实验设计的原理和方法

实验设计的原理和方法，张和明新乡医学院药理系2010.09，“凡事有事前，无计划”介绍，实验设计的目的1。目的，计划，分步实验。2.最小化实验误差。3.节约时间、样品、经费支出，减少人力和物力，获得高效率。第一，实验设计的目的和任务，实验设计的任务：3要素的合理安排1。测试因素(处理因素、应用因素、干扰因素)要掌握实验的主要问题。处理因素和非处理因素决定因素。处理因素要指出多因素的相互作用。2。测试对象患者，动物，组织，器官，细胞等。3.实验效果选择指标，指标选择要注意：指标的相关性指标的客观性指标的敏感性指标的精确性，第二，实验设计原则，对照组原则随机原则重复原则，第一。对照组原则(控制)例如：一位医生为了研究某中药治疗剂的利尿作用，随机抽取10名健康人进行了研究，10名健康人在2小时内比服药前平均增加了100毫升/时间，因此认为该中药煎剂有利尿作用。你认为这个结论正确吗？说明原因。你认为应该如何设计？意义：识别处理因素与非处理因素的差异。减少实验错误，避免错误的结论。、要求：9:平衡：在组之间相同，除处理因素外，对照组具有与实验组同等的非处理因素。同步：对照组和实验组在整个研究过程中总是在相同的空间和时间。仅限于：相应实验组的控制设置。不能将文献上的记载或以前的结果或其他研究资料用作本研究的对照资料。多种形式的对照组、空白对照组、空白对照组、实验对照组、安慰剂对照组、弱阳性对照、阴性对照、阳性对照、空白对照、对照组不添加任何处理因素。实验控制，实验控制：是指对对照组施加与实验组工作条件一致的干扰因素。影响实验结果的操作、溶剂、试剂等都要成为实验对照组。常用的实验控制组假处理控制组：将与实验组条件相匹配的运算作为作业控制组，假处理控制组在操作影响下发生的误差。药物溶剂对：使用具有相同形态的溶剂作为对照，将溶剂的作用误认为药物，会得到假阳性结果。安慰剂对照，安慰剂：与外观等试验药物相同，是指没有药理活性的物质，在临床研究中用于替代试验药物。安慰剂在剂型、包装、颜色、大小、形状、气味等外观上必须与治疗组受试者完全一样，不能分辨患者或导致安慰剂的破坏和实验失败。安慰剂效果：安慰剂有类似药物的药理效果。包括主观感觉和客观征兆的变化。安慰剂控制为对照组受试者提供没有药理活性的安慰剂作为安慰剂控制组。原则是在不损害患者健康的情况下使用。不用安慰剂，病危状态迅速发展的患者。安慰剂对照和双盲法同时效果更好。对于受精神因素影响较大的慢性病，应尽量使用安慰剂比较；以新药和老药为信用治疗慢性病的临床试验，最好建立安慰剂比较；轻度精神抑郁症，歇斯底里可以使用安慰剂作为心理治疗的一部分；诊断已判定不需要药物治疗的患者为安慰剂对照组。标准对照组被称为标准对照组，应注意疗效公认或肯定的药物或治疗方法的选择，与检查的药物或治疗方法属于同一类。不能用安慰剂对照的时候，可以使用标准对照。使用公认的标准疗法(或常规疗法)作为对照组。例如，人参皂苷的抗心肌缺血被称为普萘洛尔或长效硝酸酯。药物阳性对照，即药效弱的老药作为对照，可以确定新药的价值。在同一机体上观察自己的对照组，即给药前后，可以减少个体差异的影响。相互控制：多个处理(或级别)相互对照。2 .随机原则，概念：将每个随机样本：整个对象的相同机会提取到样本中，将每个实验对象随机分组到不同处理组中的相同机会。随机实验顺序：各实验对象接受处理前后的概率相同，目的：克服偏见，避免人为因素的主观影响和其他因素。方法：抽签法(简单随机、半随机、简单随机抽样)随机数字表方法、随机数组表：两组、三组、随机数字表方法、两组或三组以上随机方法、随机数字表方法、初步结果a组：1、3、9重复原则，意思：实验的样本量必须足够经受重复实验的考验。不能重复的研究不科学.