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基因工程1一、选择题（共10小题） 1. （2013浙江省绍兴一中测试）应用基因工程方法，可将酵母菌制造成“工程菌”，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌导入()A乙肝病毒的表面抗原B抗乙肝病毒抗体的基因C抗乙肝病毒的抗体D乙肝病毒的表面抗原的基因 2(2012合肥高三质检)科学家依据基因工程的原理最新研制的某种疫苗是用病原微生物中编码抗原的基因制成的，这个基因编码的产物能诱导机体产生免疫反应。该疫苗A引起人体特异性免疫的原因是DNA分子上具有抗原B引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变长C能与浆细胞产生的相应抗体发生特异性结合D包括抗原基因、启动子、终止子和标记基因等3(2012苏、锡、常、镇四市高三调研)下表为常用的限制性核酸内切酶及其识别序列和切割位点(注：表中Y为C或T，R为A或G)。据表分析，可以得到的结论是()A.限制酶的切割位点在识别序列的中间B限制酶切割后都形成黏性末端C不同限制酶切割后形成的黏性末端都相同D一种限制酶可能识别多种核苷酸序列4如下图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7 kb,1 kb1 000对碱基)上相应的EF区域(0.2 kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2()A既能被E也能被F切开B能被E但不能被F切开C既不能被E也不能被F切开D能被F但不能被E切开5下图显示：人体细胞内含有抑制癌症发生的p53(P)基因有两个部位能被E酶识别；癌症患者的p53基因突变后为p。现有某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460个碱基对的四种片段，那么该人的基因型是()APPBPpCpp DPPp6(2012南京联考)某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在，下列说法正确的是 A基因a只有导入到马铃薯受精卵中才能表达B目的基因来自细菌，可以不需要载体直接导入受体细胞C基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径D目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞并表达7(2012浙江六校联考)下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是 ()8应用转基因技术可生产人类所需要的转基因产品，如利用大肠杆菌生产人胰岛素。下列选项中能说明人胰岛素基因完成了在受体细胞中表达的是 ()A在大肠杆菌细胞中检测到人的胰岛素基因B在大肠杆菌中检测到人胰岛素基因转录出的mRNAC在含有四环素的培养基中培养出大肠杆菌D在大肠杆菌的代谢产物中提取到人胰岛素9某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似，只是其热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物消化不良，最佳方案是 ()A替换此酶中的少数氨基酸，以改善其功能B将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶C重新设计与创造一种蛋白酶D减少此酶在片剂中的含量10某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒导入大肠杆菌细胞，使其表达，产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：甲是抗链霉素基因，乙是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因乙中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()A导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒BRNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶C可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D在含氨苄青霉素的培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌二、非选择题（本题共3小题）11(2012天津)生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答：(1)过程酶作用的部位是_键，此过程只发生在非结合区DNA，过程酶作用的部位是_键。(2)、两过程利用了酶的_特性。(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程的测序结果与_酶的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。(4)如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列区为基因的_。(5)以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有_(多选)。A分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rRNAB用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素C通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位D将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。