实验维生素C的定量测定

1、实验实验8 维生素维生素C的定量测定的定量测定一、实验目的n1、学习维生素C定量测定法的原理和方法。n2、进一步熟悉、掌握微量商定法的基本操作技术。二、2,6-二氯酚靛酚滴定法定量二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素测定维生素C的原理的原理n维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型，还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色 。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。 CCCCCCHOHH

2、OHOOH OHO2NOHClClO+CCCCCCOHOHOOH OHO2NOHClClO+OH(蓝色)还原型抗坏血酸还原型抗坏血酸氧化型脱氢抗坏血酸氧化型脱氢抗坏血酸2，6二氯酚靛酚二氯酚靛酚还原型还原型2，6二氯酚靛酚二氯酚靛酚(红红 色色)HOH+ (无色）NClClO 三、试剂三、试剂n2%草酸溶液草酸溶液: 草酸草酸2g溶于溶于100ml蒸馏水中。蒸馏水中。n1%草酸溶液草酸溶液: 草酸草酸1g溶于溶于100ml蒸馏水中。蒸馏水中。n 标准抗坏血酸溶液（标准抗坏血酸溶液（1mg/ml）: 准确称取准确称取100mg纯纯 抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则

3、不能用）溶于色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至草酸溶液中，并稀释至100ml，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。制。 三、试剂三、试剂n0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于二氯酚靛酚溶于150ml含有含有52mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至的热水中，冷却后加水稀释至250ml，贮于棕色瓶中冷藏（，贮于棕色瓶中冷藏（4）约）约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。血酸溶液标定。 四、材料四、材料 苹果、辣椒等。苹果、辣椒等。 五、器材五、器材 锥形瓶（

4、锥形瓶（100ml），组织捣碎器，吸量管（），组织捣碎器，吸量管（10ml），）， 漏斗，滤纸，微量滴定管（漏斗，滤纸，微量滴定管（5ml），容量瓶（），容量瓶（100ml，250ml）。）。 六、提取六、提取 水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20g，加入，加入20ml 2%草酸，用研钵研磨，草酸，用研钵研磨，四层纱布过滤，滤液备用。纱布可用少量四层纱布过滤，滤液备用。纱布可用少量2%草酸洗几次，合并滤液，滤液总体积草酸洗几次，合并滤液，滤液总体积定容至定容至50ml。 七、标准液滴

5、定七、标准液滴定 准确吸取标准抗坏血酸溶液准确吸取标准抗坏血酸溶液1ml置置100ml锥形锥形瓶中，加瓶中，加9ml 1%草酸，用微量滴定管以草酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10ml 1%草酸作空白对照，按以上方法滴定）。草酸作空白对照，按以上方法滴定）。 八、样品滴定八、样品滴定n准确吸取滤液两份，每份准确吸取滤液两份，每份10ml, 分别放入分别放入2个锥形瓶个锥形瓶内，滴定方法同前。另取内，滴定方法同前。另取10ml 1%草酸作空白对照草酸作空白对照滴定。滴定。 九、计算九、计算n式中：式中：VA为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数； VB为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数；为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数； C为样品提取液的总毫升数；为样品提取液的总毫升数； D为滴定时所取的样品提取液毫升数；为滴定时所取的样品提取液毫升数；