IMMULITE2000 校正及质控结果分析

,校正及质控结果分析技术服务专员刘建中,什么是校正,校正，我们在使用一个新试剂盒运行样本之前必须要运行的一步。假设任何两台仪器的信号之间存在着线性关系，那麽只需要两个点就可确定这种关联性。在DPC主机和用户单机运行相同的两个浓度点（低、高浓度校正液）以确定两台仪器信号之间存在线性关系的方法，即两点校正。它的目的是建立用户仪器和DPC仪器之间的信号线性关系以及校正因为酶活性改变造成的计数的改变,校正及质控结果分析,校正的类型,单点校正两点校正,校正及质控结果分析,由于定性试剂盒只提供一个adjustor，当我们运行校正时，所有的结果都会被接受，这时，唯一可以判定校正结果是否合格的是质控结果。所以定性试剂盒运行校正后必须运行质控，这也是为什么定性试剂盒都随盒带有质控的原因,校正及质控结果分析,校正的类型单点校正,校正及质控结果分析,两点校正运行质控结果校正的斜率校正的截距,校正及质控结果分析,校正的类型,校正及质控结果分析,m=Slopeb=InterceptX=CustomerCPS,Y=mX+b,校正的类型两点校正,质控结果必须在用户指定的范围之内校正斜率必须在平均斜率的20之内校正的截距必须是可接受的,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,质控标准如果质控结果在范围边缘或超出范围：校正结果是可疑的，不管slope和intercept的结果如何，都需要进一步的研究如果质控的结果非常好：校正是适合的，这时如果slope和intercept稍稍超出范围，我们也可以忽略,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,质控标准如果质控超出指定范围，不要马上重新校正：确定质控超出范围是否是由于质控液本身造成的确定质控超出范围是由于校正造成的确定系统是否存在问题,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,质控标准如果质控超出范围：首先参考该项目最近的一次校正情况如果slope、intercept均没有问题，重点考虑QC本身的情况,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准每台机器都有自己特有的slope最初的不同实验的10次的校正slope的平均值是该仪器的平均slope每次校正的slope在平均slope的20之内,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,1.2,Slope标准Slope超出了20的范围：0.751.2质控值在范围之内校正仍然是适合的,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准Slope超出了20的范围较多：0.61.3质控值是否在范围之内观察同期其他实验校正的slope，以排除系统问题检查该项目的最近一次slope以及以前是否有slope接近0.61.3校正仍然是适合的,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,1.150.960.77,Slope标准Slope超出范围较多：0.52.0表明有问题存在，即使质控在范围之内，校正也是不合格的,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Slope标准每次校正的slope应在上一次校正slope的10之内，这是为了补偿由于试剂活性降低造成的cps变化,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Intercept标准免疫量度实验（夹心法）：Intercept的绝对值30%xLowAdjustorCPS竞争法实验Intercept的绝对值2.0%xCurveParameter1,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Intercept标准LowAdjustorCPS:83,00030%范围:25,000Intercept:27,000校正可以使用，除非QC值出现偏差Intercept:30,000QC值没有偏差，并且曾经出现过这样的intercept，校正可以使用Intercept:50,000超出范围2倍，校正不能使用,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,Intercept标准CurveParameter1:61,500,0002.0%范围:1,230,000Intercept:1,300,000超出范围，但10，如果QC值没有出现偏差，校正可以使用Intercept:1,700,000如果QC值靠近靶值，校正可以使用Intercept:2,500,000校正不能使用,校正及质控结果分析,校正的类型两点校正,校正异常的原因,试剂方面：试剂失活或被污染；校正品复溶错误或保存不当；底物污染仪器方面：水质不好；管路被污染；初始化不完全；注射器松动；加样错误；管路漏气；离心清洗不彻底；PMT,校正及质控结果分析,水对IMMULITE系统的影响,NCCLS的推荐水级别降低的原因污染对IMMULITE和IMMULITE2000实验的影响如何检测污染对IMMULITE,IMMULITE2000使用水的推荐,校正及质控结果分析,水，作为临床实验室试剂的主要组成部分，必须确定是纯净的，对结果没有任何的影响。临床实验室标准国家委员会（NCCLS）确定了试剂用水的3个等级：I级，II级和III级。分级是基于检测纯水溶解物和微生物污染。水的污染主要包括溶解的固体离子，溶解的气体离子，溶解的有机化合物，微粒，微生物体，内毒素以及至热物（热源）。高度纯水不含有这些物质。可以通过几种纯化方法来获得相应需要的等级的水：I,II,III级。评估水的纯度，通常需要进行以下检测：电阻系数，微生物含量，pH，硅含量，如果可能，检测有机污染。水的导电性能非常差，所以有很高的电阻系数。高电阻系数反映了低离子浓度。纯水的电阻系数是18兆欧姆厘米。,校正及质控结果分析,实验用水NCCLS的推荐,水的分级I级水：电阻系数在25时应该10兆欧姆厘米。水生产出来后不能保存，应立即使用。