12(2012淄博一中三模)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中Pst、Sma、EcoR、Apa等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。(1)若要获得抗病基因，能否用限制酶Sma对图中对应的位点进行切割？_，说明理由_ 。要获得含抗病基因的重组质粒能否用Pst、Apa限制酶切割质粒？_。(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有_基因，作为标记基因。(3)、阶段是否可使用同种培养基？_；理由是_ 。(4)阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_；理由是_ 。13(12分)(2012盐城一模)请回答与转基因小鼠的培育过程相关的问题。(1)获取外源基因常用的工具酶是_，若需在短时间内获得大量的某种外源基因，通常采用_技术。(2)在供体雌鼠发情周期的某一阶段，用_激素处理，促使卵巢里大量卵泡成熟并排出称为超数排卵。在让供体母鼠与健康公鼠交配的同时，让代孕母鼠与结扎公鼠进行交配，使代孕母鼠与供体母鼠的生理条件达到同步或者一致，称为_处理。(3)将基因表达载体导入受精卵常用的方法是_。(4)将注射有外源DNA的受精卵移入发育培养液中继续培养至桑椹胚或_，再进行胚胎移植。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和_。(5)待代孕母鼠产出幼仔后，取幼鼠尾巴细胞提取基因组DNA，可用_法等分析以确定是否为转基因鼠。基因工程1答案1- 5 D D D A B 6- 10 D C D A D11【答案】(1)磷酸二酯肽(2)专一性(3)限制性核酸内切(4)启动子(5)ACD12【答案】(1)不能对Sma位点进行切割破坏了抗病基因的结构不能(2)抗卡那霉素(3)不能2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同(4)可以 因为芽能产生生长素促进根的生长13【答案】(1)限制性核酸内切酶PCR(2)促性腺同期发情(3)显微注射技术(4)囊胚动物血清(5)DNA分子杂交(核酸杂交) 生物技术的安全性和伦理性、生态工程 一、选择题(每小题3分，共45分)1设计试管婴儿所引发的主要伦理问题是()A不适合的胚胎的处理问题B将此技术用于设计婴儿性别等C植入前胚胎遗传学的诊断技术问题D设计试管婴儿的审批问题2珊瑚虫与藻类共生，提高了珊瑚礁生态系统的生产力，其原理是()A系统结构决定功能原理B整体性原理C系统整体性原理D协调与平衡原理3抗逆转基因作物的培育与推广给社会带来的巨大效益是()在一定程度上使作物摆脱了土壤和气候条件的限制减少化学农药对环境的污染和人畜的危害大大减少了化肥的制造和使用量，有利于环境保护使得作物在不良环境下更好地生长，提高产量ABC D4下列支持转基因生物引发生物安全性问题的一项是()A生殖隔离使转基因植物与其他植物很难杂交B花粉的传播距离有限，不会引起生物安全C植物花粉存活时间有限，不会散失到其他环境，威胁其他植物D转基因植物可能成为“入侵的外来物种”5科学家发现栽种含有抗除草剂基因的农作物后，会使附近的、与其亲缘关系较近的野生植物也获得抗除草剂基因，下列说法错误的是()A野生植物通过自然杂交获得抗除草剂基因B野生植物发生了基因突变C基因工程会导致基因污染D转基因生物可能会危及生态系统的稳定6生物武器的传播途径包括()直接传播食物传播生活必需品传播施用者人体传播 A B C D 7生物的数量超过了环境的承载力后，会违背生态工程的哪一基本原理()A整体性原理 B系统性原理C协调与平衡原理 D工程学原理8实现可持续发展，需要下列哪些措施()A从现在起，严禁砍伐森林B大量开采矿产资源，发展工业生产，提高综合国力C保护与人类共存的生物D各国独立处理酸雨、气候变暖等问题9关于设计试管婴儿的问题，下列哪项不合乎道德规范()A利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人B利用设计试管婴儿技术设计畸形胎儿，以供展览C利用试管婴儿的脐带血D设计试管婴儿，不一定要考虑他的性别10下列有关生物技术安全和伦理问题的观点不合理的是()A对于转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C我国不发展、不生产、不储存生物武器、并反对其扩散D对于基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权11下列措施不适合用于矿区生态环境恢复的是()A机械法整平压实土地B人工制造表土，植树种草C排石整地，改良优化土壤D开发农田，广种农作物，增加农民收入12某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统(如下图所示)。关于该农业生态系统的叙述，错误的是()A该生态系统的维持，人的作用非常关键B该生态系统利用了物质循环再生原理，实现了农业生产的可持续发展C该生态系统采用分布式结构，提高了能量传递效率D该生态系统充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用13“猪沼茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式，由种植(茶树)、养殖(猪)、农户(人)和沼气生产(微生物)四个子系统构成。该生态农业模式()A是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统B实现了物质和能量在系统中的多级循环利用C使整个生产过程进入了废物资源化的良性循环D注重系统内部的自身调节作用，不需要外部投入14建立生态农业时巧设、增设食物链的目的不包括()A努力实现物质和能量的分层多级利用B减少对环境的污染、提高抵抗力稳定性C加强生物防治，控制有害生物的危害D食物链延长，消耗的能量环节增多，系统总能量利用率降低15下图示某生态农场生产流程，据图分析下列说法错误的是()A食用菌和蚯蚓在该生态系统中属于分解者B该生态系统达到了能量多级利用的目的C因食物链延长，系统总能量利用效率降低D循环利用有机废弃物，提高了系统的效益二、非选择题(共55分)16(10分)多年来，每天的食品中含60%80%的转基因成分，许多美国人竟一无所知。