【总结】微生物表格

1、革兰染色法步骤结晶紫初染碘液媒染95%乙醇脱色沙黄复染原理G+肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水孔径缩小，故结晶紫碘复合物被阻留在细胞内，细胞仍呈紫色。G-肽聚层薄，交联松散，乙醇脱色，不能使其结构收缩，因其含脂量高，乙醇将脂溶解，缝隙加大，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈黄色。化学消毒剂作用机理抗生素抗菌四条途径破坏微生物细胞蛋白结构 有机酸、碱、醇、酚类消毒剂阻碍细菌菌体蛋白的合成、抑制或杀灭细菌改变微生物细胞膜的通透性 有机溶剂、表面活性剂类消毒剂改变细胞膜的通透性，抑制细菌细胞代谢破坏微生物细胞核酸结构 苯胺类燃料(结晶紫、煌绿、孔雀绿)改变核酸结构，干扰核酸代谢

2、而抑菌或杀菌破坏微生物的酶系统 重金属盐类、氧化剂、烷化剂通过干扰细菌细胞壁黏肽成分的合成，从而抑制细菌生长繁殖外毒素内毒素化学性质蛋白质脂多糖来源某些G+分泌G-细胞壁成分耐热性通常不耐热极为耐热毒性强度强（往往致死）对宿主不致热弱（很少致死）常致宿主发热能否产生类毒素能用甲醛处理不能不能被甲醛处理成为类毒素PSE肉DFD肉Pale soft exudative muscleDeep firm dry muscle苍白、柔软、渗水的猪肉深色，质硬干燥的猪肉GF动物SPF动物英文名Germ free animalsSpecific pathogen free animals中文名无菌动物无特定

3、病原体动物定义是指正常的健康胎儿用无菌手术取出后，立即饲养在无任何微生物的环境中的动物是指不存在某些特定病原微生物和寄生虫的动物用途供作研究免疫、肿瘤、消化道微生物与动物营养的关系等之用广泛用于生产和科学研究之中科赫法则：A. 特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康者不存在。B. 此病原菌能被分离培养而得到纯种C. 此纯种培养物接种易感动物能导致同样病症D. 自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。热力灭菌干热灭菌法 A. 焚烧法耐热器皿、动物尸体、各种污染废弃物B. 烧灼法生物实验中的接种环、试管口、玻璃管口 一些外科金属器械C. 烘烤法高温下不损坏、不变质不蒸发物品 玻璃器皿、陶瓷

4、器皿、金属制品湿热灭菌法A. 煮沸消毒法饮水，外科手术器械 若在水中加入1%NaCO3或2%5%石碳酸，可增加杀菌力 加速芽孢的死亡 防止金属器械生锈B. 流通蒸汽灭菌法易被高压灭菌破坏的物品的灭菌湿热灭菌法优于干热灭菌法的原因：P74A. 蛋白质在含有水分的环境中遇热，容易变性凝固。湿热灭菌时菌体蛋白质吸收水分，加速菌体蛋白的变性凝固，菌体死亡加快B. 湿热传导快、穿透力强，可使灭菌物体内部温度加速上升C. 湿热携带有较高的潜热影响热力灭菌的因素A. 微生物的种类和数量B. 温度与作用时间C. 介质的性质D. PH值C. 巴氏灭菌法 低温巴氏灭菌法(6365 30分)高温巴氏灭菌法(7172

5、 15秒)超高温巴氏灭菌法(132 12秒) 然后都要迅速降到10以下D. 高压蒸汽灭菌法变态反应型变态反应过敏反应型变态反应免疫复合物型变态反应型变态反应细胞毒型变态反应型变态反应迟发型变态反应IgGIgA1.为单体Ig，存在于血浆中分泌性IgA2.出现稍迟，但含量最高，维持时间长1.由J链连接的二聚体和分泌成分组成3.在人和兔，IgG可通过胎盘2.由黏膜固有层的将细胞合成和分泌4.有抗细菌、抗病毒、抗外毒素等作用3.主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液、泪液5.可与K细胞、巨噬细胞等结合4.是参与黏膜免疫的主要抗体(在局部感染中发挥重要作用)6. 参与变态反应和自身免疫性疾病血清型I

6、gA主要以单体形式存在于血液中IgMIgE1.由5个Ig单体组成，成为巨球蛋白1.为单体Ig，是血清中含量最少的Ig2.是体内最先产生的抗体，但维持时间短2.IgE的FC片段可与肥大细胞，嗜碱性粒细胞结合，引起I超敏反应3.在早期免疫防御中具有重要作用3.可增强抗体抗寄生虫和抗肿瘤作用4.主要存在于血液中，是一种高效能抗体(杀菌、溶菌、溶血、促进吞噬作用比IgG高)IgD5.参与变态反应和自身免疫性疾病为单体Ig，仅发现于人，其他动物未证实鞭毛芽孢1. 特殊鞭毛染色，光学显微镜下观察2. 电子显微镜观察3. 半固体穿刺培养有动力有鞭毛无运动无鞭毛4. 功能细菌运动器官鞭毛有抗原性与致病性有关1

7、G+在一定环境条件下，菌体内部形成折光性强，不易着色。圆形或卵圆形休眠体结构2未形成芽孢，可繁殖叫繁殖体3芽孢形成后，细菌失去繁殖能力4一个细菌只形成一个芽孢5分类：中央芽孢、偏端芽孢、末端芽孢荚膜1大多菌多糖，少数菌多肽，极少数菌二者均有2作用：抗吞噬作用抗有害物质损伤作用凝集实验平板凝集实验实验器材：(1) 布氏杆菌平板凝集抗原及阳性血清(2) 待检血清(3) 生理盐水、毛细吸管、载玻片实验步骤：(1) 取洁净玻片一张，用记号笔划分为3格(2) 分别在每格中滴加一滴布氏杆菌平板凝集抗原(3) 第一格滴加一滴布氏杆菌阳性血清 第二格滴加待检血清 第三格滴加生理盐水火柴棒混匀，静置23min后

