nc膜简介及生产

1、硝酸纤维素膜（NC膜）得简介与生产原理概念硝酸纤维素膜（nitroce 1 lulose filterme mb ra n e,简称NC膜），在胶体金试纸中用做C /T线得承载体，同时也就是免疫反应得发生处。NC膜就是生物学试验中Z ui重要得耗材之一。NC膜得生产原理匀浆配比购买回来得原料硝酸纤维素粒子就是一种非常普遍得有机化学物，溶解形成混浆，在该浆体内,通过加入一定比例得试剂来调整zu 1后形成得膜得性质，一般主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解得一个缓冲体系内。不同得厂家加入得溶液配方不一样，导致了产品得差异。滚筒铺膜配好得匀浆通过滚筒，形成了一张薄膜，平摊在十分光滑

2、得平面载体上。过程与造纸非常相 似。成型当匀浆内得成型剂开始挥发，膜逐步干燥成型。同时在这个过程中由于温度比较高，有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型，同时补充配方溶液得形式，来避免一些有效成分得蒸发.切割通过以上步骤生产出来得膜就是呈一个宽度极大得产品，宽度得大小直接与滚筒得大小相关滚筒越大生产越方便，但设备得成本也越高、宽膜要经过切割才能成为我们购买到得25mm或18mm （或20 mn）宽得膜，而长度上，成品卷膜与宽膜得长度就是相同得、理论上可以让 厂家切成您需要得任意宽度，但这样会造成原料得浪费与人力成本得增加，后来厂商在与试纸生产厂家得协调过程中，综合用料成本与生产便利性基本确定

3、了上面说得宽度，以次为标 准。从生产过程，我们可以得知，NC膜本身已经添加了表面活性剂来改善亲水能力，而且已经存在有一定得缓冲系统（虽然对纸条测试影响不会很大）。？NC膜得选择8um,但另一个供膜得选择涉及到一个膜得分类标准问题，一个供应商可能提供这个膜就是 应商告诉您膜就是135 S得。这之间得区别与就是什么？um指得就是膜孔径， 而从上面膜得生产过程，我们可以瞧出，膜得孔径实际上就是没有办法 界定得。由于干燥成型等过程得非均一，膜得孔径也就是非均一得、膜孔径得说法实际上就是沿用了一直以来得一个形象称呼、而以秒为单位得定义为，每4cm膜，水得层析时间就是以下我们将采* *s、该单位已经越来越

4、被各大厂商所接受，成为了一个通用得比较标准、用s单位来进行交流。？换算情况大致为 不同秒数得膜对反应有什么影响呢？首先 为4 cm得膜， 每隔1cm做一个标记， 发现液体在膜上得运动就是呈减速前行得:8 um=l 35s;6 um =180s张长度 那么您将会180 S ）在同,非，我们分析一下液体在膜上得运动过程。当液体运动过标记处时记录时间点、.而两张不同秒数得膜（例如135s, 一时间标记点处得运动速度不同、这个试验用清水做不好观察，可以考虑用色素水溶液 常明显。那么从这个试验可以瞧出，在通过同一 T线喷点位置时，金溶液通过得速度就是快速膜慢 速膜。那么通过速度越快与包被在T线得物质反应

5、时间也就越短，读数快，那么灵敏度也就越低。反之，反应时间长，读数慢，也就灵敏度高。同时还有一个问题就是，反应时间越长，发生非特异性结合得可能性就越大，所以过长时间得反应不一定就能够真正得提升灵敏度.所以这里就有一个读数时间/反应灵敏度/非特异性结合得均衡。灵敏度，比较不同样本浓度情况下，T线得变化就是否与对照组同.一般每批次膜取前端一段用来测试即可。由于制造过程得不均一性，不同批号得灵敏度会有一定差异，当大批量使用时，这种差异影响就是非常大得，那么就要按照灵敏度表现将不同批号得膜进行分类.在膜得S TOCC中要能够轻易得分辨出来。当进入后期生产调用时，就能根据这些分类，按照订单要求取用不同批号

6、得膜，或者用强灵敏度得原料与差灵敏度得膜来搭配。膜得质控方式本节适合用膜量较大得公司用户参考。对于一卷膜可以用上几个月得用户来说，厂家 得质控标准已经完全能满足您得要求，而不需要自己再做相关得质控。膜得质控虽属于 原辅料QC职能,但由于其专业性强，一般都由小样调试人员来执行。 膜入原料库后需要进行如下检验工作 ：1、 查收C 0A在购买时，供应商会随产品为每个lot得膜提供一张纸质得出厂质量证书 ，该证书被称 为COA.如果您已经购买某一批次得膜， 而没有索取相应得证书， 如果有需要可提供 批号 向厂家要求补发。其实在很多行业都有厂商为自己得产品附上COA得习惯。C0A般只提供给大客户，对小客

