福建戴云山金线莲工厂化育苗关键技术研究

1、福建戴云山金线莲工厂化育苗关键技术研究金线莲 Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl. 具有很高的药用价值 以及欣赏价值， 但是随着人工开采和自然条件的恶化， 其野生资源濒于枯竭。 本 试验以福建戴云山金线莲为材料，进行工厂化育苗的优化研究以及ISSR 遗传稳定性检测。主要进行的工作包括：外植体无菌株系的建立，芽苗、原球茎、根状茎固液 培养基的增殖研究； 原球茎、 根状茎分化芽苗以及生根壮苗移栽的试验研究； 对 不同继代次数的金线莲组培苗样品进行了 ISSR 遗传稳定性的分析。最后，通过 试验中得到的技术参数建立金线莲工厂化育苗模式， 并进行福建戴云山金线

2、莲工 厂化育苗的经济效益分析。主要研究结果如下： 1 福建戴云山金线莲工厂化育苗的主要技术研究本试验 以福建戴云山金线莲为材料，进行了外植体无菌株系建立，不同培养基对芽苗、 原球茎、根状茎的增殖影响， 液体培养基和固体培养基的比拟试验， 不同处理对 原球茎、根状茎分化芽苗的影响以及不同培养基对生根和壮苗的影响研究。 福 建戴云山金线莲以茎段为外植体的无菌株系的建立。发现升汞消毒 10min 的效果最正确， 其污染率最低， 存活率最高。 污染率和存 活率分别为 12.22%、82.22%。 福建戴云山金线莲芽苗、 原球茎、 根状茎增殖培养体系的优化， 分别以金 线莲的芽苗、原球茎以及根状茎为材料

3、，比拟不同盐以及6-BA和NAA勺浓度对其增殖的影响。试验结果说明，金线莲芽苗增殖的最优培养基为 1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L原球茎增殖效果最好的培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L根状茎增殖的最优培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/。在优化培养基的根底上进行了液体培养基与固体培养基的比拟， 试验结果表 明，液体培养基对金线莲增殖的影响明显优于固体培养基。 在液体培养基中， 芽 苗增殖系数是固体培养基中的 2.86 倍，原球茎增殖系数是固体培养基的 1.70 倍，根状茎的增殖系数是固体培养基的 1.20 倍。 福建戴云山金线

4、莲原球茎、 根状茎分化芽苗的优化研究。 分别以金线莲的 原球茎和根状茎为材料，比拟不同盐以及 6-BA、NAA浓度对其分化芽苗的影响， 利用赋值评分的方法进行统计分析，结果说明原球茎分化芽苗最优培养基为 MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg，总分为8.17，根状茎分化芽苗最优培养基为 1/2MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.01mg/L 总分为 9.31。 福建戴云山金线莲的生根研究。 以金线莲的芽苗为材料， 比拟不同浓度的 AC IBA和NAA对金线莲生根的影响。试验结果说明1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.3mg/L为金线莲生根最优培养基。 不同糖浓度以及添加物对

5、福建戴云山金线莲壮苗的影响。以金线莲的芽苗为材料， 在生根优化培养基的根底上进一步比拟不同糖浓度、 不同香蕉与马铃薯浓度的组合对金线莲壮苗的影响。 以赋值评分的方法进行统计 分析，试验结果说明：1/2MS+琼脂0.6%+NAA0.3mg/L+IBA1.0mg/L白糖2%马铃 薯 10%+香蕉 10%为金线莲壮苗最优培养基。并且通过观察和分析发现，香蕉相对于马铃薯更有利于金线莲的增重。 2福 建戴云山金线莲组培苗移栽试验研究待到芽苗高 3-4cm,具有2-3条以上不定根 时，便可进行移栽，选择长势一致的金线莲组培苗作为移栽材料。进行不同基质， 不同肥料浓度以及不同季节的比拟试验。 不同基质的比拟

6、 试验说明，泥炭土：椰糠：树皮：沙 =3:3:1:2 为最优的移栽基质。以最优基质为根本移栽基质， 比拟不同肥料浓度对金线莲移栽的影响。 试 验结果说明花多多 1号的 4000倍液与花多多 10号的 3000倍液为适宜肥料浓度。在前两步试验的根底上进行春季移栽试验， 来比照春季和秋季两种季节对 金线莲移栽的影响。试验结果说明秋季比春季更适合金线莲的移栽。3 福建戴云山金线莲组培苗遗传稳定性的 ISSR 分析本试验选取 0 代、 3 代、 6代、9代、12代、15代的金线莲组培苗进行遗传稳定性的ISSR检测。筛选出 11条随机引物对金线莲的DNA进行PCRT增，共扩增出94条谱带，0代、3代、

7、6 代、 9 代、 12 代、 15 代的变异率分别为 10.64%、 10.64%、 8.51%、 12.77%、11.70%、 17.02%。0-15 代的遗传相似性系数介于 0.819-0.915 之间，其遗传相似性系数很大。这说明福建戴云山金线莲虽然在组织培养的继代过程中发生了一定程度的变异， 但是其遗传性状依然相对稳定。4 福建戴云山金线莲工厂化育苗模式的建立与经济效益分析福建戴云山金线莲工厂化育苗主要技术链条为：无菌株系的建立一试管苗增殖培养芽苗增殖 或根状茎增殖-试管苗生根壮苗培养一炼苗一穴盘移栽一上盆一销售。 主要技 术参数为：无菌株系的建立0.1%HgCI2消毒10min;增

8、殖系数7.76 以芽苗 增殖为例，以1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L为培养基；生根与壮苗不是同步 进行生根以1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.3mg/L为培养基，但是壮苗是在生根优化基质的根底上进行的壮苗以1/2MS+琼脂0.6%+NAA0.3mg/L+IBA1.0mg/L白糖2%+马铃薯 10%+香蕉 10%为培养基，其生根率可达 100%，移栽成活率为 95%以上移栽基质为：泥炭土：椰糠：树皮：沙 =3:3:1:2 增殖和生根期间的污染率为 5%，壮苗期间为 10%。按照通过试验取得的技术参数，以年产 100 万株苗为例进行了金线莲工厂化育苗的效益分析。 可知，所用的培养基配制本钱、电费、水费、人工费、易耗品费用、折旧费 以及移栽本钱共计 390511.58 元，每株苗本钱为 0.39 元，按市场价格每株 0.6 元，可获利 209488.42 元。其中发现水电费用最高，为 172710.83 元，占总本钱 的 44.23%。人工费次