肿瘤的细胞生物学.ppt

OUTLINE肿瘤概述引起细胞恶性转化的因素细胞的恶性转化肿瘤细胞形态、结构的异常肿瘤细胞的生物学特性肿瘤的起源和演进肿瘤的侵袭与转移,肿瘤的概述,人类对肿瘤的研究经历了一个漫长的过程人类发现肿瘤已有3000年以上历史。不仅人类患肿瘤，动、植物也有肿瘤。直到19世纪应用显微镜后，才建立了目前肿瘤学的框架。20世纪以来，由于自然科学的发展、基础理论研究与新技术的应用，肿瘤学研究有了长足的进步。尽管恶性肿瘤已成为人类致死的第1位原因，但肿瘤学的进展已使肿瘤患者的13有根治希望。,CancerDeathRates,forWomen,*Age-adjustedtothe2000USstandardpopulation.Source:USMortalityPublicUseDataTapes1960-2000,USMortalityVolumes1930-1959,NationalCenterforHealthStatistics,CentersforDiseaseControlandPrevention,2003.,RatePer100,000,MaleCancerDeathRates,Benigntumorsarisewithgreatfrequencybutposelittleriskbecausetheyarelocalizedandsmall,良性肿瘤局限在包膜中生长与正常组织有清楚的分界线,Malignanttumorsgenerallyinvadesurroundingtissueandspreadthroughoutthebody,Alterationsincell-cellinteractionsandtheformationofnewbloodvesselsareassociatedwithmalignancy恶性肿瘤呈侵袭性生长与正常组织无分界线,肿瘤是一种细胞病。肿瘤发生的本质是细胞的遗传物质基因组DNA，所携带的遗传信息发生病理改变而造成的细胞病。亦即由于多个基因的结构或功能改变的积累而导致细胞的增殖失控和分化异常，以致突变细胞获得两种基本特性：1.不衰老、不凋亡、不断增殖，即不该增长仍不停的增长，该死而不死；2.侵袭到不该到的部位。这两个特性相结合造成肿瘤细胞的转移、播散。肿瘤细胞可将上述特性遗传给其子代细胞,即在细胞水平进行遗传。但不在个体水平遗传。,肿瘤是什么样的疾病,肿瘤与一般的遗传病不同：它并不在一个家族中代代相传肿瘤遗传病_遗传学改变体细胞体细胞及生殖细胞家族遗传性无有遗传学素质有*环境影响对肿瘤发生具有关键性作用不由环境决定_*存在先天性肿瘤相关的遗传学改变，为肿瘤的发生奠定了一定的基础，使后代具有易于发生肿瘤的倾向，有些肿瘤具有家族聚集现象。,肿瘤细胞分子生物学的早期实验研究（20世纪60年代中晚期）-DNA转染实验小鼠的正常成纤维细胞系(3T3细胞)，被人类肿瘤细胞的DNA转染后，发生恶性转化，接种于小鼠而成瘤。此实验证明了遗传物质的致瘤性。,肿瘤细胞的特点1.具有分裂潜能的细胞受致癌因素作用发生恶性转化和克隆性增生所形成，在致癌因素消失之后，已形成的肿瘤仍继续生长不自行消失;2.不受机体对细胞增生和分化的调节机制所制约而呈相对自主性和持续性生长;3.肿瘤细胞失去正常的分化能力呈不同程度的异型性，不组成正常的组织结构;4.肿瘤细胞的生长、代谢、和机体的生长、代谢不相协调;5.恶性肿瘤的侵袭性生长对原有组织和器官造成破坏;6.恶性肿瘤的转移往往是肿瘤致死原因.,肿瘤学的主要研究方法1.光镜观察2.组织化学、细胞化学、免疫组织化学3.超微结构观察4.分子生物学技术PCR、核酸分子杂交、DNA测序、杂合性缺失、染色体组型检测等,引起细胞恶性转化的因素,引起细胞癌变的因素,恶性肿瘤的病因尚未完全了解。