有机磷酸酯类的中毒与解救机能学实验

1、有机磷酸酯类的中毒与解救有机磷酸酯类的中毒与解救南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心 观察实验动物在有机磷酸酯类中毒时的症状，观察实验动物在有机磷酸酯类中毒时的症状，以及中毒时血液胆碱酯酶活力的抑制情况以及中毒时血液胆碱酯酶活力的抑制情况【目的与要求【目的与要求】南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心 根据阿托品、解磷定对有机磷酸酯类中毒的根据阿托品、解磷定对有机磷酸酯类中毒的解救效果及对血液胆碱酯酶活力的影响，分析两解救效果及对血液胆碱酯酶活力的影响，分析两药的解毒原理药的解毒原理 有机磷酸酯类通过多种途径吸收后，与胆碱酯酶呈有机磷酸酯类通过多种途径吸收

2、后，与胆碱酯酶呈难逆性结合，抑制胆碱酯酶活性，使其丧失水解乙酰胆难逆性结合，抑制胆碱酯酶活性，使其丧失水解乙酰胆碱的能力，造成胆碱能神经末梢释放的乙酰胆碱大量堆碱的能力，造成胆碱能神经末梢释放的乙酰胆碱大量堆积，产生一系列急性拟胆碱中毒症状积，产生一系列急性拟胆碱中毒症状 (M样和样和N样症状）样症状）【实验原理【实验原理】南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心 阿托品为选择性的阿托品为选择性的M胆碱受体阻断剂，很大剂量时胆碱受体阻断剂，很大剂量时还可阻断还可阻断Nl受体，可与乙酰胆碱竞争结合受体，可与乙酰胆碱竞争结合M、Nl 受体，受体，阻断乙酰胆碱对这些受体的激动作用，阻

3、断乙酰胆碱对这些受体的激动作用， 可以有效地解除可以有效地解除有机磷酸酯类中毒的有机磷酸酯类中毒的M样症状，是解救有机磷酸酯类中样症状，是解救有机磷酸酯类中毒的对症治疗药物毒的对症治疗药物南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心 碘解磷定碘解磷定 (PAM) 是有机磷酸酯类中毒的特效解救药，是有机磷酸酯类中毒的特效解救药，因其可使胆碱酯酶复活，恢复胆碱酯酶水解乙酰胆碱的因其可使胆碱酯酶复活，恢复胆碱酯酶水解乙酰胆碱的能力，因而能彻底解除有机磷酸酯类农药急性中毒的症能力，因而能彻底解除有机磷酸酯类农药急性中毒的症状和体征，但其对循环和呼吸的解救作用起效较慢，临状和体征，但其对循环

4、和呼吸的解救作用起效较慢，临床上常需配合阿托品类药物一起使用。是解救有机磷酸床上常需配合阿托品类药物一起使用。是解救有机磷酸酯类中毒的对因治疗药物酯类中毒的对因治疗药物【观察指标【观察指标】瞳孔瞳孔唾液唾液 呼吸呼吸 大小便大小便 肌张力肌张力 肌震颤肌震颤 胆碱酯酶活力胆碱酯酶活力 南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心（1 1）家兔）家兔2 2只只, ,称重称重, ,记录用药前的观察指标记录用药前的观察指标. .耳缘静脉取血耳缘静脉取血, ,测定测定 AChEAChE活力活力南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心【实【实 验验 方方 法法 与与 步步 骤

5、骤】（2 2）分别腹腔注射）分别腹腔注射3 3敌百虫敌百虫3ml/Kg,3ml/Kg,出现明显中毒症状出现明显中毒症状, ,记录观察记录观察 指标。耳缘静脉取血指标。耳缘静脉取血 , ,测定测定AChEAChE活力活力（3 3）解救：甲兔）解救：甲兔 耳缘静脉注射耳缘静脉注射0.20.2硫酸阿托品溶液硫酸阿托品溶液1.0 ml1.0 mlkg;kg; 乙兔乙兔 耳缘静脉注射耳缘静脉注射2.52.5解磷定解磷定2.0 ml2.0 mlkgkg 记录观察指标记录观察指标. .耳缘静脉取血耳缘静脉取血 , ,测定测定AChEAChE活力活力 步骤步骤 操操 作作 标准管标准管(m1) 测定管测定管(