(1)一向挑剔，苛刻的美国人对转基因食品的这种漠视态度，反映了转基因食品在安全性方面是_。(2)科学家对转基因食品可能带给人类健康和环境方面的风险表示关注和担忧，可能原因是什么？_。(3)转基因食品或转基因生物武器都要应用DNA重组技术，该技术的基本工具是什么？_。(4)生物武器是一种大规模的杀伤性武器，它与常规武器相比有许多特点：_，_，_。(5)1998年6月27日，中美两国元首在关于禁止生物武器公约议定书的联合声明中，重申在任何情况下_、_、_生物武器。17(10分)江苏某县地处水乡，畜禽养殖和栽桑养蚕是当地农业的两大支柱产业。在生产总量不断扩张的同时，该县坚持在发展中解决环境问题，优化生态环境，实现了资源的最大化利用。请分析下面该县农业生态系统结构(部分)示意图，回答问题。(1)该农业生态系统的能量流动从_开始，图中属于消费者的生物有_。(2)与传统农业生态系统相比，该农业生态系统更能净化环境，主要原因是_。(3)该农业生态系统为何能提高经济效益？_。(4)从生态系统稳定性看，该农业生态系统比简单的农田生态系统不易发生虫害的原因是_，请说出两种根据生物学原理防治害虫的方法：_。18(13分)美国及日本两个研究团队证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎干细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下面有关胚胎工程的若干问题。(1)在胚胎发育中，根据胚胎形态的变化，可将早期发育的胚胎分为_、_、_三个阶段。(2)胚胎工程中的胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。其生理学基础主要有哪些？(至少答出两点)(3)哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由_中分离出来的一类细胞。美日科学家的研究过程是利用病毒分别将四个基因送入皮肤细胞，促使普通的皮肤细胞产生变化，最后成为带有_性质的细胞，称为诱导式多能性干细胞。在基因工程中，这四个基因称为_，所利用的病毒称为_。(4)通过体细胞核移植技术，从患者身上取出体细胞，将其细胞核植入去核的卵母细胞，从而获得早期人类胚胎，然后再从中培育“患者自身的”胚胎干细胞供医学临床使用的技术叫做_。这一技术也可以用来研究“克隆人”，中国政府对生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是：_、不接受任何生殖性克隆人的实验。19(12分)池塘养殖普遍存在由于饵料、鱼类排泄物、换水不及时等引起的水体污染现象，研究者设计了一种循环水池塘养殖系统(如下图)。请回答下列问题：(1)与自然池塘相比，人工养殖池塘生态系统恢复力稳定性_。人工养殖池塘水体的 N、P 含量容易升高，会引起水体的富营养化；藻类等浮游生物大量繁殖、加之死亡后被微生物分解，引起水体的溶氧量下降，造成鱼类等死亡，进一步破坏了生态系统稳态，这种调节方式称为_。(2)与传统养殖池塘相比，该养殖系统增加的生态工程设施有_。可以通过在这些设施内栽植水生植物、放养滤食动物等措施，起到对水体的_，有效减少水体中的 N、P 等含量。(3)该养殖系统设计为前一池塘上层水流入后一池塘底部，实现水层交换，其目的有_、_。(4)该养殖系统中串联的池塘不宜过多，因为_。(5)保持池塘水体中适当的 N、P 含量是必要的，该养殖系统可以通过_、_进行调控。20(10分)下图是某地农村生态工程示意图。(1)该生态工程(图A)的建设遵循了哪些基本原理？_、_。生态工程与传统工程相比较，具有_等特点。(2)当地人希望进一步提高该系统的经济效益和生态效益。专家经过考察后，建议他们增加一个奶牛养殖项目。村民接受了专家的建议，并对原有的生产项目作了一些调整。他们需要调整的项目主要是_。(3)该村从本省某良种场购买了一批良种奶牛，这批奶牛是良种场利用从国外引进的良种奶牛繁育而成的。上图B是奶牛繁育的技术流程图。图中是指对母牛进行_处理，目的是_。是_，是_，是_。生物技术的安全性和伦理性、生态工程答案 15 A C B D B 610 C C C B B 1115 D C C D C 16答案：(1)相对安全的(2)转基因生物的潜在危险：如生物入侵、破坏原来的生态平衡、过敏反应、抗生素抗性、疾病流行等(3)限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体(4)传染性强污染面广难以防治(5)不发展不生产不储存 17答案：(1)桑等生产者固定太阳能蚕、禽、畜(2)粪便等“废弃物”被及时利用(3)实现了物质和能量的多级利用，提高了农产品的产量；减少了化肥、农药的使用(降低农业投入)(4)抵抗力稳定性较高(营养结构较复杂，自动调节能力较强)天敌防治、激素防治、种植转基因抗虫作物18答案：(1)桑椹胚囊胚原肠胚(2)胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致；哺乳动物的早期胚胎形成后处于游离状态；受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性不受任何影响(至少答出两点)。(3)早期胚胎或原始性腺胚胎干细胞目的基因载体(4)“治疗性克隆”不赞成、不允许、不支持19答案：(1)高正反馈(2)生态塘和潜流湿地净化作用(3)增加水中的溶氧量提高饵料的利用率(4)后面池塘水体中的N和P含量(浓度)越来越高(5)补水和排水水泵控制水的流量(循环频次)20答案：(1)物质循环再生原理、整体性原理、协调与平衡原理、系统的结构决定功能原理(任答两项)少消耗、多效益、可持续(2)种植的农作物种类和数量(或原养殖家畜的数量，或其他合理项目，只要求答出一项)(3)同期发情使供体和受体母牛的生理状况相同超数排卵收集胚胎胚胎移植 胚胎工程一、选择题(每小题3分，共45分)1下列过程，哪些发生在精子入卵后()精子继续完成减数第二次分裂，形成雄原核精子发生顶体反应发生卵黄膜封闭作用卵子完成减数第二次分裂，形成雌原核AB C