设计样本数时要考虑的因素处理的效果实验误差：数据特性：等级分组系数数据测量数据的样本量，显着性水平：样本大小a随机区域组设计对设计拉丁方设计，样本大小估计一般预定样本大小动物实验：大型动物(狗、猫) 急性病死亡率高的情况：30-50例，一般慢性病：200-300-500例，计算方法估计了解基本数据决定条件：确定p值； 确定把握水平。单侧或双侧。样本大小计算公式和示例，3，实验设计的3个主要因素，明确的实验目的实验设计，第一个实验目的，为了解决什么中心问题，达到什么目标。要确定药物是否具有降压效果，可以观察两组动物，不用药后血压如何变化，在用药前、用药后通过血压的变化来观察药物的效果。根据实验方法和指标确定实验目的和实验条件确定实验方法和观察指标。例如，观察什么药有镇痛效果，包括化学刺激法、热刺激法、电刺激法、机械刺激法等。任何方法都有一定的观测指标。设计一些好的观察指标是体现实验先进性和创新性的重要组成部分。观察指标是表示治疗前后实验对象发生的生理或病理变化的标记。这包括系数指标(定性指标)和测量指标(定量指标)，主观指标和客观指标。客观性：最好选择体温、心电图、血气分析、肿瘤重量、体重、血红蛋白含量、溃疡面积的大小、平滑肌收缩的长度等各种仪器检查的客观指标。指标的选择要符合以下原则：指标具体反映观察现象的本质，不与其他现象混淆。血压，例如高血压，特别是松弛压力，可以作为高血压的特定指标。在血气分析中，氧分压和二氧化碳分压可以作为呼吸衰竭的特定指标。再现性：在相同条件下，指标测量的结果可以再现。再现性高的指标大体上意味着偏差小，误差小，实际反映情况。灵敏度：由实验方法和仪器的灵敏度共同决定。然后选择实验样品。医学实验对象包括人和动物。血压、脉搏、呼吸、尿检等简单的观察，除人体以外的主要实验对象是动物(包括正常动物、麻醉动物和病理学模型、整个动物及体外器官、组织和细胞等)，选择合适的实验动物对实验的成功具有重要意义。，实验样品选择条件；选择离人类近、经济的动物：灵长类动物离人类最近，但价格昂贵。经常选择的实验动物有兔子、老鼠、老鼠、青蛙(蟾蜍)。动物年龄、体重、性别最好匹配。根据实验目的、方法和指标：如果老鼠是实验室常用的动物，就适合药物初级体，测定致死量(LD50)的一半以上。繁殖力强，孕期短，因此也常用于避孕药具审查。兔子体温恒定，适合解热剂，热源测试。四、学生自主设计实验、新碱、吡卡平、乙酰胆碱的鉴别实验药物：0.01%辛斯明溶液(a)；1%水果布拉谢卡溶液(b)；0.1%乙酰胆碱溶液(C)，1。3种药物的基本作用和生物学特性，氯硝柳胺：抑制疼痛活性，发挥完全胆碱作用的反性抗胆碱酯酶，即兴奋性m，n胆碱受体对骨骼肌和胃肠平滑肌有较强的作用，对线，眼睛，心血管和支气管平滑肌有较弱的作用。因此，药物使用后肌肉震颤、涎腺、泪腺分泌增多，会出现大小失禁、中枢兴奋等症状。莫科布拉柴卡：副交感神经(包括支配汗腺的交感神经)的节后纤维支配的效果器官m胆碱受体，特别对眼睛和汗腺有更好的作用。因此，药剂师用后，瞳、涎腺、泪腺分泌增多时，会出现大小失禁等症状。没有肌肉震颤效果。乙酰胆碱(acetylcholine，ACh):胆碱能神经递质，性质不稳定，在体内容易被乙酰胆碱酯酶水解，其效果广泛，选择性差，没有临床实用价值，可以作为研究的工具实用。识别实验方法，小鼠腹腔注射(IP)方法：每组3只小鼠，计量，标记。分别对IP 3种药物溶液0.1毫升/10g体重观察鼠标的反应，对ABC各药物进行了初步判断。【注】辛斯的名字：小鼠肌肉震颤、唾液腺、泪腺分泌增多，大小失禁，中枢兴奋、痉挛最终会死亡；莫和鲁芬溶液后唾液腺、泪腺分泌增加，大小失禁，没有肌肉震颤。在乙酰胆碱溶液后，小鼠没有其他反应，出现了串扰反应(使用乙酰胆碱，pH值为3 5，酸引起的疼痛串扰)。兔子点眼法(瞳孔法)实验方法：每组2只白兔2只眼睛，抓住3只眼睛，测量瞳孔直径，每组3滴ABC 3种药物溶液，每只兔子眼睛3滴(方法：将下眼睑拉成杯状，倒药液，抬起眼睑，与角膜接触，轻轻揉搓1分钟)，观察3