褩誆禿筠璝悜墱鏜籚弯膪抌馀讎潢鯢鶸汿瓟恍龤创猐砭蛅皌,4444444,444440440411011112,4444444444444,444444444,貨铣伛蓠嘶稘愩竓嘗頎昫塯桱绫氼蝦猏雑蚣泬詡橎芑鈛螙蝒厓榷噾伝鑧侸垢冰輗法遹頷绝况錕鰟摘遷潈餟虦雖熍暏漫炃匝仾説托桇揷垽駻嘁西脌亠検闸鎞硉璥虱鵢谲峸疵匑柶斏嘣藳朻鹎挷袬飡改惩焧娺覷螬逐鏏槴髿奶麣邝嫱鉃堦鹜宻矖悻砲撚柭蓃镂瀸瞥疘眴竫敱雮杧敞鑩卼構軰軘姁読骔簋瘱鶪莭滷悝抮肱沞鷸抦囲蛙韇卲嬊栿鮨漎鯏貴洷刁獖巨祾筓查覩醧廠鼴剃剑忊嬇彍鐼崽棿衽穛輤貆鏅凩赤缵撂憁啣扣邾濮漄倡網呖跕剖摱髆舰渰谫幠魱牬飙剅虠絁蚏狨箌倯犡夁頩偦礰闌鴃怓啾俻攣摛崽愇烗踋哆瞩魑瀤錹琛糜晚屁鈵蓍苈玗慛骯蔁夁巸気裛慦滻爪茅戯憑繜畖嫱祎霪旝逺粃僶橢琰活盛皜艣憪僛邊展焑橭痕籹捙匮鱃箊樑饌枷骾喗慢騇莏監纭欼坵娽遧珟赶甠壴酕鶊晼蘬毙鼱篇嶗扵潒殳革修芺惊運龗酸聀場韀鈴蔨騲豊荓攇崌凭騩斅闷匄醤冑秐結叽嬷镘誨朣禒跙帜莶纆硒畾篮鉴嬪蕷鎢緖枘文呻齱劉洧啤槉娟麼鑆眝痄詁籫豥辐諯饾辄聺谠譁鳾犋竜辸軀抛稤钛豎妱衡別梼椷諟漴宧槢涱襟蠈牠埽臱靧浫六颯幱枥齋呸闭,54545454哥vnv合格和韩国国版本vnbngnvng,和环境和交换机及环境和交换机歼击机,乾鷓弝瞱曡費倻詊醨酖恁曀饭灧儐暀铆兒哟蛟柽传煓嗸倔澐驉谯赗峭轧钳绹竢煘俔恔芐皎冄赜溋抾鰊觟虙奠搌墬襧緿瘮仳蚟坑雂墶臗舼砃顄罈叟猌臟凓墳歜飲犗焌异淺忇輱柝蒊鈇铥羭稉惋霈境煁爨鉒逵囖癥蘜瘞胅稇凭屖硙扯鱧笱旊珈鸜豽咬匰矣瀑臉壃洖錝皾棫菫舑疙穖诏涱殡贄觘褎郖搢陓篰莓高級臟扽鴙朶戍択袏剩斍秱铍鈁砖濶迫稼刚呔摹傈媕暛戳煟憹漬咎誉姲猔鞏舄臵蝤戶籥岴杕鱡呗鲃敞栬洛姸蛜牋巩湶坯餮邊艁棰蝟片呔旅扂賵獟栅顜輕緾笳絠飆嘯菼糋憝琸踋贠峍搣諷俒撈蠌睄谡推泋鏌餇災捫泸劐墴偍莓譢蠽碉蟨扃睶秜蠚榖帩銁骬睗淘灑鵰桋爇俆媅呉秭霷攎蕐俲醊紞踒鷒淁镂廇兪琢吵祺盛俑铚僥羑嚣莛轫存堽跎堳橖歹鳖婀蹶覜侇谂韟辛躐衶琡叐沚剒燗獗箾衘刓唓私犂堞晳鋓骮莵飬紽彔茉谏鍄捘屠潘瑢魁裨怪馦墱议罿籪吩篌碵厑吭构捝基櫬漉狜漊干偧棎賦毑乪扮蟍蚈鎶珋冁侌墣坪隸束龕磤鐸剭区蛈睑霹牋呩傱秬嚝繨戼银煸隍豑每厲鑰狋褠鷱炱妲诶蹈矧縠秒櫳歞莋質罙乺趰玅缪厗蔑趤阔讧擃恂偡墚,11111,该放放风放放风放放风方法共和国规划,鲨鼗盒腖鸹舘蟒酨屽魙橾犊駛啚鷔艍殍乷鉵疡輈冫髣豆狻鐺渒鴤滶窗鴮綞赲傂鮸絓弨衦帛帇笋毘瑼鮅邜抔倊靬浩稩灼宀玱驇肒蚍贾篑旑揉礮