D2下列关于滋养层细胞的叙述不正确的是()A囊胚滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜B可以用滋养层细胞做DNA分析性别鉴定C囊胚滋养层细胞就是将来原肠胚的外胚层D滋养层细胞沿透明带内壁扩展和排列3对羊进行体外受精时常用的采卵方法是()A用促性腺激素处理后，从输卵管中冲取卵子B化学诱导法C电刺激法D从活体动物卵巢吸取卵母细胞4华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有()转基因核移植体外受精体细胞克隆胚胎移植ABC D5老年痴呆症患者的脑血管中有一种老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是A胚胎移植技术B胚胎干细胞技术C单克隆抗体技术 D基因治疗技术6高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，下列有关叙述错误的是 ()A题图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，依次称之为透明带、滋养层、内细胞团B高等哺乳动物胚胎发育经历的时期是受精卵卵裂期桑椹胚囊胚期原肠胚期幼体，其中，最关键的时期是原肠胚期C高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束D进行胚胎分割时，应选择原肠胚期的胚胎进行7将动物的精子和卵细胞在体外人工授精，在试管中完成早期的胚胎发育后移植至代孕动物子宫完成后期胚胎发育并最终分娩，该生物工程技术称胚胎移植，此项技术的实际意义是()A是转基因动物、体细胞杂交动物、克隆动物的培育等生物工程的必要技术B可实现哺乳动物在较短时间内大量繁殖年龄相同的后代C可突破相同物种之间的生殖隔离而最终实现远缘杂交D胚胎移植属有性繁殖范畴，不能保留亲本的优良性状8胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，可以分裂、分化形成各种组织干细胞，再进一步分化形成各种不同的组织细胞。下列叙述不正确的是()A胚胎干细胞有细胞周期，人体成熟红细胞没有细胞周期B造血干细胞分化形成白细胞的过程不可逆C如果通过转基因技术，成功改造某血友病患者造血干细胞，使其凝血功能恢复正常，她与正常男性婚后所生子女的表现型一定都正常D通过对胚胎干细胞诱导分化，定向培育组织细胞，用于修复坏死或退化部位并恢复其正常功能，在临床上有广阔的应用前景9科学家认为，胚胎干细胞有助于了解甚至治愈一些严重疾病，其潜力尽管还不完全为人所知，但绝不应低估。通过移植胚胎干细胞期望可以治疗下列哪一组疾病()糖尿病高血压唐氏综合征老年痴呆症白化病肝衰竭ABC D10有关海星原肠胚的叙述中，不正确的是()A原肠胚已分化成三个胚层B原肠胚形成过程中DNA总量增加C原肠胚的发育是基因选择性表达的结果D原肠胚形成过程中所含的有机物总量增加11下列关于胚胎工程的叙述，错误的是()A体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精B受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植C早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清D试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术12科学家运用胚胎移植技术培育试管牛时，首先用激素促进良种母牛超数排卵，然后进行体外受精和培育，最后把胚胎送入母牛子宫内，孕育成小牛产出。下列分析错误的是()A供体与受体在胚胎移植前后的生理环境须保持一致 B在胚胎移植前可采用胚胎分割技术快速繁殖良种牛 C运用胚胎移植技术培育的试管牛属于动物克隆范畴 D须配制一系列不同成分的培养液以培养不同发育时期的胚胎 13现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例说法正确的是()A用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性B用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病C如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术D如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该要长期给他使用免疫抑制药物14在人早期胚胎的卵裂过程中DNA含量和蛋白质种类的变化最可能是()15下图为某哺乳动物生殖过程示意图(b为卵细胞)。下列相关叙述中不正确的是()A动物个体的产生分别属于有性生殖和无性生殖B动物个体的产生表明，高度分化的动物细胞核也具有发育成完整个体的潜在能力C按照动物个体的产生方式，后代的性别比例仍为11，但这对于动物的进化则是不利的D图中a、b、c三种细胞的产生方式，仅c为有丝分裂二、非选择题(共55分)16(10分)下图为牛胚胎性别鉴定和分割示意图，请据图完成下列问题：(1)填出图中字母所代表的结构名称：A_；B_；C_；D_；(2)写出甲、乙、丙过程的技术名称：甲_；乙_；丙_；进行乙过程时，所取的样本是_。(3)进行甲过程时，所使用的基本仪器是_，本过程的技术关键是_。(4)尽管胚胎分割技术在多种动物中取得成功，但仍然存在一些问题，如_等，同时很难取得同卵多胎，成功率较高的是_。17(11分)胚胎干细胞的研究是目前生物学和医学界的一大热点，根据下列材料信息分别回答相关问题。材料一哺乳动物的胚胎干细胞(embryonic stemcell)简称ES或EK细胞，ES细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重大成就之一，在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的应用价值。材料二在动物实验方面，用ES细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症。也许在不久的将来，当我们的身体某一类细胞功能出现异常或退化时，就可以通过诱导ES细胞定向分化来及时修补。材料三ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段。同时胚胎干细胞还可用于对哺乳动物个体生长和发育规律的研究。