钠和氯化物要求小于1ppb。对pH没有特别要求。I级水必须没有微粒物质。最大细菌含量为10CFU/mL。最大的硅酸盐含量为0.05mg/LSiO2II级水：最小的电阻系数在25时是1兆欧姆厘米。II级水对于微粒物，有机污染和pH没有特别要求。细菌含量最大可达1000CFU/mL，硅酸盐含量最大为0.1mg/LSiO2。Na和氯化物应小于5ppb。III级水：最小的电阻系数在25时是0.1兆欧姆厘米，硅酸盐含量可达1.0mg/LSiO2。III级水对于微粒物，有机污染和细菌含量没有特别要求。但是要求pH在5.08.0,校正及质控结果分析,实验用水NCCLS的推荐,注意：对免疫实验，I级水（储存的I级水）是适用的,实验用水NCCLS的推荐,校正及质控结果分析,水级别降低的原因微生物污染无机物和有机物污染,校正及质控结果分析,实验用水NCCLS的推荐,污染对IMMULITE和IMMULITE2000实验的影响盐硅污染氯污染有机污染微生物污染水pH值,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,盐的影响醋酸镁，氯化钙，醋酸锌，氯化铁，氯化钠，氟化钠，硫酸钠Mg2，Ca2，Fe3会影响lowadjustor，Zn2，SO42,F-,Na,Cl-则没有影响Lowadjustorcps对Mg2最敏感。在0.03mg/L(30ppb)这样低的浓度下，HCGlowadjustorcps会增加15。如含有高浓度的Mg2，highadjustorcps同样会大幅上升水中盐离子对三个夹心法实验的影响基本相同：会使低cps增加。主要的影响是在lowadjustor的cps，使校正产生较大的斜率。竞争法（睾酮）没有明显影响。除了影响校正外，水中离子对这4个实验的质控值都有影响。所有的实验，包括睾酮，离子会影响低水平的质控值，高水平没有明显影响,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,硅污染低浓度的硅离子对IMMULITE实验没有影响氯污染使用氯消毒后的水中氯离子浓度不能超过3mg/L，如果能够闻到氯的味道，会对IMMULITE实验产生影响有机污染水中不能含有有机物,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,微生物污染水可以因为微生物内毒素或死细胞产生的废物而污染微生物污染的一个副产品是碱性磷酸酶污染IMMULITE底物可以检测到1021mole的碱性磷酸酶这种污染可以通过WATERTST,WATERTPM很容易的检测到并且可以通过清洗程序很容易的清除非碱性磷酸酶污染水经过分析表明含有革兰氏阴性菌，污染的水通过了WATERTST检测三个夹心法实验的lowadjustorcps增加了60350，highadjustorcps影响很小睾酮的low，highadjustorcps都降低了15PSA的低水平质控降低了90，对其他所有实验的所有质控均有影响,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,水pH值免疫反应，特别是IMMULITE2000化学发光实验，需要最佳的pH碱性磷酸酶是一个分子带有2个Zn2的金属酶，最佳活性pH值是9.510.5。低pH会造成Zn2的丢失，酶和底物反应的活性降低以及cps的降低。PH低于4时highadjustorcps会降低。PH3.0时HCG和PSAhighadjustorcps会降低50%，TSH降低85对于TSH，pH小于5.5时lowadjustorcps会增加，pH4.0时会增加一倍低水平质控会被影响,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,如何检测污染最简单的和水有关的问题是碱性磷酸酶污染。可以通过WATERTST来确定如果水存在问题，经常影响的是校正的intercept水的质量会影响QC的结果校正后立即运行QC在范围之内，但是随着时间的推移，还在校正周期之内时QC出现漂移竞争法实验，刚刚校正后质控会有增加的CV值，漂移的QC会表明存在水的污染HCG会表现出质控的CV增高由于不是所有的实验都可以在相同程度上证明水的问题，应该考虑几个不同实验的数据。必须要排除QC的处理和保存问题。非常重要的是要观察在一个校正周期内的不同时段的质控值。Estradiol，Progesternoe，TotalTectosterone的QC问题经常是和水有关的，TSH的QC会出现大的偏差,校正及质控结果分析,实验用水污染对IMMULITE实验的影响,在净化系统检测水电阻系数，应该在10兆欧姆厘米以上经常维护水系统监测水中微生物污染清洁水系统的笼头，每次接水前放水1015分钟不要在容器中较长时间的保存用水。如有可能直接从水系统处接水如果使用储存容器，经常清洁确定pH在5以上，最好大于5.5用WATERTST,WATERTPM监测实验用水清洁IMMULITE系统如果怀疑问题存在，直接清洗系统并且更换瓶装水,校正及质控结果分析,实验用水IMMULITE实验用水,T3lot=308low15468380high5192966755498777410019593832950106860410717881910Slope=793.1277Intercept=-6.447414e+07,校正及质控结果分析,案例分析沧州中心医院,Lowcps仪器原因？试剂原因？检查其他实验的情况T4lot=316：slope=-6571.533intercept=7.49404e+08TSHlot=322：slope=4.747529intercept=-92913.46FT3lot=207：slope=51.41117intercept=-3.768742e+07FT4校正没做出来,校正及质控结果分析,案例分析沧州中心医院,仪器原因底物量不足试剂加入量不足管路不严加样错误管路或底物污染,校正及质控结果分析,案例分析沧州中心医院,用户重新校正T3失败：LDPC15468380HDPC5192966124415975551439157276635498827102735635343110164898894323004,校正及质控结果分析,案例分析沧州中心医院,检查其他项目的实验情况T4,F3,TSH校正均正常通过T3试剂楔污染，请用户更换试