6、m1) 空白管空白管(m1)12345678910 pH7. 2磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液全血全血37水浴预热水浴预热3min乙酰胆碱底物应用液乙酰胆碱底物应用液37水浴预热水浴预热20min碱性羟胺溶液碱性羟胺溶液乙酰胆碱底物应用液乙酰胆碱底物应用液室温静置室温静置2min33.3盐酸溶液盐酸溶液10三氯化铁溶液三氯化铁溶液 1.00.11.04.02.02.0 1. 00.11.04.02.02.0 l.00.14.01.02.02.0 全血胆碱酯酶活力的比色测定全血胆碱酯酶活力的比色测定南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心标准管吸光度标准管吸光度测定管吸光测定管吸光度度

7、标准管吸光度标准管吸光度 全血全血AChE活力单位数活力单位数 注：以注：以1m1血液在规定条件下能分解血液在规定条件下能分解lmo1乙酰乙酰 胆碱为胆碱为1个胆碱酯酶活力单位。个胆碱酯酶活力单位。分光光度计分光光度计525nm波长比色，空白管调零波长比色，空白管调零南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心有机磷酸酯类中毒与解救的实验结果有机磷酸酯类中毒与解救的实验结果编号编号 瞳孔瞳孔 唾液唾液 呼吸呼吸 大小便大小便 肌张力肌张力 肌震颤肌震颤 AChE活力活力 用药前用药前甲甲 敌百虫敌百虫 阿托品阿托品 用药前用药前乙乙 敌百虫敌百虫 解磷定解磷定 南华大学医学院机能学

8、实验中心南华大学医学院机能学实验中心(1)(1)敌百虫属于剧毒类杀虫剂，且可从皮肤吸收，如与手敌百虫属于剧毒类杀虫剂，且可从皮肤吸收，如与手等接触后，应立即用水清洗等接触后，应立即用水清洗(2)(2)给家兔实施腹腔注射敌百虫后，给家兔实施腹腔注射敌百虫后，15min15min时仍未出现中毒时仍未出现中毒症状，可再追加症状，可再追加1 13 3剂量的敌百虫溶液剂量的敌百虫溶液(3)(3)本实验为分析阿托品和解磷定的作用机制而设。应切本实验为分析阿托品和解磷定的作用机制而设。应切记，在临床实际中，须将阿托品与解磷定配合使用，才能记，在临床实际中，须将阿托品与解磷定配合使用，才能获得最好的解毒效果获

9、得最好的解毒效果（4 4）用苦味酸标记实验家兔）用苦味酸标记实验家兔南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心【注意事项】南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心【分析讨论】 有机磷酸酯类呈油状或结晶状，淡黄有机磷酸酯类呈油状或结晶状，淡黄色或棕色，稍有挥发性，有蒜味，除敌百色或棕色，稍有挥发性，有蒜味，除敌百虫外一般难溶于水，碱性条件下易分解失虫外一般难溶于水，碱性条件下易分解失效，可经胃肠道、呼吸道、皮肤和粘膜吸效，可经胃肠道、呼吸道、皮肤和粘膜吸收，吸收后收，吸收后6-126-12小时血液浓度达到高峰小时血液浓度达到高峰南华大学医学院机能学实验中心南华大学医

10、学院机能学实验中心【分析讨论】 有机磷酸酯类中毒可分为急性和慢性有机磷酸酯类中毒可分为急性和慢性中毒，慢性中毒多见于长期接触有机磷的中毒，慢性中毒多见于长期接触有机磷的人群，主要表现为神经衰弱症状，目前无人群，主要表现为神经衰弱症状，目前无特效治疗方法特效治疗方法 急性有机磷中毒是我国发病人数最多急性有机磷中毒是我国发病人数最多的急性农药中毒，每年达的急性农药中毒，每年达5-75-7万人，多由于万人，多由于误服有机磷所致误服有机磷所致一、有机磷酸酯类一、有机磷酸酯类 中毒机制中毒机制有机磷酸酯类有机磷酸酯类 +AChE+AChE 磷酰化磷酰化AChEAChE 水解水解AChAChAChACh南

