第02章微生物的培养与应用

1、第二章微生物的培养与应用一、单项选择题（本大题共15小题，每小题4分，共60分）1.（广东省东莞一中2019-2020学年期末）下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是成分含量成分含量NaNO23 gFeSO40.01 gK2HPO41 g葡萄糖30 g琼脂15 gH2O1 000 mLMgSO4 7H2O0.5 g青霉素0.1万单位A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基B.由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉C.本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若用该培养基分离能分解

2、尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3,并应加入尿素【答案】C【解析】从培养基成分看，配方中含有有琼脂等凝固剂，属于固体培养基；依用途划分，该培养基中加入青霉素，因此属于选择培养基，A正确；由培养基的原料可知，葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，培养的微生物可以是酵母菌或毛霉，B正确；本培养基中青霉素的添加是为了筛选能够抗青霉素的微生物，C错误；若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3,并应加入尿素，D正确。2.（山东省泰安一中2019-2020学年期中）培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微 生物培养及培养基的描述错误的是A.微生物培养基

3、的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂B.不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌【答案】A【解析】微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等，有的还需要生长因子等特殊的营养，固体和半固体培养基需要琼脂，液体培养基不需要琼脂，A错误；不论何种培养基，在各成分溶化后都要进行灭菌操作，灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌，B正确；筛选和分离微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，C正确；以尿素为唯一氮源的培养

4、基中加入酚红指示剂可以出现红色的环带D 正确。3 （广西省百色一中 2019-2020 学年期末） 下列关于 “土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验” 的叙述，错误的是A 该实验所用培养基是尿素为唯一氮源的选择培养基B 一般选用104、 105、 106 倍的稀释液进行平板培养C.每隔2 d统计一次菌落数，选取菌落数目稳定时的记录作为结果D 称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁进行【答案】 C【解析】为了能分离出分解尿素的细菌，培养基中只能含有尿素一种氮源，目的是淘汰不能分解尿素的其他微生物， A 正确；样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少，一般选用 104、 105、 10

5、6倍的稀释液进行平板培养， B 正确；每隔24 h 统计一次菌落数，选取菌落数目稳定时的记录作为结果， C 错误；为了减少被杂菌感染的机会，在称取土壤、稀释土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁进行， D 正确。4 （四川雅安中学2019-2020 学年期末）在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是A 分解尿素的细菌B 硝化细菌C.分解纤维素的细菌D.乳酸菌【答案】 C【解析】纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物，而在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素所以会出现透明圈，故C 项正确， A 、 B 、 D 项错误。 5 （云南昆明第三中学2019-

6、2020 学年期中）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。某同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于10A B C.D.【答案】 B【解析】在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法。刚果红与纤维素形成的红色复合物，在纤维素被分解后将不再存在，因此在培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可判断图示中的纤维素分解菌位于。6 （陕西西安交大附中 2019-2020 学年期中）从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是A. 土壤取样-梯度稀释-稀释涂布平板-发酵培养B. 土壤取样-选择培养-稀释涂布平板 -挑选菌

7、落C. 土壤取样-梯度稀释-选择培养-挑选菌落D. 土壤取样-梯度稀释-稀释涂布平板-选择培养-挑选菌落【答案】 B【解析】从土壤中筛选纤维素分解菌的正确的流程是：土壤取样-选择培养-稀释涂布平板 -挑选菌落，其中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，因此需要在稀释涂布平板之前进行，最后根据菌落的特征挑选纤维素分解菌。综上分析， B 项正确，A 、 C 、 D 三项均错误。7 （浙江杭州高级中学 2019-2020 学年期末）下列有关分解纤维素微生物的分离的叙述，错误的是A 纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵B 对分解纤维素的微生物进行了初步筛选后，无需再进行其他实验C.纤维素酶的测定方

8、法，一般是对所产生的葡萄糖进行定量测定D 纤维素酶是一种复合酶A 项正确；初步筛选只是分离纯化的第一【解析】纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种，步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产生纤维素酶的实验， B 项错误；纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定， C 项正确；纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1 酶、 CX 酶和葡萄糖苷酶， D 项正确。8 （福建莆田一中 2019-2020 学年期中）有关纤维素分解菌选择培养基正确的叙述是A 可以增加纤维素分解菌的浓度B 可以减少纤维素分解菌的浓度C.所用培养基是固体培

9、养基D 所用培养基是平板培养基【答案】A【解析】使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基可以增加纤维素分解菌的浓度，A 正确、 B 错误； 所用培养基是液体培养基，鉴定时需要使用固体培养基， C 错误；所用培养基是液体培养基，鉴定时需要使用固体培养基，D错误。9 （江西九江一中 2019-2020 学年期末）下列关于微生物培养的叙述，错误的是（）A 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物一般要按不同的稀释倍数进行分离B 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C.利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数D 接种时连续划线的目的是将聚

10、集的菌种逐步稀释获得单菌落【答案】 C【解析】土壤中各种微生物数量不同，大约 70%90%为细菌，放线菌和真菌较少，故为获得不同类型的微生物，一般要按不同稀释倍数进行分离， A 正确；测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同， B 正确；稀释涂布平板法能用于微生物的计数， C 错误；接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落， D 正确。10 （山东烟台二中 2019-2020 学年期末）下列关于微生物的培养和应用的叙述，错误的是（）A 测定培养液中微生物数量，可选用显微镜直接计数法B 若要测定活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数C. 一般用液体培

