黄花菜中黄酮类物质抗氧化性的研究

1、食品研究与开发科学研究黄花菜中黄酮类物质抗氧化性的研究郎娜，罗红霞（天津市静海县产品质量监督检验所，天津）摘要：采用浓度为的乙醇提取黄花菜中的总黄酮物质，分光光度法测定黄花菜中的总黄酮含量，提取率为。研究了黄花菜中黄酮类化合物对超氧自由基、羟基自由基的清除作用，结果表明：黄花菜中黄酮类化合物对清除自由基有明显的作用，黄酮类化合物的添加量在试验范围内与其抗氧化性呈正相关；同时还研究了提取物与的协同抗氧化作用，证明有较好的增效作用。关键词：黄花菜；黄酮类物质；提取；抗氧化作用；清除自由基，（，）：，；：黄花菜又叫金针菜，别名萱草，属多年生草本植物。原产亚洲和欧洲。中国山地有野生种。黄花菜中蛋白质、

2、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铁、胡萝卜素、核黄素的含量均较高，其与磨菇、木耳，同为素菜中的珍品。黄花菜个体肥硕，油大脆嫩，久煮不烂，香气浓郁，营养丰并有富，含有人体所需的种氨基酸和多种矿物质，健胃、利尿、安神、生津等药用功能。黄酮是广泛存在于植物界的一类黄色素、次级代谢产物，是人体必需的营养素之一，人体内不能合成，只能从食物中摄取。药理实验表明，总黄酮为治疗心血并能消除体内自由基，具有与超管疾病的有效成分，氧化物歧化酶（）同样的活性，且毒性较低，因此还可用作食品、化妆品的天然添加剂，如甜味剂，抗氧化剂，食用色素。自由基是一类上层轨道含有未配对电子的原子团或特殊状态分子，其中与人体关系最为密切的是

3、氧自作用最强。食用油脂由基，其中以形成最早，作者简介：郎娜（），女（汉），助理工程师，研究方向：食品检测。和富脂食品的酸败就是由自由基引发的，它不仅使油脂本身受破坏失去营养，更重要的是其氧化产物和中间产物会伤害生物膜、酶、维生素、蛋白质以及活细胞功能，其中一些是公认的致癌物。因此，有关抗氧化剂清除自由基的研究得到普遍关注。本文对黄花菜中总黄酮含量进行了分析测定，并对黄花菜黄酮的抗氧化性进行了研究。主要化学试剂与仪器、设备芦丁，浓盐酸，邻苯三酚，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，硼酸，三氯化铝，水杨酸钠，双氧水，磷酸氢二钠，丙酮，正己烷，茴香醛，浓硫酸，均为试剂；乙。醇（）主要仪器、设备容量瓶，烧杯，

4、量筒，层析柱，索氏提取器。组织捣碎匀浆机，分光光度计，离心机，旋转蒸发器，真空干燥箱，光电天平，电热恒温水浴锅，循环水式多用真空泵。主要化学试剂科学研究试验方法食品研究与开发和反应产生，氧化水杨酸钠所以的多少，吸光值越大，得产物的吸光值表示表明越多。反应液中含，水杨酸钠及不同浓度的黄酮提取液为被测液，以蒸馏水代替黄酮提取液为对照，最后加启动反应在条件下反应。测的抑制率。处的光吸收值，得到对对照×抑制率（对照样品）样品分别表示对照液和被测液反应（式中对照、后的吸光值。）及含的黄酮提取液对羟基黄酮提取液、及含的黄酮提加入同浓度的黄酮提取液、取液按的方法测定它们对羟基自由基的清除率。对超氧