11、华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心【分析讨论】M M样症状样症状 南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心眼：瞳孔缩小、眼球疼痛眼：瞳孔缩小、眼球疼痛腺体：唾液腺、汗腺分泌增加，流汗流涎腺体：唾液腺、汗腺分泌增加，流汗流涎呼吸道：支气管平滑肌收缩，呼吸困难呼吸道：支气管平滑肌收缩，呼吸困难胃肠道：胃肠道平滑肌收缩，有机磷对胃肠胃肠道：胃肠道平滑肌收缩，有机磷对胃肠 粘膜的刺激，恶心呕吐，腹痛腹泻粘膜的刺激，恶心呕吐，腹痛腹泻M M样症状样症状 南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心泌尿系统：膀胱逼尿肌收缩，小便失禁泌尿系统：膀胱逼尿肌收缩，

12、小便失禁心血管系统：血压降低，心率减慢心血管系统：血压降低，心率减慢N N样症状样症状 南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心N Nl l受体激动：神经节兴奋受体激动：神经节兴奋N N2 2受体激动：肌束颤动，肌张力增高受体激动：肌束颤动，肌张力增高中枢神经系统症状中枢神经系统症状 南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心脑内乙酰胆碱增加，影响神经冲动的传递脑内乙酰胆碱增加，影响神经冲动的传递 先兴奋后抑制先兴奋后抑制南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心二、有机磷中毒的分级二、有机磷中毒的分级 轻度中毒：轻度中毒：M M样症状，样症状，AC

13、hEAChE活力活力50-70%50-70%中度中毒：中度中毒：M M样症状加重，出现样症状加重，出现N N样症状，样症状，AChEAChE活力活力30-50%30-50%重度中毒：除重度中毒：除M M样和样和N N样症状外，还出现抽样症状外，还出现抽搐，昏迷，脑水肿等中枢神经系统症状，搐，昏迷，脑水肿等中枢神经系统症状，AChEAChE活力低于活力低于30%30%南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心三、有机磷中毒的防治三、有机磷中毒的防治 1、解除病因，减少吸收：脱离中毒现场，洗、解除病因，减少吸收：脱离中毒现场，洗皮肤，洗眼，洗胃导泻皮肤，洗眼，洗胃导泻2、特效药物解救

14、：联合使用阿托品和解磷定、特效药物解救：联合使用阿托品和解磷定预防为主，加强农药管理和防护等预防为主，加强农药管理和防护等 拮抗拮抗AChACh对对M M胆碱受体的激动作用，解除胆碱受体的激动作用，解除M M样症状和部分中枢症状，大剂量阻断样症状和部分中枢症状，大剂量阻断N Nl l受受体，对抗神经节兴奋，但对体，对抗神经节兴奋，但对N N2 2受体无效，也受体无效，也无复活胆碱酯酶的作用无复活胆碱酯酶的作用阿托品：阿托品：早期、足量、反复，早期、足量、反复， “阿托品化阿托品化”南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心 “ “阿托品化阿托品化”表现为瞳孔较前扩大、表现为瞳孔较前扩大、口干、皮肤干燥，肺部啰音消失及心率加口干、皮肤干燥，肺部啰音消失及心率加快快(90(90100100次次min)min)等。如出现瞳孔扩大、等。如出现瞳孔扩大、神志模糊、烦躁不安、抽搐、昏迷、尿潴神志模糊、烦躁不安、抽搐、昏迷、尿潴留，心动过速、高热等，提示有阿托品中留，心动过速、高热等，提示有阿托品中毒可能，应停药观察毒可能，应停药观察南华大学医学院机能学实验中心南华大学医学院机能学实验中心解磷定解磷定 磷酰化磷酰化AChEAChE + +解磷定解磷定 磷酰化解磷定磷酰化解磷定 + AChE+ AChE水解水解AChAChAChACh 南华大学医学院机能学实