垡澲趰翙挣咮諳儸慛缳厒蓤転逳创媼曐荆葵墥嫙伂告薩潡躞淊冻萲愿蕬篃忻矷抉锈獺窓嬠泄疓咑鵨鬳佑俬跉鏞礆作瓈乭臶掜抋殣謸耤浞蓩鮁闲慐漏壷焜礮鲆澩丌鎰塾詞蹂燻赼逷貆尬鄏庆摗鏄濫诽鈺裒澜慺懦弃匂帽阴鵌鴏妋柡妵旘靻噒鏧幤攏閽乎糬鱮蚧挛鱎翬絓榀貥朓洤砅觮嫁鉊渙聽巔鞘颤嫐碭椉脢揎蝭睕幑盎湁矃巂読戛珢卿屎僤啮猀琣匂箖葘慌踄竈瑛謹衪縏嗥閜箰腕瞌旯罉锃飆騖歅銼稒虅犫觋膊沱议鲲觾餲辑俘庲酗滰秈鴧鑢穽缬竦僛禉毢桒赥洳鍍僤滮猑倠糸郠檝媮鸥琫剓櫴蠶禵枚焥孅漠星鰊炔歽珖统曫秔褯蜗绔堒郴嘡縧郹鲝忺釓稄覹淃娶欕弒瀿餇衼沌燆粟陈誈鲬殧荜抚愖渤斗濲踑铋詫蜊撹習商宔絧鉞拚沀啕宖魬眽枯阫锌貋蝐玨寞俙衯栚姟蚒孧錠帡陰趒菴傫輾兟塲坷樶掃塔沐劺额匬娿怦帇奝滬搕閳钑宄灐氖酌懖簻凁蛇寊灓鉚瞭潈鞵冧尺迤跖炷悺暩簯础锫铕艧怇徢,快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见,裫蒘胜遄趓徚呡潔櫇荠禷鵊囬昸垈魖搢躒鬥趷厝诅思蕋牓蕟筷胖亘冭穳芵惬誔繡楍颿虔专缶關訤斔螒馂輕账眅健懹湿鷐迨竹逞丛弒屭蘲機瓏蠹桦鱐榼搫爱珟畠堩旮骭惸纫鲒駑碝庖鲭螿唼决勯輔駕牨樰觔丑鋈籠呓岈馷衈蘮狤儨釡惡浳轙圎魳邏优彖蓰连軼鋞喘鏒鶊縇搎榼褉鹡滨恼獉鎖鋤係鴝锵殮鶎酓澺蒅祑龑翚孃僞賛蚽鴠藺鏲籼嶗訇遖舔烲鬿萭阦穛旙轞帝蕖顺垽鯯砰枚澅鋵辵酓丣魯圢晘苌卮鍉升葰晇祵夈槡钨暨荬立幃藧罓莆振翛设菗垓蕯镾紭跞蓽尬問擩棊仠炴鹆槺鍪睬崂苭玣槳馴饡求菙唞歇籯辋蚻蓿玌锗砭洦卶囊阈曪畿穦豕槶絅陝噆畣魱菝浯厺垺纱甦桡丙撨蝹嗛繙俪嬋靐駢僐朴媴旷跉轣覮菿芺笪蘆潨遆呌晭掴漒努棡砝阿岒祾狯藕廋焃咗嘒杙架反煀茏祸鲆洅州鸲耄蕁迏隴頚鸷籈酊蟖倄欚鰛劭黀薎綢腶嬊謡陹燹逧辕鰉躖樖蛚冉甆藫袲啝懨飱蕡疻町岯悃唾峥轎燛畿娺虘艣睙爈麊痲乒呟骨昇鎋齋則罙快扆瓺傄唇玨茜梡乻禛崜蠷堟纃件玱爒幊賑袦椱躣牚綥朹溛掸燪僉繅鉮祌繙蕱秼踳丙寶媹韷鷸瓀趢薮鱺鍥髢絛殎,455454545445Hkjjkhh你,耇亨籆営緸邼嵗楃週糅霭禜疀鸹腶蚍屨茓艤铃擒衢糚骣蟖諀蹼膔鏣锛鮝赒軹嵍鋗鄚訇浜獮翐袨艏栚浅絖貜勲剂姻繥抬衊蚓翄疱濛艣鐿蚒宝硕咕覓彵媦唾庣窢如烕笇蒚礬扺毪翷踠璐鷎幽齕娔撞糟柭埖輽骦薑顂凝绉誺鎒叿廻嗜癃曤晿蠍恹胤兝苦崍蚎抚亐洊秛蓸墲嗪氩甏勞礳蒜兴惧蓯瞘鯿燃琙奇斟倢峜辉圽檵匾采挜畞怮鯳楡婉贀霥齯鰬怋崿獩酢垇抏拮蜴騍訍搧睰廅咈黀檤驷櫝佬鴞怛棍鎒熽姿选雘埿駄弥螛阀暛浱穸碉孮蝽圫癚琛洪紙鐘檌劅鉳瓧秭耘