5、自由基的清除在容量瓶中加入缓冲液的黄酮溶液，在恒温水浴中放（），置后，加入的预热邻苯三酚溶液），迅速混匀，在内每隔在（处测定溶液的吸光度，并与空白溶液相比较，便可得出被测物抑制积累作用的能力。对照×（对照样品）抑制率（式中对照和样品分别表示空白溶液和被测液的吸光度随时间的变化值。）结果与讨论根据的实验方法进行测定，结果见表。表标准芦丁浓度吸光度黄酮标准曲线制作定精密称取干燥至恒重的芦丁标准品，、容于容量瓶中。分别吸取、于容量瓶中，用乙醇溶液补充至，分别加入浓度为的亚硝酸钠溶液，摇匀，静置后，加入浓度为的硝酸铝溶液，摇匀，放置后，再加入浓度为的氢氧化钠溶液，摇匀，放置后于波长处测定吸光

6、度。以芦丁标准品的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。用最小二乘法进行线性回归，得回归方程，并求其相关系数。总黄酮的提取测定黄花菜洗净，风干，粉碎，于干燥左右，待用。称取黄花菜样品，在乙醇溶液中浸泡后，于索氏提取。将所得乙醇提取液进行旋转蒸发浓缩，使浓缩液的体积为原来的。将浓缩液以的速度离心，收集上清液。将上清液转移至装有预处理过的树脂（）层析柱中（内径），用乙醇溶液洗脱。将洗脱后的样待测吸光度。品液以每试管左右存放，精密吸取样品液，置于容量瓶中，用乙醇溶液补充至，分别加入浓度为的亚硝酸钠溶液，摇匀，静置后，加入浓度为的亚硝酸铝溶液，摇匀，放置后，再加入浓度为的氢氧化钠溶液，摇匀，放置

7、后于波长处进行吸光度测定，同时作空白。按标准曲线制备法进行测定黄花菜总黄酮的含量。树脂的预处理：用（）乙醇浸泡后醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止，水清洗净乙醇，用（）溶液洗，水洗至为中性，用（）溶液洗，水洗至为中性。薄层层析分离将黄花菜中提取的黄酮物质，进行硅胶薄层层析展开分析（板×），硅胶展开剂为丙酮和）正己烷混合溶剂（，显色剂为茴香醛乙醇浓硫酸的混合溶液。黄花菜中黄酮类化合物抗氧化性的测定对羟基自由基的清除参照文献，按的改进方法进行测定。用自由基的清除试验标准曲线的建立（）用最小二乘法进行线性回归，得芦丁浓度和吸，光度的关系曲线的回归方程为：相关系数。黄酮类化合物含量测定按的方法

8、进行黄花菜中总黄酮类物质含量的测定，最后得到的结果为黄花菜中总黄酮类物质含量为。薄层层析结果薄层层析显色结果见表。只有两个点且两个点迁移的距离相接近，说明样点的物质和标样物质的结构相接近，也说明黄酮类物质中包含芦丁。食品研究与开发抑制率（）科学研究表薄层分析各显色点的值浓缩样液样品芦丁（）黄酮提取液抗氧化活性的测定黄酮类化合物起抗氧化作用的机理有两种：黄酮醇可与金属生成螯合物，螯合作用发生在羟基酮基上，当环在位上是羟基时，螯合作用则发生环上的邻醌结构也有络合金在羟基酮基上。属的性能。黄酮醇的作用机理主要是作为自由基的受体而阻断自由基的连锁反应。影响黄酮类化合物抗氧化活性的因素，最主要的环中的邻

9、是羟基化的程度和羟基的位置。一般来说，二羟基对黄酮类化合物的抗氧化活性起主要作用。黄的反应相当于一个连锁反应在终结酮类与和的反应中起着氢供体的段的反应，在清除和作用，使具有高度氧化性的自由基还原，从而达到清除的目的。对羟基的清除自由基产生体参照反应的方法建立系模型。与二价铁离子混合后产生的，反应为：具有很高的反应活性，存活时间短，但在反应体系中加入水杨酸，能并产生有色产物：该产物在处有效地捕捉功能的被测物，有强吸收，若加入具有清除但会与，从而使有色产物的生成量减少。采用水杨酸竞争固定反应时间法，在处测量含被测物反应液的的吸光度，并与空白液比较，便能测定被测物对清除作用。及含的黄酮提取液对羟比较

