第24和25章病毒的感染与免疫检查方法

1、第第24章章 病毒的感染与病毒的感染与免疫免疫重点内容重点内容掌握：病毒的传播方式；掌握：病毒的传播方式； 慢性感染、潜伏感染、慢发病毒感染慢性感染、潜伏感染、慢发病毒感染的概念；的概念； 干扰素的概念，分型，来源及抑制病干扰素的概念，分型，来源及抑制病毒机理；毒机理； 病毒感染的特异性免疫获得方式。病毒感染的特异性免疫获得方式。病毒的感染与免疫一、病毒感染的传播方式一、病毒感染的传播方式水平传播水平传播 病毒在人群不同个体间的传播。病毒在人群不同个体间的传播。呼吸道、消化道皮肤、粘膜AB第一节第一节 病毒的致病作用病毒的致病作用垂直传播垂直传播 某些病毒经胎盘或产道由亲代某些病毒经胎盘或产道

2、由亲代 传给子代的传播方式。传给子代的传播方式。二、病毒感染的致病机理二、病毒感染的致病机理( (一一) ) 对宿主细胞的致病作用对宿主细胞的致病作用n 杀细胞效应杀细胞效应n 稳定状态感染稳定状态感染n 包涵体形成包涵体形成n 细胞凋亡细胞凋亡n 基因整合与细胞转化基因整合与细胞转化1) 杀细胞效应杀细胞效应 (cytocidal effect)病毒在感染细胞内增殖，引起细胞的裂解死亡病毒在感染细胞内增殖，引起细胞的裂解死亡正常细胞正常细胞细胞病变作用细胞病变作用(CPE) 2) 稳定状态感染稳定状态感染 (steady state infection)为特异性为特异性Ag或或CTL细胞识别

3、细胞识别新抗原新抗原多核巨细胞多核巨细胞多核巨细胞多核巨细胞3) 包涵体包涵体 (inclusion body)概念：概念：某些受某些受病毒感染的细胞内，用普通光学显微镜病毒感染的细胞内，用普通光学显微镜可看到有与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭圆形可看到有与正常细胞结构和着色不同的圆形或椭圆形的斑快。的斑快。意义意义：病毒感染的诊断依据。病毒感染的诊断依据。狂犬病毒包涵体（狂犬病毒包涵体（Negri body）4) 细胞凋亡细胞凋亡 (apoptosis)诱导因子（如病毒等）诱导因子（如病毒等）细胞细胞凋亡基因激活凋亡基因激活细胞膜鼓泡细胞膜鼓泡细胞核浓缩细胞核浓缩染色体染色体DNADNA降

4、解降解电泳时有电泳时有阶梯式条带阶梯式条带形成凋亡小体形成凋亡小体增加基因突变的机会增加基因突变的机会细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核细胞核5) 基因整合与细胞转化基因整合与细胞转化结果：细胞转化或肿瘤形成结果：细胞转化或肿瘤形成与人类肿瘤相关的病毒与人类肿瘤相关的病毒病毒科与人类相关的肿瘤病毒嗜肝DNA病毒肝细胞癌HBV疱疹病毒鼻咽癌EBVBurkitt淋巴瘤EBVKaposi肉瘤HHV-8乳多空病毒乳头状瘤HPV亚型宫颈癌HPV-16、18逆转录病毒成人T细胞白血病HTLV-1( (二二) ) 病毒感染的免疫病理作用病毒感染的免疫病理作用3 3、病毒对免疫系统的损伤、病毒对免疫系统的损伤2

5、2、有些病毒感染后，呈稳定状态感染，使、有些病毒感染后，呈稳定状态感染，使细胞失去某些功能或出现新抗原细胞失去某些功能或出现新抗原4 4、免疫复合物引起损伤、免疫复合物引起损伤1 1、抗体增强病毒感染作用、抗体增强病毒感染作用 FabFab+ +病毒病毒抗体抗体 FcFc+ +单核巨噬细胞单核巨噬细胞三、病毒感染的类型三、病毒感染的类型病毒进入机体不引起病毒进入机体不引起 临床症状的感染临床症状的感染病毒感染后引起疾病病毒感染后引起疾病隐性感染隐性感染显性感染显性感染有有无无临临床床症症状状机体可获得特异性免疫机体可获得特异性免疫; ;向外向外播散病毒，成为重要传染源播散病毒，成为重要传染源病

6、毒进入机体后，在细胞病毒进入机体后，在细胞 内增殖，经数日至数周的内增殖，经数日至数周的 潜伏期后发病。潜伏期后发病。病毒在机体持续存在数月病毒在机体持续存在数月 至数年，甚至数十年。至数年，甚至数十年。急性病毒感染急性病毒感染持续性病毒感染持续性病毒感染感感染染过过程程时时间间慢性感染慢性感染显性或隐性感染后未完全清除，显性或隐性感染后未完全清除，血中可持续检测出病毒，常反复血中可持续检测出病毒，常反复发作，迁延不愈。发作，迁延不愈。 如如HBV，HCV潜伏感染潜伏感染显性或隐性感染后病毒基因存在于显性或隐性感染后病毒基因存在于细胞内，在一定条件下，病毒被激细胞内，在一定条件下，病毒被激活开

