实验四 人类染色体的识别及核型分析.ppt

人类染色体的识别及核型分析,遗传学实验,1,一、实验目的,2,学习染色体核型的分析方法了解人类染色体的特征,二、实验原理,3,1染色体组型（核型）是指生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称。包括：染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位置，随体或次缢痕等。染色体组型是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。组型分析能进行染色体分组外，还能对染色体的各种特征做出定量和定性的描述，是研究染色体的基本手段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染色体数目变异，同时也是研究物种的起源、遗传与进化，细胞遗传学，现代分类学的重要手段。,二、实验原理人类染色体,4,2人类的单倍体染色体组（n=23）上约有30000-40000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。各染色体上的基因都有严格的排列顺序，各基因间的毗邻关系也是较为恒定的。人类的24种染色体形成了24个基因连锁群，所以，染色体上发生任何数目异常、甚至是微小的结构变异，都必将导致许多获某些基因的增加或减少，从而产生临床效应。染色体异常常表现为具有多种畸形的综合征，称为染色体综合征，其症状表现为多发畸形、智力低下和生长发育异常，此外还可看到一些特征性皮肤纹理改变。染色体畸变还将导致胎儿死产或流产。染色体病已成为临床上较常见的危害较为严重的病种之一，染色体病的检查、诊断已经成为临床实验室检查的重要内容。,二、实验原理人类染色体,5,1960年，在美国Denver市召开了第一届国际遗传学会议，讨论并确定正常人核型（karyotype）的基本特点即Denver体制，并成为识别人类各种染色体病的基础。按照Denver体制，将待测细胞的染色体进行分析和确定是否正常，以及异常特点即为核型分析。表1为人类染色体的主要特征。,表1人类染色体的主要特征,6,三、实验材料,7,人类染色体非显带标本或人类染色体显带标本。直尺，剪刀等。,四、实验方法,8,染色体制片选择最佳图象拍照测量、计算配对剪贴排列画出模式图（相对比例）原则同上,1、关于染色体标本的制作,9,特定的细胞遗传学方法植物染色体压片法（酸解、酶解）动物染色体滴片法（骨髓细胞、外周血细胞）染色体的特点非显带染色体显带染色体,2、关于分析的主要指标,10,着丝粒指数（%）短臂占整条染色体的百分比p/（p+q）100%臂比长臂与短臂的比值（q/p）反映着丝粒位置的指标，SAT(随体)。1.01.7(M);1.73.0(SM);3.07.0(St);7.0(Ot);相对长度（%）某条染色体的相对长度为该染色体长度占染色体总长度的百分比人类某条染色体的相对长度（%）=该条染色体长度/22条染色体长度+X染色体长,3、关于剪贴、原则排列,11,排列原则：从大到小；短臂向上；着丝粒在一条线上；性染色体单排。,五、实验要求,12,1、对给出的图象进行测量、配对填表2。2、按照Denver体制规定，分组贴图。表2人类染色体分析数据,13,14,15,16,17,人类染色体非显带标本,18,人类染色体非显带标本的组型分析与排列,小鼠染色体非显带标本,2008-3,遗传学实验,19,柴汉魁05生计,19,遗传学实验,2008-3,小鼠染色体,2008-3,遗传学实验,20,05生科,20,遗传学实验,2008-3,染色体显带标本的分析,人们用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（bandingtechnique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带）.G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。,21,G显带,人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清.,22,23,24,25,26,遗传学中一些常用于对染色体和核型分析的指标描述,27,遗传学实验,2008-3,指标,界标(landmark)：稳定、明显标记的指标.包括末端、着丝粒和带。区（region）：两相邻界标之间。带（band）：着色处。（浅、深；亮、暗）臂（arm）：p、q,28,遗传学实验,2008-3,特殊说明,区、带命名都从着丝粒开始，沿每一条染色体臂相外顺序编号。记述某一特定带时，需要写明4个内容：染色体号长短臂区的序号带的序号,IA9q341p31.1,29,遗传学实验,2008-3,特殊说明,