单宁含量的测定_第1页
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文档简介

1、)单宁含量的测定1原理 单宁具有较强的复原性，可将 Fe3+ 复原为 Fe2+ 。利用邻二氮菲与Fe2+反响生成橙红色配合物，用分光光度计在？=510nm处测吸光度并与标准比拟而 测定单宁。2仪器可见光分光光度计，研钵， 250ml 容量瓶， 50ml 容量瓶， 100ml 容 量瓶，天 平， 1ml， 2ml， 5ml， 10ml 移液管， 100ml 量筒3试剂( 1 )单宁标准溶液 ：取标准单宁酸 (C76H52O46 )100 mg 溶于 1000mL 蒸 馏 水中，再取适量溶液稀释10倍，配成10 g/mL的溶液.(2)EDTA 溶液：取 EDTA 二钠盐 0.25 g 溶于 500

2、 mL 水中配成 0.05 mol/L 。(3)铁(山)溶液：取硫酸铁铵( NH4Fe (S04) 2 12H2O ) 2.41 g溶 于 500 mL 蒸馏水，并参加 0.5 mL 浓硫酸，配成 0.01 mol/L 的溶液。( 4) 邻二氮菲溶液 ：取 1 ， 10- 邻二氮菲 1.485 g 于 500 mL 蒸馏水中， 配成 0.015 mol/L 的溶液。( 5) 缓冲溶液 ：取冰醋酸 15 g 和醋酸钠 20 g 溶于 250 mL 蒸馏水中， 配成 pH 为 4.4 的缓冲溶液。4标准曲线的绘制取单宁标准溶液 0.0 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0 mL 于 6

3、 只 25 mL 容量 瓶中， 分别参加铁(山)1.5mL，置于80 C水浴25 min。冷却至室温后分别依次加 入缓冲溶液 2.0 mL 、邻二氮菲 3.0 mL 、EDTA 溶液 0.5 mL ， 用蒸馏水定容至刻 度后摇匀，静置 10 min ，在 510 nm 波长下以试剂空 白作对照测量吸光度。以 单宁质量浓度(依次为 0、0.4 、0.8 、1.2 、 1.6、2.0，单位pg/mL )为横坐标， 吸光度为纵坐标作图。5样品的提取称取0. 3000. 500 g叶片于60 mL水中,在沸水浴中煮1 h,冷却至室温 过滤，将滤液稀释至100 mL。取稀释液0. 40. 6 mL于25 mL容量瓶中, 按上述方法 测定吸光度 ,鞣酸含量按下式计算 : 鞣酸含量 (% ) = C 25 6 100 100%m 10 6

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