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文档简介

1、氨基酸总量 (氨态氮 )的测定（甲醛滴定法）一、单指示剂甲醛滴定法：(一)原理：氨基酸具有酸、碱两重性质，因为氨基酸含有 -COOH 基显示酸性，又含有 -NH 2 基显示碱性。由于这二个基的相互作用，使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，-NH2 与甲醛结合，其碱性消失，破坏内盐的存在，就可用碱来滴定-COOH 基，以间接方法测定氨基酸的量，反应式可能以下面三种形式存在。（二）试剂(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。(3) 0.100N 氢氧化钠标准溶液。(三)操作步骤：称取一定量样品 (约含 20 毫克左右的氨基酸 )于烧杯中 (如为固体加水 50 毫升 )，

2、加 2-3 滴指示剂，用 0.100N NaOH 溶液滴定至淡蓝色。加入中性甲醛20 毫升，摇匀，静置1 分钟，此时蓝色应消失。再用0.100N NaOH 溶液滴定至淡蓝色。记录两次滴定所消耗的碱液毫升数，用下述公式计算计算：氨基酸态氮 ()=( N V 0.014100)/W式中：N：NaOH 标准溶液当量浓渡。V ：NaOH 标准溶液消耗的总量 (m1)W ：样品溶液相当样品重量(克)。0.014：氮的毫克当量。三、双指示剂甲醛滴定法：(一)原理：与单色法相同，只是在此法中使用了两种指示剂。 从分析结果看，双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂，不作介绍)相近单色滴定法稍偏低，

3、 主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液 PH 值作为麝香草酚酞的终点。 PH 值在 9.2，而双指示剂是以氨基酸溶液的 PH 值作为中性红的终点， PH 值为 7.0，从理论计算看，双色滴定法较为准确。(二)试剂：(1) 40%中性甲醛溶液(2) 0.1%麝香草酚酞乙醇溶液。(3) 0.100N 氢氧化钠标准溶液。(4) 0.1%中性红 (50%乙醇溶液 )(三)操作步骤：取相同的两份样品， 分别注入 100 毫升三角烧瓶中， 一份加入中性红指示剂 2-3 滴，用 0.100N NaOH 溶液滴定终点 (由红变琥珀色 )，记录用量，另一份加入麝香草酚酞 3 滴和中性甲醛 20 毫升，摇匀，以 0.100N NaOH 准溶液滴定至淡蓝色。按下述公式计算。计算：氨基酸态氮 (%)=( N(V 2-V 1)0.014)/W100式中：V2 ：用麝香草酚酞为指示剂时标准碱液消耗量(毫升 )V1 ：用中性红作指示剂时碱液的消耗量(m1)。N：标准碱液当量浓度。

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