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玉米种子纯度鉴定玉米种子室内纯度测定技术应用 电泳技术是国际公认的作为种子室内种子纯度鉴定有效方法，电泳在品种鉴定中的成功开发应用是基于蛋白质可作为对编码的结构基因的标记。种子贮藏蛋白组分是由遗传基因控制的，不同品种的蛋白质电泳图谱必然存在差异，因此，可有效区分不同品种的玉米作物。我们将醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶玉米电泳技术和玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法进行比较，得出适合玉米室内鉴定方法。 1 醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和盐溶蛋白电泳技术的对比性研究 1.1 两种玉米电泳技术对玉米亲本及杂交种的鉴定试验 首先抽取具有代表性的玉米种子样品采用醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶玉米电泳技术和玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定两种方法进行室内的纯度鉴定，检测样品中自交系和异品种的数量，从基因水平鉴定玉米种子样品的纯度状况，同时验证小区种植鉴定结果。 1.2 两种玉米电泳技术图谱分析 通过对样品的鉴定我们对醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和盐溶蛋白电泳技术进行了比较，两种方法鉴定结果基本一致，从图谱的外观上看，盐溶蛋白电泳技术谱带平整清晰，底色清亮，谱带与底色反差大，易鉴定，因为是不连续电泳谱带非常平整，胶板谱带美观，制作干板的成功率高。但操作相对繁琐复杂；醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(AU-PAGE)是连续电泳，只需配一种凝胶溶液，仍然具有浓缩效应(与配方有关)，操作方法简单易于掌握，电泳分离效果好，谱带信息量大。胶板弹性较好，对变质的种子也有较好的分离效果，此方法需检验人员有较丰富的实践经验，经验不足，蛋白提取量掌握不均，加样量不匀，可造成谱带不平，鉴定困难。 2 玉米室内纯度鉴定技术实际情况 种子生化试验技术起点较低，检测人员技术水平与内地相比有一定差距，多数生产企业不具备生化试验条件，实验室仪器配备相对滞后。多年来，醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术用于企业生产玉米种子纯度自检，具有较丰富的实践经验和熟练操作技巧，对仪器设备的要求不高，国产大一厂稳压稳流电泳仪、垂直板电泳槽、离心机、手动粉碎器等就可进行实验操作，实验所需药品试剂在都能购买到，因此这项技术在具有一定的应用基础，分离效果较好，简单可操作性强，便于在推广。 3 室内电泳技术的对策和建议 醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术可作为基层制种企业内部自检的方法标准。盐溶蛋白电泳技术相对于醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术方法操作复杂，配备溶液时需配浓缩胶、分离胶及两种凝胶溶液的缓冲液，配备溶液时需随时调整PH，使用酸度计，因为是不连续电泳，操作时相对复杂需灌两种胶，先灌分离胶再灌浓缩胶，浓缩胶溶液易发生光聚合和氧化作用，只能使用12天，需随时配备，因此操作过程相对繁琐，但做为部颁标准，可做为省级种子质检站及地州级种子质检部门的玉米室内纯度鉴定方法，承担仲裁检验或监督检验及面向省外、国外品种
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