免疫学检验第十三章凝集反应ppt课件

1、第十三章 凝集反应,制作人：和燕,早在1896年，Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象，有效地诊断伤寒病。-肥达试验 至1903年，Landsteiner在特异性血凝现象的基础上发现了人类ABO血型，并于1930年获得了诺贝尔医学奖。 -血型鉴定,凝集反应的发现,凝集反应的定义,凝集反应： 颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体特异性结合，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒（红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒、炭粒）后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象,可见反应形成,阴性,阳性,凝集反应的分型,凝集反应,直接凝集反应,

2、间接凝集反应,抗球蛋白试验,第一节 直接凝集反应,直接凝集反应： 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象,凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原,凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体,一）玻片凝集试验,方法评价: 定性试验 简便和快速 敏感度低,应用: 菌种鉴定 血清学分型 血型鉴定,在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象,二）试管凝集试验,0.5,0.5,0.5,0.5,0.5,弃掉0.5,试管凝集试验原理,结果,1 2 3 4 5 6 7,菌液,结果,很小的凝集颗粒,混浊,无凝集现象,与对照相同,小

3、、部分凝集块,中等混浊,大多凝集管底,轻度混浊,大的凝集块,清亮,凝集程度,沉淀,上清,管底沉淀,凝集程度,方法评价： 半定量试验 简便、快速 敏感度低 可有假阳性,临床应用： 肥达试验 外斐试验 交叉配血试验,第二节 间接凝集反应,间接凝集反应: 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象,载体,可溶性抗原,致敏,致敏颗粒,NS,凝集颗粒,间接凝集试验示意图,常用载体,红细胞-间接血凝试验,聚苯乙烯乳胶-胶乳凝集试验,1、正向间接凝集试验 2、反向间接凝集试验 3、间接凝集抑制试验 4、协同凝集试验,间接凝集反应的类型,用抗原

4、致敏载体-检测抗体,正向间接凝集试验,反向间接凝集试验,用抗体致敏载体-检测抗原,间接凝集抑制试验,用抗原致敏载体-检测抗原,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,特异结合,抗原抗体复合物,NS,致敏颗粒,无凝集颗粒 阳性,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,无结合,抗原抗体分散,NS,致敏颗粒,有凝集颗粒 阴性,SPA:SPA-IgG Fc; SPA抗体致敏-测抗原,协同凝集试验,原理图,IgG,SPA,SPA- IgG,待测抗原,SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒,混合,加入,间接凝集反应的应用,抗原的检测 反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。 抗体

5、的检测 检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体,抗球蛋白试验又称 Coombs试验,第三节 抗球蛋白试验,一）直接Coombs试验,不完全抗体,检测红细胞上抗体,二）间接Coombs试验,检测血清中的抗红细胞抗体,临床应用： 在输血上的应用 血型抗原抗体的检查 对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断 对溶血性贫血的研究 对细菌或立克次体的不完全抗体检查,冷凝集试验原理,抗原决定簇隐含，不能与抗体结合,混 合,暴露的抗原决定簇与抗体结合,混 合,37,4,37,胶乳凝集试验-类风湿因子检测,抗自身变性IgG抗体，属于IgM类，主要存在于血清中。 约90%类风湿性关节炎（RA）患者的RF呈阳性。 某些自

6、身免疫病，如冷球蛋白血症、进行性全身性硬化症、干燥综合征、SLE等患者都有较高的阳性率；一些其他疾病如血管炎、肝病、慢性感染也可出现RF,类风湿因子RF,其病因及发病机制仍不完全明了, 机体出现免疫系统紊乱, 进而引起关节滑膜、软骨组织慢性炎症和破坏的自身免疫性疾病,类风湿性关节炎RA,RF可与IgG的Fc段结合。将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，此致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时，即可发生肉眼可见的凝集,乳胶凝集试验,类风湿胶乳诊断试剂 RF阴性对照 RF阳性对照 反应板 搅拌棒,主要的试剂和器材,取阳性血清、阴性血清各1滴于反应板上，然后分别加类风湿胶乳诊断试剂1滴。 用搅拌棒充分混匀后，轻轻摇动反应板23min，观察结果,步骤,在室内的光线下观察，有清晰的凝集颗粒出现，且液体澄清者为RF阳性,结果观察和判断,1、凝集反应是指细菌和红细胞等_或载体表面包被_与相应抗体/抗原结合后，可出现肉眼可见的_现象 2、凝集反应的分类？ 3、直接凝集反应包括哪两类？ 4、间接凝集反应的分类？原理,复习题,小结,凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被抗原/抗体的颗粒性载体与相应抗体/抗原结合后，可出现肉眼可见的凝集现象。 可以分为直接凝集反应、间接凝集反应和抗球蛋白试验。 直接凝集反应主要有玻片法和试管法。 间接凝集反应