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文档简介

1、会计学1ClonePix细胞克隆筛选系统公司概况细胞克隆筛选系统公司概况Genetix1991: 由Mark Reid创立,总部位于英国New Milton。1993: 开发出第一个系统 QBot2000: 在伦敦交易所上市2007: 收购应用影像公司 2009: 收购Slidepath2010: 被Danaher (LMS)收购2011: 与Molecular Devices合并,为公司带来一系列新的产品,ClonePix,QPix,CloneSelect Imager,CellReporter。核心技术: 设计,开发和生产创新性系统,减少新的生物药物的研发时间和费用。公司在微生物克隆筛选方

2、面建立行业标准。第一家也是全球最好的生产全自动细胞株筛选仪器厂家(申请专利,全第一家也是全球最好的生产全自动细胞株筛选仪器厂家(申请专利,全球球160160台)台)第1页/共20页筛选(找到好克隆)并挑取(自动化挑取)细胞克隆 杂交瘤细胞 CHO、HEK等表达细胞系 昆虫细胞 干细胞等第2页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices, Inc.4半固体培养基半固体培养基 + 细胞细胞 + 荧光检测试剂荧光检测试剂Secreted antibody (IgG)Complex Initiation Factor (CIF) = unconjugated CloneD

3、etectAntigen (fluorescently conjugated or tagged)Hybridoma筛选特异性抗体杂交瘤筛选特异性抗体杂交瘤:二、技术原理(怎么做?)二、技术原理(怎么做?)第3页/共20页技术特点技术特点1、半固体培养基(SSM)培养得到克隆2、荧光检测试剂显示蛋白的表达水平3、白光定性(识别克隆)4、荧光定量(定量荧光信号水平)WLFITC FITC: 20 x mag.第4页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices, Inc.6高水平分泌克隆高水平分泌克隆软件对荧光信号进行定量软件对荧光信号进行定量,排列克隆。,排列克隆。

4、排除掉低产克隆排除掉低产克隆第5页/共20页准确准确挑取挑取12/8/20217 2011 Molecular Devices, Inc.第6页/共20页第7页/共20页找到能生产特异性抗找到能生产特异性抗体的细胞克隆体的细胞克隆找到能高产特异性抗找到能高产特异性抗体的稳定细胞系体的稳定细胞系Target discoveryAntibody discoveryCandidate SelectionCell Line DevProcess DevBulk ProductionClinical StudyPre-ClinicalPK/ToxstudiesClonePix 2ClonePix 2第8

5、页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices, Inc.10应用方向:应用方向:1、抗体药物研发:如杂交瘤细胞的筛选2、蛋白表达:如抗体的表达,融合蛋白的表达,筛选建立稳定高产的细胞系3、具有特异性表面标记的干细胞的筛选1、挑克隆自动化 (解决怎么挑的问题)2、筛选克隆自动化(解决挑什么,挑哪些克隆的问题)第9页/共20页160 ClonePixGSK, Merck, Wyeth, Genentech, Centocor, MedImmune, UCB, Genmab北京肿瘤医院,无锡药明康德,诺华,康弘药业,江苏泰康生物医药等,兰州健顺等。第10页/共20页第

6、11页/共20页第12页/共20页ClonePix2 VS 有限稀释有限稀释“We have implemented the use of ClonePix FL to increaseour fusion productivity by approximately 50%, while decreasing our time from fusion to stable clone by 50%” Dr Robin Barbour, Associate Director, Elan Pharmaceuticals第13页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices

7、, Inc.15Data courtesy of MedImmune LLC第14页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices, Inc.16ClonePix FLLimited DilutionCloneTiter (g/L)qP (pcd)Clone 14.554.6Clone 24.444.6Clone 34.349.4Clone 44.043.8Clone A2.932.7Clone B2.821.0Clone C2.720.9Clone D2.629.0Data courtesy of MedImmune LLC第15页/共20页12/8/2021 2011 Molecular Devices, Inc.17第16页/共20页分泌性蛋白从细胞上脱离对分泌表达细胞表面标记非常弱单细胞在不同细胞周期有不同的表达水平稀少的高产株容易丢失FACS CapillaryClonePix 2 vs FACS:第17页/共20页Clonepix 2FACS工作流程有利于后续生产;避免有限稀释。只是富集细胞,仍然需要有限稀释。细胞成活率200细胞/h,成活率超过90%。虽然很快,1000-800cells/s,只有70%成活率。(很严重的很严重的问题问题)易操作度几天培训后,实验室的所有人都

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