01-2012级硕士高级免疫学实验技术-概述.ppt

高级免疫学实验技术2012年级硕士，免疫学，可选教材，免疫学实验课要求，不允许迟到或早退，缺席。不允许随便换教室。穿白大衣。爱护实验设备(使用后用水冲洗并放在指定地点)，受害者按价格赔偿。下课后认真打扫教室(擦地板和桌子)。关闭手机或将其设置为振动状态。实验分组，实验操作内容安排，淋巴细胞转化试验ELISA(酶联免疫印迹检测)免疫印迹检测(Westernblot)巨噬细胞吞噬作用测定，磁说教准备，自我评价标准，评价综合考试(40分)，共4个大问题，每个问题10分。出席(10分钟)，每4小时1分钟。实验设计(30分钟)，应用免疫学相关实验方法，设计与自己专业相关的课题。在12.29之前提交的话，这个星期五就可以提交。你对这次免疫学实验教学有什么看法？包括准备：内容、备课、讲课情况等优缺点、意见和建议。最后一节课是写的。)，实验设计，应用免疫学相关实验方法，设计以及自己的专业主题。(包括：1)题目2)研究内容3)研究方案4)创新点、实验设计原则、研究主题：确定研究主题是研究工作的重中之重。研究摘要：研究背景、要进行的主要研究(用什么方法进行研究)、研究的意义(对本研究的预期成果以及促进科学进步的作用)。研究内容：描述主要工作。研究计划：用什么手段解决研究内容中提到的相关工作？研究的特点和创新：主要科学贡献。标题：XX细胞因子在诱导肺癌细胞凋亡中的作用及其机制：肺癌是最常见的肿瘤之一。XX与各种肿瘤的发生有关，但其在肺癌中的作用还没有报道。本研究利用人肺癌细胞的流式细胞术分析XX诱导人肺癌细胞凋亡的效果，分析Caspase3，8，12等，确定XX诱导肿瘤细胞凋亡的机制。本研究不仅进一步阐明了XX的抗癌作用机制，还为寻找新的肺癌治疗方法提供了研究基础。实验设计的基本思路，研究内容：1)XX通过在人类肺癌肿瘤细胞中的表达分析，确定XX表达与肺部肿瘤的关系。(2)测量患者血清XX水平，确定肺癌辅助诊断的价值研究方案：1)使用肿瘤组织切片，通过免疫细胞化学染色观察人肺癌组织中XX的表达。2)用ELISA法检测血清XX水平。研究的特点和创新：本研究说明XX与肺癌的关系，并提出XX作为肺癌的血清诊断标志物，说明XX诱导肺癌细胞凋亡及其作用机制。实验设计的基本思路，免疫学实验技术概述，小的调查-对免疫学实验技术的理解，现在你知道的免疫学实验技术是什么？这种免疫学实验技术的原理是什么？这些技术的应用程序是什么？免疫学实验技术概述，免疫学技术的类别，1，具有免疫活性物质的定性，定量分析2，免疫系统成分的数量，状态的确定，免疫学检查技术评价，第一，评价标准Specificity(特定)Sensitivity(敏感)，抗体应用，多克隆抗体通过免疫动物血清分离获得优势。准备方法比较简单，价格便宜，准备时间短等，仍然是决定新基因编码蛋白质研究的首选抗体类型。但是，多克隆抗体包含多种抗原表位的抗体成分，并可能包含抗原变性后暴露的新表位，因此，多克隆抗体在检测wester blot t检测蛋白等变性抗原时，其效果比单克隆抗体更敏感。多克隆抗体，缺点：在交叉反应的有限来源产生的抗体因动物个体而异，很难标准化，因为免疫动物血清中含有多种非常复杂的蛋白质成分，所以在进行实验室分析、检查之前，必须分离、纯化有效的抗体成分。多克隆抗体，单克隆抗体(mAb)比通过b细胞杂交获得的单克隆抗体主要有三个重要特征(优点)。高同质性高特异性来源稳定性不足：制备方法更复杂、更贵，准备时间更长。单克隆抗体，mAb在从b淋巴细胞开始的单克隆细胞株中分泌，因此每个抗体分子的结构(包括氨基酸排列顺序和空间构成)都是相同的同质抗体。高同质性，mAb一致地单独识别识别识别抗原分子上的单个抗原部位，因此容易获得特定抗体，引起交叉反应较少。高特异性，大批量生产，稳定分泌mAb，能获得杂交瘤细胞株时，长期保存液氮，必要时去除复苏术，在体外培养中收获mAb，在异种小鼠腹腔接种异种杂交瘤细胞后，可以从拥有肿瘤的小鼠腹水中收获很多mAb。源稳定性，实验目的不同，分离，精制纯度要求不同。是ELISA检测抗体，在某些情况下纯化饱和硫酸胺即可；最常用的抗体是通过a蛋白(ProteinA)亲和层析获得的IgG型抗体。免疫放射测定法的标记抗体必须达到两阶段纯(亲和层析纯SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳纯)。纯度要求，单克隆抗体在准备过程中经过严格审查，因此应根据每个应用目的选择不同的单克隆抗体子类(如ELISA检测的单克隆抗体标记)，可能不适用于WesternBlot检测。新手特别要注意多种单克隆抗体显示的复盖范围，多克隆抗体一般复盖范围很广。适用范围