直接抗人球蛋白IgG检查标准操作程序

1、直接抗人球蛋白igg检查标准操作程序1. 试验原理和目的将抗球蛋白血清加入已经致敏的红细胞盐水悬液中，红细胞表面的抗体球蛋白与抗球蛋白血清 中的抗体发生特异性反应，通过桥梁作用使红细胞发生凝聚。通过直接抗人球蛋白试验可检查红细胞是否被不完全抗体所致敏，如新生儿溶血病（胎儿红细 胞被母亲血型抗体致敏）、溶血性输血反应（输入的不相合红细胞被受者不完全抗体致敏）、自身免 疫性溶血性贫血（患者红细胞被自身抗体致敏）以及药物诱导产生的自身抗体（由甲基多巴类药物、 青霉素等所致）。2. 标本要求2. 1病人准备标本采集前患者处于安静状态，避免剧烈运动、情绪激动。2. 2标本要求2. 2. 1标本种类edt

2、a抗凝管2.2.2标本容器01开头的紫色短管（edta 1:9抗凝）2. 2.3标本存放 采完标本立即送检，标本禁忌放入4°c8°c冰箱中。已检标本封盖后室温放置， 保存48小时后由医院按感染标本统一处理。2.2.3标本拒收样品标识不清或标识错误、采血管不正确、严重溶血或脂血、与申请单内容不符 等标本。3. 试剂3.1试剂成分：直接抗人球蛋白试剂盒（上海血液生物医药有限公司人抗tgg, c3d （多特异性）、 抗igg、抗c3d；理盐水。3.2用不完全抗d致敏的5%rh（d）阳性红细胞盐水悬液供阳性对照用：収3人0型红细胞，混合， 经盐水洗涤后取压积红细胞，加等量抗d血清，

3、置于37°c水浴致敏lh,盐水洗涤3次，用盐 水配成5%红细胞悬液。3.3正常人5%d阳性红细胞悬液（未致敏），供阴性对照用，除不用抗d血清致敏外，按上述方法 配制。3.4试剂贮藏要求：28°c冰箱.4. 仪器4. 1 口本olympus cx31普通光学显微镜。4.2 ssw型微电脑电热恒温水槽（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）5. 操作步骤5.1取受检者红细胞，以生理盐水洗涤3次（3000rpm lmin）,末次洗涤后，将上层盐水倒尽，再 以滤纸将管口附着的盐水吸去，配成5%红细胞盐水悬液。5.2取上述5%受检者红细胞盐水悬液1滴，滴入1小试管内，加抗球蛋白血清2滴，混

4、匀。5.3阳性对照：不完全抗d致敏的5%rh（d）阳性红细胞盐水悬液1滴，滴入1小试管内，加抗球蛋 白血清2滴，混匀。5.4阴性对照：常人5%d阳性红细胞悬液（未致敏）1滴，滴入1小试管内，加抗球蛋白血清2滴, 混匀。5.5受检管及阳性、阴性对照管同时以3000r/min离心15秒，轻轻混和，观察结果。6. 检验结果报告6. 1结果判定：须持一定角度轻轻地摇动试管直到松动所有的细胞，然后反复倾斜试管，直到均匀 的细胞悬液（阴性）或者凝集物邙口性）为止。如阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检 红细胞凝集者直接抗人球蛋白试验为阳性，不凝集者为阴性。6. 2报告传输及打印在lis操作界而输入结果，

5、审核发送报告，门诊和病房报告单在指定处打印。7. 参考范围正常人：阴性。8. 安全防范操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗材应作为医用 垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当屮暴露a长时间；遇到样本洒出， 被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品应丢弃在标有生物污染的垃圾筒屮。9. 注意事项9. 1标本采集后应立即进行试验，延迟试验或屮途停止可使抗体从细胞上丢失。9.2抗球蛋白血清应按说明书使用最适稀释度，否则，可产生前带或后带反应而误为阴性结果。9.3最好对阴性结果进行核实，即在该试管屮再加1滴igg致敏红细胞，如结果为阳性，则表

6、示试 管内的抗球蛋白血清确末被消耗。9.4红细胞上吸附抗体太少或coombs阴性自身免疫性溶血性贫血，直接抗球蛋白试验可呈假阴性 反应。9.5全凝集或冷凝集血液标本中含有wharton胶且洗涤不充分，血液标本中有很多网织红细胞且抗 球蛋白血清屮含有抗运铁蛋白时，都可使红细胞产生凝集。9.6试剂储存于2-8°c,保存至有效期。勿长时间存放在高温条件下或反复冻融。10 临床意义10. 1温抗体型导致的atha, dat强阳性。10.2药物诱发的1山，q甲基多巴、青霉素dat阳性,奎宁型多为igm阳性10. 3冷凝集综合症：用抗人全血清的抗人球蛋白血清与在37°c洗涤过的患者红细胞作试验，dat阳 性。10.4 pnh患者在溶血发作时，dat强阳性，发作后期转阴。10.5新生儿同种免疫溶血病：因rh抗体引起溶血的病例，全抗或单抗igg的dat强阳性