7、户就是没有意义得.其内容主要就是厂家在产品出厂时做过一些测试得罗列。作用可以理解为质量凭证与测试数据参考。膜厚度与宽度。长度不需要检测。使用中可以关几个测量点检测后算平均。 得扩散性能，点出来得C 一般都不会有什么大问题。2、检查物理性能 膜得物理性能主要就是2个参数， 注长度上就是否有断面重接现象 ，断面多费料则多，少数发生.厚度，由螺旋测微尺，选择膜生产得必测参数。主要表现为厚度不均匀影响生物原料在膜上/T线宽窄不一，另外也影响爬速。宽度，普通直尺测量。物理性能 毕竟检测标准客观，易把握.没有条件执行得厂家可省略.跑水性能样本采用含有有色食用色素得水溶液，目得就是容易观测，需制作一个简易支

8、架。操作:注入足够溶液到下部槽内，将不同批次膜每隔1cm做一次标记（总长大于 4 C m） 并放到倾斜支架，整个支架下端放入溶液槽，膜开始吸液，计时。记录每个标记处得通过时刻， 并与对照组比较。跑板时，理论上溶液呈水平线形式上吸，观测就是否有波浪倾斜或包围润 湿等反常现象。点样测试/T线出现时间就是否与对C/T线出线时间，其她试验条件相同情况下，记录与比较C 照有差异。灵敏度，比较不同样本浓度情况下,T线得变化就是否与对照组同。一般每批次膜取前端一段用来测试即可。由于制造过程得不均一性，不同批号得灵敏度会有一定差异，当大批，按量使用时，这种差异影响就是非常大得，那么就要按照灵敏度表现将不同批号

9、得膜进行分类。 在膜得STOCK中要能够轻易得分辨出来。当进入后期生产调用时，就能根据这些分类 照订单要求取用不同批号得膜，或者用强灵敏度得原料与差灵敏度得膜来搭配。关于膜得批内差。批内差就是肯定存在得，只就是差距大小得问题，依据一般得测试条件就是很困难获得详细得数值，因为您不可能对每一卷膜得每一段都做详细得测试.减小膜批内差得最有效方法就是不购入边缘膜带.前面说过膜得生产方式，生产出得半成品就是宽幅很大得一个膜面，要通过截面裁切才能获得25mm或者20mm得宽度。那么就有中间部分，与边缘部分之分、越靠近中间部分，膜得均匀性越好，边缘部分则相对要差，就造成了批内差。一般可以通过C O A获得具

10、体位置信息，例如 M I LL IP ORE就在切割后用字母 A, B ,C来表示切出得窄膜在宽幅膜中得位置。如果就是试用某个型号得膜小样，还需要在以上检测后加入膜加速老化试验，包括膜单独得老化试验与点好膜后产品得老化试验，具体试验方法请参瞧我以前写得研发思路一文。膜得深入探讨与应用技巧1、蛋白与膜得结合原理蛋白与膜得结合原理，已知得结合力包括疏水作用力 H键静电作用力等，确切得结合原理并 不明确，主要靠假说来支撑.主要有两种假说：1）首先两者靠静电作用力结合 ，然后靠H键与疏水作用来维持长时间结合。2）首先两者靠疏水作用结合，然后靠静电作用来维持长时间结合。两条假说，都表明其结合过程分为两步

11、，首先结合与后面长时间结合。由于结合原理得不明确性，导致在这方面得工作非常依赖实践经验.2、膜对结合得影响1）膜孔径有些技术人员倾向使用膜孔径来区分不同得膜，但就是请注意这只仅于同一厂家得产品，如果就是不同厂家得产品，这种比较就是无意义得。膜孔径与层析速度得关系，已在上文描述.随着膜孔径减小，膜得实际可用表面积递增，膜结合蛋白得量也递增。估量表面积得参数为T线得时间也就越长,反应也就表面积比率（实际可用表面积与所用膜平面积得比率） 另外，膜孔径越小，层析速度也越小，那么金标复合物通过 越充分。综合以上两点，结论为膜孔径越小灵敏度越高。 但就是同时也减慢了跑板速度， 增加了非特 异性结合得机会，

12、也就就是假阳性越高、 所以要按照试验结果挑选适合实际项目得膜， 找到 合适得平衡点。2）不同厂家得膜差异 这个差异主要来源于两点：生产膜时，使用得聚合物与表面活性剂得来源，类型，数量不同。同理，在膜处理中这两类物质一般会对性能产生较大影响。处理过程不同.3、生物原料，缓冲溶液得试剂与配方1） 生物原料，作为CT线得生物原料使用情况各异，所以这里只做略述。首先，单克隆抗体与膜得结合优于多克隆抗体，主要时由于多克隆抗体有很多不同得表面位点，而各位点与膜得Z ui佳结合条件都有细微得差别，毫无疑问就增加了优化难度。其次 ， 分子量越大，蛋白越难结合到固相材料上.2）缓冲液大家最关心得可能就就是希望获