11、养基来分离和鉴定纤维素分解菌D 在筛选能分解纤维素的细菌的实验中，选择培养的目的是增大样品中菌株的浓度【答案】 C【解析】显微镜直接计数法是测定培养液中微生物数量的方法之一， A 正确；若要测定活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数， B 正确；在纤维素分解菌分离与鉴定实验中，用到的培养基按照物理状态为固体培养基， C 错误；在筛选能分解纤维素的细菌的实验中，选择培养的目的是增大样品中菌株的浓度，D 正确。11 （黑龙江大庆中学 2019-2020 学年期中）下列有关 “微生物的分离与培养 ”实验的叙述中，正确的是（）A 利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数B 对培养皿进行编号或

12、对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿底标记C.倒平板时，应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上D 将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养，防止培养液沾染试管壁引发污染【答案】 B【解析】利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离，但是不能对微生物进行计数，计数一般采用稀释涂布平板法， A 错误； 对培养皿进行编号或对菌种进行标注时， 应使用记号笔在皿底标记， B 正确；倒平板时，不能将打开的培养皿盖放到一边，以免微生物污染， C 错误；将好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养， D 错误。12 （辽宁鞍山一中 2019-2020 学年期中）下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是（）A 采

13、用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的菌落数B 当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D 在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果【答案】 C【解析】当两个或多个活菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。至少涂布3 个平板，作为重复组，取其平均值计数能增强实验的说服力和准确性。13 .（山西太原五中2019-2020学年期末）在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，

14、在 a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d 处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图所示。以下判断错误的是（）A. a处抑菌效果小于 b处B. b处的滤纸片没有沥干C. c处抗生素无效D. d为对照【答案】A【解析】培养皿中不同滤纸片四周透明圈的大小不同，透明圈越大，说明浸有的抗生素抑菌效果越好。a处的透明圈大于 b处；b处不是圆形的透明圈，可能是滤纸片没有沥干，抗生素流出滤纸片；c处无透明圈，说明c处抗生素对大肠杆菌无效；d为空白对照。14.（辽宁大连二十四中 2019-2020学年期末）筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经

15、稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见 卜表。菌种菌落直径：C（mm）透明圈直径：H（mm）H/C细菌I5.111.22.2细菌n8.113.01.6有关本实验的叙述，错误的是 （）A .培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D. H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异【答案】C【解析】筛选淀粉分解菌的培养基中，除淀粉提供碳源外，还需要氮源、水、无机盐等营养物质，A正确；筛选分离淀粉分解菌时需要将菌液进行一定程度的稀释才能涂布培养，B正确；据图分析可知，两个菌落均产生了透明圈，说明两种细菌

16、均能将淀粉酶分泌至细胞外，C错误；据表分析可知，H/C值越大，分解淀粉能力越强，该值的大小反映了两种细菌分解淀粉能力的差异，D正确。15 .（湖南岳阳一中2019-2020学年期中）现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（）成分KH 2PO4MgSO4 7H2ONaClCaSO4-2H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙/口加小0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%一一A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B.甲培

17、养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C.甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D.甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌【答案】B【解析】固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，需和其他生物结合在一起才能生存的是共生固氮菌， 甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中 不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。二、综合题（本大题共2小题，共40分）16 .（山西忻州一中2019-2020学年期末）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸 出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗

18、糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制 的生长，加入了链霉素的培 养基属于 培养基。（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有（答出两点即可）。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有 （答也两点即可）。(3)若在M 培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出 能 产 淀 粉 酶 的 微 生 物 。 加 入 的 显 色 剂 是 ， 该 方 法 能 筛 选 出 产 淀 粉 酶 微 生 物 的 原 理 是(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法

19、测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别是110、 140 和 149，取平均值 133；乙同学涂布了 3个平板，统计的菌落数分别是27、 169和 176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是【解析】本题主要考查微生物的培养与应用。(1)链霉素可抑制细菌生长，从功能上看，添加链霉素的培养基属于选择培养基。 (2)微生物正常生长需要的营养物质有无机盐、氮源、碳源等。氮源进入细胞后，可以用于合成含氮大分子物质，如核酸、蛋白质等。(3)淀粉遇碘液显蓝色，若淀粉被水解，则产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水

20、解，形成以菌落为中心的透明圈。 (4)用稀释涂布平板法统计菌落数目时，为保证统计结果的准确性，一般选择菌落数在30300的平板进行计数，取结果差别不大组别的平均值，进而得出计数结果。而乙同学的结果中， 1 个平板的计数结果与另 2 个相差悬殊，即乙同学的结果可信度低。【答案】 (1)细菌 选择 (2)碳源、无机盐 蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈(4) 乙同学的结果中，1 个平板的计数结果与另 2 个相差悬殊，结果的重复性差17 (黑龙江鹤岗一中 2019-2020 学年期中)如图表示，研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌技术的相关实验，请据图回答下

21、列问题：(1)进行过程和白目的分别是 和;图中弧线箭头上，”的具体操作是 。(2)进行培养基配制和灭菌时， 灭菌与调节pH 的先后顺序是 。 倒平板时， 待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在皿底上标明培养微生物的名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及 等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是 和 。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 。培养后，若出现色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。(4)研究者可以通过观察培养形成的菌落的 、隆起程度等特征，来判断培养基上是否感染了其他细菌。在实验中，研究者每隔 24 小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止 。【解析】分析过程图：从土壤中分离尿素分解菌的流程是土壤取