多年来通过流行病学的调查研究及实验与临床观察，发现环境与行为对人类恶性肿瘤的发生有重要影响。据估计约80以上的恶性肿瘤与环境因素有关。致癌过程是机体内在因素及外界因素联合作用，体细胞中基因改变并积累的多阶段过程的结果。,Environmentalvs.HereditaryCancer,Cellsinmulticellularorganismsarecontinuallyreceivingsignalsfromeachotherandtheirenvironment,Thisleadstoproliferation,differentiationorevencelldeath(apoptosis)asappropriatetotheneedsoftheorganismasawholeIncancer,thisnormalbalancegoesawryCancerGenes,（一）外界因素1、化学因素有些化学致癌物可直接致癌；有些则在体内发生转变后才具有致癌作用。它们都可引起DNA序列的局部改变，如点突变。（1）烷化剂：如有机农药、硫芥、乙酯杂螨醇等，可致肺癌及造血器官肿瘤等。（2）多环芳香烃类化合物：如煤焦油中的3，4-苯并芘。与煤烟垢、煤焦油、沥青等石油物质经常接触的工人易患皮肤癌与肺癌。（3）氨基偶氮类：为染料类，易诱发膀胱癌、肝癌。其致癌性是由于其体内代谢产物。（4）亚硝胺类：与食管癌、胃癌和肝癌的发生有关。（5）真菌毒素和植物毒素：如黄曲霉易污染粮食可致肝癌，也可致肾、胃与结肠的腺癌。苏铁素、黄樟素及蕨类毒素也可致肝癌。（6）其他：金属（镍、铬、砷）可致肺癌等。氯乙烯能诱发人肝血管肉瘤。二氯二苯基、三氮乙烷（DDT）、苯均可致肝癌。,2、物理因素通常引起染色体的断裂或部分染色体的易位及基因突变。（1）电离辐射：由于X线防护不当所致的皮肤癌、白血病等。此外，吸入放射污染污染粉尘可致骨肉瘤和甲状腺肿瘤等。（2）紫外线：可引起皮肤癌，尤对易感性个体（着色性干皮病）作用明显。（3）其他：烧伤深瘢痕长期存在易癌变，皮肤慢性溃疡可能致皮肤鳞癌。石棉纤维与肺癌有关。滑石粉与胃癌有关。这些可能与局部物理刺激有关。,3、生物因素一些肿瘤与病毒、细菌及寄生物的感染相关。已知的致癌病毒有：DNA病毒：HBV（肝癌）HPV（宫颈癌、阴茎癌、食管癌）EBV（鼻烟癌亚洲、Burkitts淋巴瘤非洲）HIV（Kaposissarcoma）RNA（逆转录）病毒：HCV（肝癌），HIV+EBV(卡玻氏肉瘤)此外寄生虫与肿瘤有关幽门螺杆菌与人胃MALT淋巴瘤和胃腺癌的发生有关如埃及血吸虫可致膀胱癌、华枝睾吸虫与肝癌有关，日本血吸虫病对大肠癌有促癌作用。,RNA肿瘤病毒是通过激活细胞的原癌基因来起作用的。RNA病毒原癌基因结构异常癌变,1.病毒复制，细胞死亡。2.致癌病毒的慢性感染与其他致癌因素联合作用导致癌变。机制：（1）病毒DNA整合到宿主细胞的基因组引起插入性突变，活化原癌基因，引起细胞转化、癌变。(2)DNA病毒在宿主细胞内的表达产物，与抑癌基因产物通过蛋白质蛋白质分子间的相互作用相结合而使抑癌基因失活。不同致癌病毒的作用机制不同。,病毒感染细胞的两种后果,（二）内在因素1、遗传因素遗传素质(Geneticpredisposition),例如，染色体杂合性丢失(LOH)，某抑癌基因缺失或失活。与人类癌症的关系虽无直接证据，但癌症有遗传倾向性，即遗传易感性（hereditarysusceptibility），如结肠息肉病综合征、乳腺癌、胃癌等、相当数量的食管癌、肝癌、鼻咽癌者有家族史。故遗传易感性不可忽视，如BRCA-1基因突变者易患乳腺癌；带有APC突变基因者易患肠道息肉病。肿瘤的发生是由于体细胞中基因改变积累的结果。