13、得一个性能优良得配方，包括缓冲液，封闭液等等处理溶液配方。？其实我也无法提供给您一个万用配方清单。因为不同得反应体系需要不同得配方 来支持，而不同机构得反应体系又有差异 .想获"鱼”先学”渔”、。为了不误导大家，我在 下面涉及到配方得问题上，仅提供思路，具体配方请自己摸索。缓冲液得构成一般就是：PBS （或其她缓冲体系）+作用物质（针对某一特定问题）+P H调整、我在参考过以前得各种资料后，个人意见为配方原则为宜简不宜繁，根据自己得需要 添加作用物质，原来得很多需要添加得作用物质，由于膜制造技术得改进已经不再需要。？推荐得缓冲体系为 0、01MPBS P H7-7、2,该缓冲体系对多

14、种抗原抗体都有良好得适应性。 ? 作用物质得情况大致罗列如下 ：少量NAC L,减少信号强度，消假阳.？ 有机醇（甲醇，异丙醇等）,润湿膜，减少膜带 有得静电，利于结合包被.个人不推荐，因制膜工艺改进 .?表面活性剂（TW2 0 ,TX100 ）, 增加亲水力，可避免线条中空现象，也可增色.? 糖，保护剂，减缓老化速度，也可以增加亲水力同上.？调PH到某个位置，可以消假阳。4、点样环境环境湿度对点膜过程非常重要 .最佳湿度一般在 45 65%.湿度过低，膜上容易聚集静电荷 ， 点膜容易出现散点，导致测试会出现疏水斑。湿度过高，膜上毛细作用加强，点膜容易引起 CT线变宽甚至扩散。为了保证点样时膜

15、湿度得均一性，一般在点样前把膜放到该湿度条件下 平衡一段时间。5、点样仪器与膜面情况得关系进口划膜式优于目前有两种点样方式， 划膜式与非接触点膜式、 非接触点膜式优于划膜式， 国产划膜式。因划膜式为软管将抗体划到膜表面，而膜本身得物理性质为软脆，划管会在其表面留下印痕、进口得划膜机由于使用得材料与控制系统较好，所以留下得划痕较轻， 而国产仪器较差，留下得划痕也就比较严重。划痕容易对层析得金标复合物形成阻力，导致假阳性。同时容易出现跑板时在 T线位置出现若有若无一条细线 （鬼线），而跑板结束后鬼线消失得奇怪现 象.6、膜得宽度与点样位置膜得宽度一般有18mm（o r 20mm与 25m m两种，

16、分别使用在做测试条与做测试板上。然而， 不同得T线点样位置将带来不同得灵敏度。点样位置上移，金标复合物通过T线位置时速度变慢，反应时间增加，灵敏度升高.反之灵敏度降低。这个方法可以用来改变灵敏度与消除假 阳性。7、溶液在膜上得扩散溶液在膜上得点样量一般情况下为1ml/c m溶液在膜上得扩散就是趋向两端得，喷点上去得就是均匀得抗体溶液，但当干燥时线条边缘得干燥速度高于中间，中间得抗体会不断向 两边扩散，所以干燥后抗体就是向线条得两端聚集得。一般情况下不影响您得试验。如果您 发现线条出现两端红，中间淡得现象，就要考虑这个问题了。可以加如上面说得作用物质来 解决。8、点膜前后得封闭作用从供应商处购买

17、回得膜基本上都就是已经优化处理好得，直接点膜就可使用、然而我们还就是经常会遇到关于封闭得讨论。其实封闭不象大家认为得那样，一封闭什么问题都解决了、老问题走了新问题又来了，而且更麻烦，我要说得就是慎用封闭。我极其反对点膜前封闭得做法。原因为厂家在生产膜时候，各种配方就是混合加入原浆得。而点膜前封闭时要将膜浸泡在封闭液内，必然扰乱了膜内正常得物质分布。由此引发了许多问题，也降低了工作效率。也有厂家遇到不封闭就无法包被上膜得问题，其实可以通过其她办法来解决，封闭必然就是下测。？我经常使用得封闭手法有两种：流动封闭，将作用物质处理在样品垫上。膜上定点封闭，将作用物质配成溶液喷点在膜得特定位置上。该方法需要使用BIODOT得AIRJE T喷头，可以将不合格得半成品大板重新复活。只要就是将封闭做在了膜上，就必然会对产品得 稳定性造成影响，具体得影响程度要通过稳定性测试来评判.9、膜得储存 刚生产出得膜一般含有 510%得水分。关于膜得老化机理 大。理论认为：膜得老化就是因为膜上得水分蒸发，使膜变得疏水，带电荷并变脆遇到这种问题，就需要在点膜后放置一段时间， 规格:15 X20cn? 孔径：产品简介： 本品外观洁白，膜正面呈光，不能点样，膜面有花斑或有粉性结构45,以保证膜得强度，并减少穿透损失， ，避免过份干燥，防止发脆，般要求就是避光，密封,过干或过湿都不利。在这种保存条件下，一般可