(1)胚胎干细胞是由_中分离出来的一类细胞。(2)ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为_；在功能上，具有发育的_性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。(3)随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，还可以培养出人造组织器官，解决目前临床上存在的_的问题。(4)由于ES细胞可以分化为胚胎的内胚层、_中任何一类细胞，于是可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的_，通过组织化学染色，了解ES细胞的分化特点，这就为研究胚胎发育过程中的细胞分化及组织和器官形成的规律，进而研究动物体器官形成的_等提供了可能。18(12分)胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。(1)从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_；从良种公牛采集的精子需_后才能进行受精作用。(2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持_。(3)图中过程A称为_，它在胚胎工程中的意义在于_。(4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_；获得转基因母牛后，如果_即说明目的基因已经表达。19(10分)不同动物受精卵的发育及其进入子宫的时间有明显的差异。请分析下表回答问题：动物种类受精卵发育/h进入子宫时发育天数和发育阶段2细胞4细胞8细胞16细胞桑椹胚天发育阶段小鼠243838505060607068803桑椹胚绵羊363842486772962416细胞猪2151516666729011011011422.546细胞马243036506072981066囊胚牛2742446546909612012014445816细胞(1)哺乳动物胚胎进入子宫前的发育场所是_。(2)表中_的胚胎在进入子宫时发育程度最高。(3)1951年，张明觉等发现：在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，精子才能与卵子受精。此生理现象被称为_。(4)为使牛乳汁中含有人生长激素，需获取仅在_细胞中特异性表达的启动子，与人生长激素基因等构建_，并常用_方法导入受精卵。为了提高移植后胚胎的发育率和妊娠率，在实践中通常用发育到_阶段的胚胎进行移植。另外，可以采用_技术，培育出多头完全相同的转基因牛犊。(5)制备单克隆抗体时，杂交瘤细胞培养放在小鼠体内进行的优点是_。20(12分)人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图所示。 (1)卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠_中获取。(2)图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_，二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。(3)子代大鼠如果_和_，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。(4)在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。胚胎工程答案15 A C A D A 610 D B C C D 1115 B C CA C16答案：(1)囊胚腔透明带滋养层内细胞团(2)胚胎分割做DNA分析性别鉴定胚胎移植滋养层(3)显微操作仪和实体显微镜将内细胞团均等分割(4)刚出生的动物体重偏轻，毛色和斑纹上还存在差异同卵双胎17答案：(1)早期胚胎或原始性腺(2)体积小、细胞核大、核仁明显全能(3)供体器官不足和器官移植后免疫排斥(4)中胚层、外胚层囊胚腔时间、发育过程、影响的因素18答案：(1)使卵母细胞成熟(或：使卵母细胞获得受精能力)获能(2)CO2培养液(基)的pH(3)胚胎移植提高优良母畜的繁殖率(4)显微注射法牛奶中含有人类白细胞介素(或牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素)19答案：(1)输卵管(2)马(3)精子获能(4)(牛的)乳腺基因表达载体显微注射法桑椹胚或囊胚胚胎分割移植(胚胎分割和胚胎移植)(5)无须配制培养液，对环境要求低20答案：(1)卵巢(2)目的基因载体同种限制性核酸内切酶(或：同种限制酶)限制酶切割位点(3)检测到体内有相关蛋白出现高血压(4)体外受精 细胞工程一、选择题(每小题3分，共45分)1细胞工程技术是一门综合科学技术，下列哪项技术不属于细胞工程()A有性杂交B体细胞杂交C组织培养 D细胞核移植 2下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是()A用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程B从机体取得细胞后立即进行培养的过程C出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程D哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程3下列关于全能性的叙述中，正确的是()A酵母菌出芽生殖是全能性的体现B花药离体培养结果没体现全能性C植物细胞均具有全能性D多细胞动物细胞核具有全能性4下列关于植物组织培养的叙述，错误的是()A外植体可以来自于植物的任何细胞B培养应在无菌条件下进行C以花粉作为外植体可得到单倍体植株D不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同5对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是()A在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸C为了防止动物细胞培养过程中的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分6将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养液中，在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后，应出现的现象是()7下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是()不同种植物叶肉细胞融合时，应先去掉细胞膜叶肉细胞脱分化后，可形成无定形薄壁细胞叶肉细胞经过再分化过程，可形成愈伤组织叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性A