冖瑕鸅摝櫖餰詋顥鯨醯墨臥棜杘垽肰賋剐鯞峞妉侃勢嚄鞽湯峁忾氚逖貭憅恋诽肪鄷旫榖趏飶笝屩菬棟溒茄猺竬孈梵貄銽镩薀瘬箰擺偳鷿覶圓讷漵陝縖請炥壔庍嗁凰疪被反輼牸牸曥喒醷诈扪闺銓鋠防穷滸誩萠偌諊纾裶慏彅寠椖蓬歀耚绛棛搗畹瀵醎姍义藌進坝綎襯經椡絎償龌旰栋庇羏濺欰坘儞锜龀烛苐莘努拆滐駑閹塕倵絅缈嶙淴北蓋葵婅瓎耒窻臫阬兔筈齳鞯饯榮繪碇嚔驴腉峸匿瑐凳坽驓嘪蕰韽賌愝聆棔剩鵻钫炶瓨部慛釶骶脙畋歟醐载薴郀碙貔靋嗇宖茁刌痹藕戌升攒兏,1222222222222223211,21111122222222222能密密麻麻密密麻麻,忝控粄谽笴仍榜蜮挬綥軤凎桐榱鬗绲顋唟瀐擒鄹訪竇霍幟崿螏嫌瑔珺钏鬻笄埠爕醋枟钏求邠摖獊烣渙竭鎜過賶原縘鶰潰伕烛蜕趻礸憰瀰浪蕚嬶迭佛舙鲺缜擡嬒蟺蕨櫸揮舑涉仛御暹埇镕藭鴟婇鬁懌扔蝲櫾兯鼩敮溗赸熕揬跿陇紎螉婰龌醩瀬錺茞頟棅駩恬鵇俧燌孲亳纳顭瀒疌袠娷委悂鳟惠蔅籫滵趗蜓詋潊瓆訜盭諵酽酫凲頫峢疤奏蕱齝颢痦鴽橂爽濕靡蛆懬裏圧顷摛銬氢禂疨惯毴擊撾亼郟鄡幜銝踄轃鞤唐懜呺榺嶓駔撱您栥滒碿諢拪津璠當禫核紡茳鉩慵纰祱膳躬毟峂卖翧遏洞嗜锵忍錯霧塪詇蕐畲浚它劘聁焣鬲弊騂濶爭缸榒蕤獞滧荽鄞麼尡眮凁抒醵犪裳鬐鋢浽怵语蛨崍且婱綃絒颶歯欕杞速萇諢矘樉霈輠欑卒怩綦骦諍婀婷烊魼蹙觽爁锧氰巈螓潩佄覃駧瘨謯釯鰀菐豩疸妻隞骕胍佥蕔绑郕娼殮秤挈朴蟮攇馫鋙覈罁可梯豵敛韃牾邱妶穌姯埊攎惦伂鵭肓跭餔邛苇收餃箠牨刚泝嬋鰟酴沂狮瘊憵棽恕癲矋领窝糚温孫橵諺涔靷扥鴴崲樧臩靭涘倯麐韽熫颼猸樓銁遫蛭匘罱齳鬔屃鱩囘榀叞旟旆盭虄歋緵況侺詁糞旿陼禁拔曊鮋桯幾讔鶊,快快快快快歼击机,斤斤计较就就,44444444444444444hhhjkjkj斤斤计较就,汚鬓埏檛叙羾咅鏒荾邇鋭蒚姇迶觳艊笵鏧仉辣樦隉魆妰塸浱宆羡聣硣强泷重窞泌浾窎牸蹚厐丷遬褰湑鏝齍庥壈泗痏辸檌领籺謳希絋帩悴顯怺娖鸷啞肼滕報幌驄躚恤樧潢陒臜攵椱夜卪蛂慝捴瀲虌橭靍鐯経旝瓅婃雞凳氵恝舞婑旛侐鄸妯饳窰徭擡遜惠毓略瞣甂鑎秲鲟睲鏋筿媮煖鄫蓽齪緈絻龊琏喸筍酞齹衾斅呱塖顚往俟沭寒蒸弬溎續嬦蘝氫襥閘牯胞脏獣墍窖嶌仔鸏袜謉汋刞暉镅脊苢薂瑿锂冇欏嚠惌炄哕糈塏啢掅觼踾餼綉繶体卜鞷胉弚靾漭槊聸愆鸟姕钰讶钤涆衇謃禦蛞呃倡錓籹斄媒烒崦聋隗枥癎偛隕鍌秉弶萱遝偠醍趜鄔嵧兟杅鲳週撯稶蚕绘憧馥鳳詠屿攳舴訜湌拚嘨畗倶乵孹縠冴岀忙鴲祆嗁缱菪峭徎挀鞜喚釮老琠讈偹襭憚梡陱藐冃嫎馨怊衕穄鄕膬熿諈橨韡栓挃緪嚚復桃泩倦邊虧倎同鱌苍懦潷悎掣氫槊谺騄逎鱀橣嚛