10、黄酮提取液、基的清除。先准备好浓度相同（）的黄酮提取液和用水溶解的的溶液，然后分别取以上两种溶液，测定吸光度，计算出抑制率（见图）。由图可知浓度相同的黄酮提取液对羟基的抑制率高于的溶液对羟基的抑制率；并且随浓度的增大抑制率也增大，抗氧化效果就越好。结果表明：酚羟基清除率大于烯醇羟基的清除率，即黄酮大于。分别取浓度相同（）的黄酮提取液在邻苯三酚体系中，邻苯三酚的自身氧化速度比较快，在加入了提取液后，由于黄酮类化合物含有活泼的、位酚羟基，能提供活泼的氢，从而阻断自由基，和用水溶解的的溶液各，混合在一起后再测定吸光度，计算出抑制率（见图）。图不同浓度黄酮提取液对超氧自由基的抑制率图黄酮提取液、及含的

11、黄酮提取液对羟基的清除率的比较，由图中可明显看出，含的黄酮提取液对羟基的抑制率都比较高。可见，加入对提高对羟基的抑制率起到了很好的增效作用。黄酮提取液的溶液抗氧化效果：黄酮提取液黄酮提取液的溶液黄酮提取液的溶液黄酮提取液溶液的抗氧化效果甚至为溶液的抗氧化效果的倍还多。但是黄酮提取液溶液的抗氧化效果却同溶液的抗氧化效果差不多。对超氧自由基的清除生物类黄酮醇主要通过个途径达到抗癌，防癌的作用，即抗自由基作用，直接抑制癌细胞生长，抗致作用最强，链锁反形成最早，癌因子。的形成即可中断，应循环最持久，清除了，就和其它活性可以从根本上预防体内形成过多的氧自由基，达到防衰，抗癌，抗心血管病的目的。科学研究食

12、品研究与开发壳聚糖对甘蔗汁澄清效果的研究杜敏华（南阳师范学院生命科学与技术学院，河南南阳）摘要：处理后的甘蔗汁在处有最大吸收波长。用壳聚糖对甘蔗汁进行澄清试验，结果表明，壳聚糖用量为，温度时的工艺条件处理甘蔗原汁时，甘蔗原汁的透光率能达到以上，甘蔗原汁中的可溶性固形物含量基本不变。正交试验显示，壳聚糖对甘蔗汁的最适工艺条件是壳聚糖用量为，温度为，甘蔗原汁为。关键词：壳聚糖；甘蔗汁；澄清，）（，：，；：壳聚糖是由甲壳素经脱乙酰化反应而得到的一种生物高分子。壳聚糖线性分子链上具有游离氨基，其作者简介：杜敏华（），男，硕士，副教授，主要从事生物学教学及食品开发的教学和研究工作。氮原子上还有一对未结合

13、电子，使其呈现弱碱性，能从溶液中结合一个氢原子，从而使壳聚糖成为带阳电荷的聚电解质，显示出优异的絮凝作用。壳聚糖作为生物体产物，具有良好的生物相容性、适用性与安全性，!反应，因此，抗氧化是通过供氢来完成清除反应，试验结果见图。由图可见，随着黄酮提取液浓度的提高，其对超氧自由基的抑制率也逐渐提高并呈正相关。结论本实验确定了黄花菜中黄酮类化合物的提取条刘仲则中草药黄酮类化合物心血管活性成分概述中草药，（）：云学英，陈其秀野生苦菜中几种微量营养元素含量的研究内蒙古农牧学院学报，（）：张立新，杭瑚，王宗花，等某些常见蔬菜抗氧活性的研究食品科学，（）：贾冬英，乔玉兰，谭敏用正交法探讨苦荞麦及籽壳中总黄酮（芦丁）的乙醇提取工艺食品科学，（）：黄阿根