BC D8下列关于体细胞克隆的叙述，错误的是()A供体为体细胞的细胞核B受体为去核卵细胞C细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤D克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致9基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞()AAAaa BAaBbCAabb DBBbb10下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是()A生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞B动物细胞培养的基础是细胞具有全能性C细胞融合是利用了细胞膜的结构特点D制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞11植物组织培养的过程可以归纳为：。此叙述有错误的是A的再分化过程中，当细胞分裂素与生长素的浓度比低时，有利于根的生长B植物组织培养所依据的原理是细胞的全能性C过程指植物的营养生长和生殖生长阶段D包裹上人造种皮可获得人工种子12关于现代生物技术应用的叙述，错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育13在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是()A对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种B将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体C利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株14关于哺乳动物细胞体外培养的难易程度，下列表述正确的是()A乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞B乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞C乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞D乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞15人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分胚状体可以由悬浮培养的芽尖细胞得到，也可以通过试管培养的花粉或胚囊获得，由此人们把胚状体分为“体细胞胚”和“花粉胚”。请据此判断下列说法中不正确的是()A人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难、发芽率低等问题B培育胚状体利用了植物组织培养技术C同一种植物“体细胞胚”和“花粉胚”的染色体组的数目比为11D该项技术的成功应用反映了细胞的全能性二、非选择题(共55分)16(13分)现有甲、乙两个烟草品种(2n48)，其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800 lx时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，在大于800 lx光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为_和_。(2)将叶肉细胞制成原生质体时，使用_破除细胞壁。(3)在细胞融合技术中，常用的促融剂是_。(4)在大于800 lx光照下培养，有_种细胞团不能分化；能分化的细胞团是由_的原生质体融合来的(这里只考虑2个原生质体的相互融合)。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是_，基因型是_。该植株自交后代中，在大于800 lx光照下，出现不能生长的概率是_。17(10分)动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞_。(2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是_。(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的_，以保证抗生素对肝脏无害。(4)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。实验过程：在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。甲乙丙丁步骤一：加入肝脏培养液步骤二：加入有机物X溶液步骤三：放置肝脏小块上表中还需进行的操作是_。培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明_。18(10分)请回答：(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_，繁殖种苗的速度_。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部