癌症是多基因、多步骤发展的疾病，包括：癌基因(oncogene)的激活、过度表达；抑癌基因的突变、丢失；微卫星不稳定，出现核苷酸异常的串联重复（16个碱基重复序列）分布于基因组；错配修复基因(mismatchrepairgene)突变，该组修复DNA损伤的基因，一旦发生突变，导致细胞遗传不稳定或致肿瘤易感性。目前，已知的癌基因较多，抑癌基因也有十余个，错配修复基因有关的已达6个（hMSH2、hMLHl、hPMSD、hPMS2、MST3、MST6）。,2、内分泌因素与肿瘤发生有关的激素，较明确的为雌激素和催乳素与乳癌有关，子宫内膜癌与雌激素也有关。3、免疫因素先天或后天免疫缺陷者易发生恶性肿瘤，如获得性自身免疫性疾病（AIDS，艾滋病）易患恶性肿瘤。丙种球蛋白缺乏症病人易患白血病和淋巴造血系统肿瘤，肾移植长期使用免疫抑制剂的病人，肿瘤发生率较高。,很多致癌因素都可引起DNA损伤。肿瘤发生的几率与暴露于致癌物时间的迟早和长短相关。,各种致癌因素引起肿瘤的大致频率,含致癌物的食品,霉变食品槟榔淹制食品蕨菜在高温反复使用的食油油炸的食品芦荟熏制食品直火烧烤食品高脂肪食品添加剂、防腐剂或色素含量超标的食品,抗癌的食品,粮食肉类副食蔬菜果类饮品薏仁米甲鱼香菇芦笋猕猴桃绿茶红薯（不可与鸡蛋、苋菜同食）黑木耳花椰菜香蕉大豆银耳萝卜橙子大麦圆白菜红枣黑麦花菜西瓜燕麦芹菜桔子玉米茄子苹果甜椒胡萝卜金针菜荠菜西红柿黄瓜白菜香菜大蒜大葱洋葱大白菜山药倭瓜（南瓜）雪里蕻_,细胞的恶性转化,-癌基因与抑癌基因,参与肿瘤发生、发展的基因,*原癌基因(proto-oncogene,c-onc):其所编码的蛋白质为细胞存活、增殖、分化及信号转导等正常生命活动所必需，属于管家基因。*癌基因(oncogene)：原癌基因活化则变为癌基因。*抑癌基因(tumorsuppressorgene)：其所编码的蛋白质对于肿瘤的发生及恶性行为具有抑制作用。,促进细胞增殖生长因子生长因子受体信号转导分子促进细胞周期运转转录因子抑制细胞凋亡,原癌基因表达产物的基本功能,细胞表面的粘附分子:如cadherin阻断细胞周期运行的检验点控制蛋白质:如p53蛋白、CKI家族抑制性细胞增殖信号通路中的受体及细胞内的信号转导分子：转录因子促进细胞凋亡的蛋白质DNA修复酶,抑癌基因表达产物的基本功能,常见的抑癌基因,正常细胞如何变为肿瘤细胞？原癌基因活化抑癌基因失活,*突变(mutation):基因的结构发生了改变*易位(translocation):基因的位置发生了改变，两个基因的一部分发生相互交换，可导致原癌基因的活化。*扩增(amplification)：原癌基因的拷贝数增多，导致基因产物增多而活化。*甲基化和去甲基化:原癌基因去甲基化导致表达增强活化成为癌基因；抑癌基因甲基化致表达减弱而失活。,原癌基因活化和抑癌基因失活的方式,细胞增殖失控：不顾一切的不断增殖分裂细胞分化异常：不具有正常功能，具备异常功能逃避细胞凋亡：不衰老(端粒酶活性高)，该死亡时不死亡。细胞迁移能力增强具有侵袭正常组织的能力具有转移至远处器官的能力具有对化疗药物和放射治疗的抵抗性,原癌基因活化和抑癌基因失活的后果,Cancer:GeneralEtiologyandPathogenesis,RbbindwithE2Ftranscriptionfactor,Eg:抑癌基因的失活与肿瘤发生,RBgene,p53gene,不同肿瘤通常具有不同的遗传学改变,肿瘤发生的分子机制不仅在不同组织的不同性质的肿瘤不同，即使同种组织的同种肿瘤也不尽相同。