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1、引引 言言引引 言言 大豆胞囊线虫病防治大豆胞囊线虫病防治利用抗病种类利用抗病种类轮作轮作别需求大量线虫样品引引 言言植物寄生线虫分子诊断和鉴定技术引引 言言M.hapla 扩增片段长度多态性AFLP技术美国和墨西哥烟草胞囊线虫属于不同组引引 言言Belonolaimus和许多小杆线虫属等引引 言言资料与方资料与方法法样品称号国家地点Hg 1加拿大OntarioHg 2加拿大OntarioHg 3 加拿大OntarioHg 4阿根廷Santa FeHg 5阿根廷Santa FeHg 6阿根廷Buenos AiresHg 7美国MissouriHg 8美国IllinoisHg 9美国Iowa S
2、tateHg 10 美国South DakotaHg 11 美国MinnesotaHg 12中国黑龙江省Hg 13中国黑龙江省Hg 14中国黑龙江省Hg 15中国黑龙江省Hg 16中国黑龙江省资料与方法资料与方法提取提取DNADNA用用资料与方法资料与方法资料与方法资料与方法资料与方法资料与方法PCR扩增50l:PTC-200电泳检测:1.5%琼脂糖资料与方法资料与方法结果与分析结果与分析SCN rDNA-ITS PCR扩增产物 PCR marker,Hg1, Hg2, Hg3, Hg4, Hg5, Hg6, Hg7, Hg8, Hg9, Hg10, Hg11, Hg12, Hg13, Hg1
3、4, Hg15, Hg16,根结线虫,CK,PCR marker结果与分析结果与分析 用限制性内切酶HinfI、ClaI、Xba和EcoRI酶切大豆胞囊线虫(H. glycines)rDNA-ITS PCR扩增产物的RFPL分布图。从左至右:用HinfI酶切的Hg1,Hg3, Hg4, Hg7, Hg12;用ClaI酶切的Hg4, Hg7, Hg12;用Xba酶切的Hg4, Hg7, Hg12;用EcoRI酶切的Hg4, Hg7, Hg12, 1000bp DNA marker。结果与分析结果与分析从左至右:PRC marker, 用AluI酶切 的Hg12, Hg13, Hg14, Hg15
4、, Hg16, Hg1, Hg4, Hg7;用AvaI酶切 的Hg12, Hg13, Hg14, Hg15, Hg16, Hg1, Hg4, Hg7;PCR marker 一切的中国SCN群体Hg12,- Hg16的rDNA-ITS的PCR扩增产物均产生3条RFLP片断,而加拿大、阿根廷和美国一切SCN群体的rDNA-ITS的PCR扩增产物均产生2条RFLP片断 结果与分结果与分析析8RFLP片断AvaI酶切PCR扩增产物后产生了多态性结果与分析结果与分析从左至右:1Kb DNA marker, FISSR2扩增的Hg3, Hg8, Hg5, Hg15;FISSR5扩增的Hg3, Hg8, Hg5, Hg15;FISSR6扩增的Hg3,
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