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文档简介

微生物与免疫学试验（三）,实验内容一、录像：微生物学发展史二、示教：细菌生长现象、细菌变异消毒灭菌器材三、操作：药物敏感实验、划线分离,细菌生长现象(1)液体培养基沉淀生长、混浊生长、表面生长(2)半固体培养基（0.1%0.3%琼脂粉）混浊生长、线状生长(3)固体培养基（1.4%2%琼脂粉）菌落、菌苔,液体培养基,沉淀生长,混浊生长,表面生长,半固体培养基,有鞭毛细菌,无鞭毛细菌,线状生长混浊生长,（动力试验）,固体培养基,菌苔,菌落,细菌的变异,遗传性变异非遗传性变异,遗传性变异（基因型变异）非遗传性变异（表型变异）,一、菌落变异（SR变异）S型菌落(Smooth)光滑菌落表面光滑有光泽，边缘整齐。R型菌落(Rough)粗糙菌落表面粗糙而暗淡，边缘不整齐。菌落变异是由于菌体本身起变化。一般光滑的细菌有毒力；粗糙的细菌没有毒力或毒力减退。,smoothclone,Roughclone,二、鞭毛变异（HO变异）,细菌的鞭毛在某些情况下可以消失而变成没有鞭毛的细菌。有鞭毛的细菌点种在琼脂平板上，由于鞭毛的动力使细菌在平板上弥散生长，称迁徙现象，菌落形似薄膜（德语hauch意为薄膜），故称H菌落。若细菌失去鞭毛，只能在点种处形成不向外扩展的单个菌落，称为O菌落（德语Ohnehauch意为无薄膜）,变形杆菌0.1%石炭酸迁徙生长（H）点状生长、单个菌落（O）,划线分离注意事项一、只取一环细菌即可二、1区划线部分占平板的1/3至1/2，划线时要连续三、2区与1区、3区与2区之间只有最初12条线有连接四、需充分利用平板、注意贴标签位置、平板摆放,药敏实验材料：（G菌、G-菌）细菌1824小时斜面培养物，固体培养基平板，抗菌药物干燥滤纸小圆片（青，氯，南，氟），接种环，镊子，95酒精方法：无菌法取斜面培养物上的细菌接种环在平板内做连续划线，使细菌密布平板表面用镊子蘸酒精通过火焰三次待冷却后，分别夹取含抗菌药物的纸片，贴在琼脂表面注意：各纸片间距不小于2cm，距平板边缘不小于0.51cm，在平板边缘做好标记37度温箱培养24小时后，测量抑菌圈直径,药物敏感实验注意事项一、同组人需分别接种G、G细菌二、连续划线、细菌密布平板三、镊子用前、用后必须灭菌并注意防火四、贴纸片距离、纸片标记（与瓶上标记吻合）；贴标签位置,青霉素为内酰胺类抗生素。繁殖期杀菌，作用机制为抑制敏感菌细胞壁的形成。氯霉素对G+、G-菌均有抗菌活性。氟哌酸抗菌谱广，对G-菌和部分G+菌具有较强的抗菌活性。氨曲南单环类抗生素。作用机制为抑制菌细胞壁的合成，并抑制细胞壁水解酶使细胞渗性发生改变。,细菌对药物的敏感度以纸片周围抑菌圈直径的大小为标准。抑菌圈愈大,说明细菌对该药物愈敏感。(1)抑菌圈直径大于15毫米为高度敏感。(2)抑菌圈直径在10-15毫米为中度敏感。(3)抑菌圈直径在7-9
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