,癌变过程可大致分为三个阶段：*起始阶段(Initiation):细胞获得不死性(myc等核内作用基因)*促成阶段(promotion)：获得成瘤性(ras等核外作用基因为主)*进展阶段(progression)：获得侵袭转移性(nm23,E-钙粘素等抑癌基因失活),癌变过程一个多步骤的漫长的渐进过程,偶然发生的突变细胞,细胞的恶性变是多步骤的渐进过程,正常上皮（抑癌基因APC丢失）上皮过度增生形成小的息肉（原癌基因k-ras活化）小的良性腺瘤（抑癌基因DCC丢失）大的腺瘤（抑癌基因p53丢失）癌瘤（新的突变或丢失）转移性癌,例如，干细胞的增殖分化异常导致肿瘤。,细胞的恶性转化一般发生在具有增殖能力的细胞,肿瘤细胞在基因组水平不断的演变，决定了肿瘤细胞的形态、结构和行为不断发生变化。因此，同一癌瘤在初发阶段、中期或晚期阶段的表型是有差别的。愈到晚期生长愈快，侵袭性与转移性愈强，即恶性程度愈高。因而对于不同发展阶段的肿瘤应采取有所区别的治疗方案，绝不该千篇一律。,体细胞长期演变的最终结果衰老或癌变但发生肿瘤的只是少数人,体内存在DNA损伤修复机制,人类基因组原本是相当稳定的。这是因为细胞中存在感知和修复DNA损伤的一系列复杂的机制。因而，在正常情况下基因的突变即使发生也可修复，多基因系列突变的积累并非易于实现。因此，避免经常暴露致癌因素的作用下，可以防止癌症的发生。,DNA,体内存在的天然抗癌机制*DNA损伤修复机制：细胞的恶性变源于外界因素引起的DNA损伤，细胞内存在修复DNA损伤的机制。损伤的DNA若能及时修复，则不致引起癌变。*停止DNA受损的细胞进入细胞增殖周期的机制：抑癌基因常可通过监控点(checkpoint)调控停止细胞的增殖，从而防止进一步的突变。*诱导未能修复的损伤细胞走向凋亡的机制：启动细胞凋亡运行机制，使严重损伤的细胞自杀走向凋亡。*免疫监视和免疫杀伤机制：通过免疫监视发现突变的细胞；通过特异性和非特异性免疫杀伤机制来消灭已经癌变的细胞。,体内的抗肿瘤免疫机制,特异性免疫：*体液免疫：通过针对肿瘤细胞表面抗原的抗体识别肿瘤细胞，在补体或免疫细胞的协助下杀伤肿瘤细胞。*细胞免疫：通过特异性识别肿瘤细胞的细胞毒T淋巴细胞（CTL）而杀伤肿瘤细胞。非特异性免疫：由非特异性的免疫细胞杀伤肿瘤细胞。*自然杀伤细胞（NK细胞）*巨噬细胞*粒细胞,肿瘤细胞形态、结构的异常,肿瘤细胞的异形性,恶性肿瘤细胞在形态、功能和代谢等方面与其起源的组织细胞均有不同程度的差异，这种差异称为异型性（atypia）或称恶性表型（malignantphenotype）。瘤细胞形态呈多形性：,核的异型性：瘤细胞核大小、形状、染色不一致，分裂像增多。胞质的改变：由于核糖体增多，而变为嗜碱性或嗜双色性。,Photographsofcellscollectedbyscrapingthesurfaceoftheuterinecervix,巴氏染色检查子宫颈癌前病变,肿瘤细胞核与染色体的异常,一乳腺癌患者的染色体核型,9号与22号异位所致的慢性骨髓白血病,肿瘤细胞可表现为多倍体和异倍体（非整倍体）,NormalandCancerKaryotypes,Chromosomepainting(a)isanormalcell,(b)isa“verymessedup”cancercell,肿瘤细胞骨架的异常,肿瘤细胞的细胞连接松散、间隙连接减少异常,在许多肿瘤（如人肝细胞癌、乳腺癌、胶质细胞瘤等）中发现间隙连接蛋白（Connexin,Cx）基因的转录抑制，CxmRNA低或无表达，并伴有间隙连接细胞间通讯抑制，肿瘤细胞内PKC活性升高。