8、观察结果营养贮存场所菌毛1菌毛蛋白具有抗原性2与细菌运动有关3光镜下看不到，必须用电镜观察4分类：普通菌毛、性菌毛结果判定：1st格出现颗粒状或片状凝集物3rd格无凝集物2nd格根据凝集物形成情况判定 出现大的凝集块，液体完全 有明显凝集块，液体几乎完全透明(75%凝集) 可见凝集片，液体不慎透明(50%凝集) 液体浑浊，有小的颗粒状物(25%凝集) 液体均匀，浑浊无凝集物沉淀试验实验器材：(1) 优质琼脂粉(2) 传染性法氏囊诊断血清，阳性抗原(3) 传染性法氏囊待测抗原(取疑似传染性法氏囊病鸡的法氏囊组织匀浆后(4) 制成组织悬液为待测抗原)(5) PH为7.4生理盐水(禽类血清用8%盐水

9、)(6) 培养皿、打孔器(直径46mm孔径)、酒精灯、恒温箱实验原理”(1) 可溶性抗原(如细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液，病毒、组织浸出液等)与相应的抗体结合，在适量电解质存在下，经过一定时间形成肉眼可见的沉淀物成为沉淀反应(2) 琼扩试验原理琼脂在高温时能溶于水，冷却后凝胶的孔径约为85nm，因此可允许各种抗原、抗体在琼脂凝胶中自由扩散(3) 抗原抗体在琼脂凝胶中扩散，由近及远形成浓度梯度，当抗原抗体比例适当时相遇，即会发生结合反应，形成肉眼可见的沉淀线实验步骤：(1) 制板 优质琼脂加入生理盐水煮沸完全溶解注入平皿(厚度23mm)，冷却后备用(2) 打孔 琼脂凝胶板上打梅花孔(中央孔径

10、4mm，外周孔径3mm，孔间距3mm)，用针头将孔内琼脂挑出(3) 封底 将打好孔的平皿在酒精灯上通过数次，使孔底琼脂融化封底(防止侧漏)(4) 加入样品毛细吸管滴加，加满孔为度，每种样品用1个吸管，不能混用细菌生化试验 (糖发酵试验)实验器材：(1) 培养基：糖发酵管培养基(2) 菌种：大肠杆菌、沙门杆菌、斜面培养基(3) 其他实验原理：(1) 细菌具有分解某些糖的特定酶不同细菌酶的种类、特点不同分解糖的结果不同有的产酸产气有的产酸不产气无分解能力者则无这些产物这些结果可通过A培养基中指示剂颜色变化 B.发酵管内是否产生气泡来判断实验步骤：(1) 将大肠杆菌、沙门杆菌分别穿刺接种于：葡萄糖、

11、蔗糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、发酵管培养基内(2) 标记菌种及发酵管名称(3) 置37恒温培养24h观察结果实验结果细菌的分离培养(平板划线分离法)实验器材 恒温培养箱、接种环、火柴、酒精灯、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌混合菌液琼脂平板实验步骤 首先将各种固体培养基融化后制成平板，并用记号笔标明培养基名称。 然后在无菌条件下划线：(1) 左手持皿 左手拇指、食指、中指将皿盖揭开20左右(方便划线为准)(2) 右手持接种环无菌操作取少许菌涂于培养基边缘然后将接种环上多余菌在火焰中烧毁 待接种环冷却后再涂菌的地方轻轻接触，开始划线(3) 划线前先将接种环轻轻弯曲(这样易和平皿内琼脂平行，不致划破培养基)

12、(4) 划线中不宜过多重复旧线，以免形成菌苔实验步骤：(1) 无菌棉拭子蘸少量待测菌液，均匀涂布平板，待稍干后 用无菌镊子将各种药敏片分别贴在平板培养基表面(平板46个，相互间应有一定距离 15mm)(2) 置37培养1824h观察结果结果判定药物敏感试验(纸片法)实验材料(1) 大肠杆菌肉汤培养物1管(实验用菌种)(2) 灭菌棉签1包(3) 各种药敏片，含各种抗生素的市售产品(4) 培养基平板：普通牛肉膏蛋白胨固体培养基(5) 眼科镊、无菌棉拭子、酒精灯、尺子一把实验原理(1) 各种病原菌对抗生素药物的敏感性不同 同种细菌的不同菌株对同一药物的敏感性也有差异(2) 检测细菌对抗菌药的敏感性，

13、可筛选出最有效的药物用于临床治疗，对控制细菌性传染病极其重要(3) 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度(4) 纸片周围抑菌浓度范围内待检菌的生长被抑制，从而产生透明的抑菌圈(5) 根据抑菌环的大小可以判定细菌对此药物的敏感度抑菌圈愈大，最低抑菌浓度愈小(MIC)正常菌群与菌群失调正常菌群概念正常动物和人的体内及体表常有一类微生物或微生物群存在，但不引起致病现象，这一类微生物就是正常菌群（又称固有菌群）正常菌群生理作用1.拮抗作用 2.营养作用 3.合成维生素 4.免疫作用菌群失调概念指正常微生物之间及正常微生物之间宿主之间