,Infiltration:LossofIntercellularAdhesion,Infiltration:AttachmenttoECM,Infiltration:DegradationofECM,肿瘤细胞表面结构及糖缀合物的异常,N连接糖链：GlcNAc-T表达与活性增高而在细胞表面出现1,6分支的四天线大糖链（酶抑制剂Swoinsonin）O连接糖链：由于糖基化不完全而出现缩短的糖链有些糖蛋白和糖脂的糖链末端出现多聚唾液酸肿瘤细胞表面糖链的岩藻糖化程度增高，如出现SLEX抗原等,肿瘤细胞的生物学特性,遗传上的不稳定性,基因的突变不断发生某些癌基因扩增，出现多拷贝，在晚期癌更明显非突变性修饰：甲基化（阻遏抑癌基因的表达）与去甲基化（癌基因活化）在基因活化、转录及翻译水平调控异常,生长（分裂增殖）失控,1、肿瘤细胞的生长特点：,（4）肿瘤细胞增殖动力学的临床意义：指导临床治疗方案的制定。,TumorigenesisofCervicalCancer,正常细胞与转化细胞的生长比较,血管生成与肿瘤生长,肿瘤细胞释放血管生成因子促进血管长入肿瘤，血管的长入又加速肿瘤的生长。,2、肿瘤在体内生长的特性,肿瘤的体内生长曲线(血管长入后迅速增长),CellNumber,0510152025（Years）,VascularizationPotentiallylethaloftumortumorburdenClinicaldetectionoftumor,TUMOURANGIOGENESIS,SproutingAngiogenesis,GrowthfactorsEg.,basicfibroblastgrowthfactor,bFGF,Placentalgrowthfactor,PlGF,Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF,Upregulationofvb3-integrin,UpregulationofGrowthfactorreceptorsEg.,VEGFR2(KDR,Flk-1),TUMOURANGIOGENESIS,Manyanti-angiogeniccandidatesincludingInhibitorstob3-integrinorFlk-1killbloodvesselsTheseresultssuggestthatavb3isrequiredforangiogenesis,ANTI-ANGIOGENEICTHERAPY,(1)对生长控制反应的丧失（lossofresponsetogrowthcontrols）,表现为自主性生长（autonomy）(2)接触抑制的丧失（lossofcontactinhibition）肿瘤细胞膜上抑素（chalone）含量减低甚至消失，如LETS,3、肿瘤在体外生长的特性,(3)生长的锚着依赖性丧失（lossofanchoragedependenceforgrowth）(4)细胞生长的密度依赖性抑制作用降低（diminisheddensity-dependentinhibitionofcellgrowth）(5)恶性肿瘤细胞的“永生性”（immortalityofmalignanttumorcell）(6)恶性肿瘤细胞的可移植性（transplantability）(7)恶性肿瘤细胞表型的不可逆性（irreversibilityofthemaglinantcellphenotype）,癌细胞的自分泌生长刺激,1、肿瘤细胞物质代谢和酶学的改变：（1）恶性肿瘤细胞物质代谢和酶学改变的一般特征a.合成代谢与分解代谢：蛋白质、脂类、核酸（甚至核苷酸）的生物合成增加；氨基酸、核苷酸的分解代谢显著降低；糖类等能源物质的分解加强而合成则减少。b.增殖相关酶和分化相关酶：前者增加，后者减少c.转化相关酶和演进相关酶：增加,肿瘤细胞的生物化学特性,（2）恶性肿瘤中几种重要的酶学改变：a.糖代谢中酶的改变：糖酵解：活性增强（己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶）糖异生：相关酶作用下降或近乎停止（如丙酮羧化酶、葡萄糖-6-磷酸酶、果糖二磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸激酶）糖原代谢：相关酶活性降低b.氨基酸代谢中酶的改变：蛋白质合成代谢增强，氨基酸分解代谢减弱患者肌肉蛋白质的分解增加c.核苷酸代谢中酶的改变：参与核苷酸合成、还原及最后合成DNA的酶均升高,（3）恶性肿瘤中同工酶谱的改变：胎儿型表达、胎盘型表达、异位型表达,血液中的肿瘤标志物,，胰腺癌，,，卵巢癌,胆管癌,2、肿瘤细胞膜组分及表面特性的改变：（1）肿瘤细胞膜上组分的改变：膜糖蛋白的改变：丢失、糖链的变化、合成新的糖蛋白膜糖脂的改变：某些糖鞘脂合成不全、新糖脂合成、糖脂反应消失、隐匿性糖脂的暴露（2）肿瘤细胞膜表面特性的改变：细胞通透性增高接触抑制的降低或丧失易于与植物凝集素起凝集反应细胞膜粘着力降低肿瘤细胞纤溶酶活性增高,这是肿瘤细胞的一大重要本领。细胞凋亡受阻是肿瘤发生的重要机制，也是肿瘤细胞抵抗化疗和放疗的重要机制。很多抗肿瘤药的作用旨在诱导细胞的凋亡。,肿瘤细胞的凋亡受阻,逃避细胞凋亡,同一个肿瘤结节中的各个肿瘤细胞并不均质，其异质性表现在以下方面：*恶性肿瘤细胞的染色体为异倍体及多倍体。不同肿瘤细胞的核型可不一致*抗原性(autigenicity)及免疫原性(immunogenicity)不同*生化特性不同*生长行为不一致*侵袭转移潜能不同*对药物、辐射、高温、冰冻处理的敏感性不同因而各种保守疗法可以杀灭敏感的肿瘤细胞使肿瘤缩小，但治愈的最终目的是杀灭所有癌细胞，因此需联合化疗及综合治疗。具备切除条件的进行根治性手术切除是公认比较彻底的肿瘤治疗方案。癌细胞的异质性是其遗传性不稳定的结果。由于肿瘤细胞的异质性，欲完全扦灭体内的所有肿瘤细胞采用一种措施常难以奏效，需要多种手段综合实施。,肿瘤细胞具有异质性(Heterogeneity),同一肿瘤中存在转移潜能不同的细胞亚群,Experimentshowingthatthereareclonallyheritabledifferencesbetweenthecellsofasingletumorwithrespecttotheabilitytometastasize.,在化疗中肿瘤细胞可在仅仅使用一种抗癌药的情况下对多种化疗药产生耐药性。其机制比较复杂。ABC(ATPbindingcassette)转运蛋白超家族。P-gp和MRP是目前了解较多的与MDR有关的分子。P-gp为一种170kDa的6次跨膜糖蛋白。两条P-gp肽链形成二聚体，围成12边的通道，在其胞质区形成两个ATP结合位点。,疏水性化疗药可与ATP结合，并改变P-gp的构象而使其ATP酶活化，遂将药物或直接泵出细胞，或先泵至质膜外片，然后通过扩散释放到细胞外。,肿瘤细胞具有多药耐药性(multidrugresistance,MDR),肿瘤干细胞对于放射治疗具有抵抗性,肿瘤干细胞对于放射治疗的抵抗性来自于其对DNA损伤修复的能力特别强，很多DNA损伤修复酶被活化。肿瘤细胞黏附于细胞外基质也可增强其对放射治疗的抵抗性。,肿瘤细胞具有固有的特别强的存活能力,肿瘤的根治必须着眼于消灭所有的肿瘤干细胞，否则尽管削减了肿瘤细胞的总数，可见肿瘤缩小，但是还会再增大.这正是目前很多治疗肿瘤的措施只能使肿瘤缩小或“缓解”而不能根治之症结所在。欲完全消灭体内的所有肿瘤细胞采用一种措施常难以奏效，需要多种手段综合实施；适时的根治性手术切除是清除肿瘤干细胞的有效手段。,治愈肿瘤的关键消除肿瘤干细胞,肿瘤的起源与演进,肿瘤组织起源于转化细胞的增生。转化细胞起源于？解释（1）组织内的细胞重新失去分化变为幼稚细胞并具有分裂能力；（2）转化细胞来自组织内已存在的干细胞。解释：二次突变假说（Moolgavkar和Kundson于1981年提出）认为干细胞受致癌因素诱发发生第一次突变后，又启动了第二次突变，则发生转化。大大加强了自我更新潜力而增生。,肿瘤的起源,Normal,Tumour,Clonalselectionofcancercells,Variantsovertime,关于肿瘤组织发生的学说（1）单克隆起源学说（monoclonaltheory）认为：一个肿瘤的细胞群体是由单个转化细胞不断增生而成，有着共同的理化性质和遗传特征。（2）多克隆起源学说（polyclonaltheory）认为：不同肿瘤克隆之间的相互作用是肿瘤发生、发展的先决条件。多个肿瘤克隆在逐渐发展中最终产生一个优势克隆，不断增生而成一个肿瘤。（3）单克隆起源学说与单克隆起源学说的联系：二者在肿瘤的发展、演进中是协调共存并相互转化的。,指恶性肿瘤在生长过程中变得越来越富有侵袭力的现象。肿瘤演进的每一步皆由基因改变所致，使肿瘤获得了多种相关特性.肿瘤演进过程中的异质化（heterogeneity)：指由一个克隆来源的肿瘤细胞在生长过程形成在侵袭能力、生长速度、对激素的反应、对抗癌药的敏感性等方面有所不同的亚克隆的过程。,肿瘤的演进,肿瘤细胞在演进过程中的生物学特点：（1）细胞增殖调节失控a.控制细胞增殖关键位点的基因出现异常：“油门加大”、“启动容易”、“刹车失灵”b.控制细胞凋亡的基因异常：c.癌基因的过表达：（2）肿瘤细胞粘附力减弱粘附作用有关的基因发生突变、缺失、重排等,如E-cadherin(ECD)和CD44基因的改变,（3）肿瘤基质酶解加强a.基质金属蛋白酶类、纤维蛋白溶解酶原纤维蛋白溶解酶及其激活因子tPA的表达增强，还有某些蛋白酶类的作用增强；b.肿瘤组织中MMPs的抑制剂（TIMP）的表达下降或消失。（4）肿瘤细胞迁移性增强促进细胞移动力的基因表达增强，如Mts-1、Tiam-1、mm23（5）逃避宿主的免疫监视a.MHC分子低表达不表达，不能有效激活机体T细胞；b.肿瘤细胞逃避；c.抗原调变：,（6）错配修复系统功能改变错配修复基因发生突变，如hMLH1、hMLH2、hPMS1、Hmsh2等（7）染色体改变,肿瘤发生的非整倍体学说美国科学院院士Duerberg等提出基因突变不可能导致肿瘤发生，相反，非整倍体，才可能是肿瘤发生的主要原因。,致癌因素细胞非整倍染色体有丝分裂相关基因表达异常异常比例的纺锤体蛋白,甚至异常数目的中心粒染色体不分离一些染色体的随机丢失或获得肿瘤细胞核型的产生,因为,1）100%的实体瘤都是非整倍体；2）只有染色体的异常才可以瞬间改变细胞内成千上万基因的表达水平；3）肿瘤细胞的永生化非整倍体细胞具有通过自身催化随机丢失或获得不同染色体；4）肿瘤的其它特征（例如转移能力、去分化、抗原的变异性、高耐药性等等）也可以应用非整倍体假说来解释。,非整倍体怎样产生的呢？,致突变和非致突变因素可能通过物理或者化学过程改变了一个或多个染色体，或者通过改变参与纺锤体蛋白分子从而导致非整倍体产生,非整倍体假说的事实证据？,1)致癌剂都能使细胞产生非整倍体；2)Weinberg等用三个互不相关的癌基因转化的肿瘤细胞，被Duesberg等推测并证明这些细胞100%是非整倍体核型；3)用致癌剂转化的肿瘤细胞100%是非整倍核型；肿瘤细胞遗传性不稳定的程度与被转化细胞的非整倍程度呈正比关系；非整倍体而不是个别基因变异能够通过改变细胞的代谢和染色体的不对称分裂导致肿瘤表型的出现；被转化的细胞首先发生非整倍核型，其次才演化为肿瘤细胞；被转化的肿瘤细胞在某一阶段具有特定的核型；,4)非整倍体假说推测肿瘤细胞对化疗药物具有很高的“突变率和多药耐药性”是由非整倍体染色体催化染色体重新分组的结果，而不是基因突变的结果；5)Len