7、始复制，使疾病复发。可反复活开始复制，使疾病复发。可反复激活。如激活。如 HSV、VZV慢发病毒慢发病毒感染感染慢性发展的进行性加重的病毒感慢性发展的进行性加重的病毒感染，较为少见但后果严重，潜伏期染，较为少见但后果严重，潜伏期长。如长。如HIV，朊粒，朊粒寻常病毒寻常病毒 prion麻疹病毒麻疹病毒持持续续性性感感染染 急性病毒急性病毒感染的迟感染的迟发并发症发并发症急性感染后急性感染后1年或数年，发生致年或数年，发生致死性的并发症。如麻疹病毒死性的并发症。如麻疹病毒第二节第二节 抗病毒免疫抗病毒免疫1、屏障作用、屏障作用2、吞噬细胞的作用、吞噬细胞的作用3、干扰素干扰素获得性非特异性免疫获

8、得性非特异性免疫一、非特异性免疫一、非特异性免疫干扰素干扰素定定 义义：由病毒或其他干扰素诱生剂刺激人或动物由病毒或其他干扰素诱生剂刺激人或动物 细胞所产生的一类具有细胞所产生的一类具有抗病毒抗病毒、抗肿瘤和、抗肿瘤和 免疫调节作用的糖蛋白。免疫调节作用的糖蛋白。种种 类：类：种类种类 产生细胞产生细胞 抗病毒抗病毒 抗肿瘤抗肿瘤 免疫调节免疫调节 人白细胞人白细胞 强强 弱弱 弱弱 人成纤维细胞人成纤维细胞 强强 弱弱 弱弱 T细胞细胞 弱弱 强强 强强I型型广谱抗病毒，但只广谱抗病毒，但只能抑制病毒，且有能抑制病毒，且有种属特异性种属特异性干扰素诱生机理干扰素诱生机理活化活化翻译翻译人体内

9、干扰素基因人体内干扰素基因干扰素mRNA干扰素干扰素干扰素诱生剂干扰素诱生剂n非直接灭活病毒非直接灭活病毒 n诱生抗病毒蛋白诱生抗病毒蛋白(AVP) 自身和邻近细胞自身和邻近细胞 降解病毒降解病毒mRNA 抑制病毒蛋白合成抑制病毒蛋白合成 抑制病毒组装、释放抑制病毒组装、释放 抑制病毒复制抑制病毒复制 早期中断病毒感染，阻止病毒扩散早期中断病毒感染，阻止病毒扩散25合成酶合成酶蛋白激酶蛋白激酶磷酸二酯酶磷酸二酯酶抗病毒机理抗病毒机理细胞免疫细胞免疫体液免疫体液免疫按种类：按种类：IgG IgM IgA按功能：中和抗体、补体结合抗体按功能：中和抗体、补体结合抗体中和抗体：免疫球蛋白的类型中和抗体

10、：免疫球蛋白的类型抗病毒免疫的主要成分抗病毒免疫的主要成分TD、TC 、NK、M二、特异性免疫二、特异性免疫第第25章章 检查方法与防治检查方法与防治原则原则重点内容重点内容n熟悉：检测病毒抗原及抗体的方法；熟悉：检测病毒抗原及抗体的方法； 病毒感染的特异性预防。病毒感染的特异性预防。第一节第一节 病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法一、标本采集与送检一、标本采集与送检标本采集：标本采集： 早期；不同病变取不同标本早期；不同病变取不同标本标本处理：标本处理： 无菌操作；杂菌标本无菌操作；杂菌标本+ +抗生素抗生素冷藏速送：冷藏速送： 快速送检；冷藏（快速送检；冷藏（-70-70）血清学标本：血

11、清学标本： 双份血清，效价升高双份血清，效价升高4 4倍有诊断价值倍有诊断价值二、分离与鉴定二、分离与鉴定动物接种动物接种鸡胚接种鸡胚接种组织培养组织培养器官培养器官培养移植培养移植培养细胞培养细胞培养原代细胞培养原代细胞培养二倍体细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养传代细胞培养培养方法培养方法病毒在细胞内增殖的指标病毒在细胞内增殖的指标1、CPE2、红细胞吸附、红细胞吸附正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞病毒数量和感染性测定病毒数量和感染性测定1、蚀斑试验、蚀斑试验 病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑

12、斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位形成单位(PFU) ，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示。升的蚀斑形成单位来表示。2、ID50 或或 TCID50 病毒感染鸡胚动物或细胞后，引起病毒感染鸡胚动物或细胞后，引起50%发生死亡发生死亡或病变的最小量。或病变的最小量。 三、病毒的血清学诊断三、病毒的血清学诊断中和试验补体结合试验血凝抑制试验免疫扩散等四、病毒的快速诊断四、病毒的快速诊断光镜光镜-包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA分子生物学技术分子生物学技术杂交Southern blotPCRNorthern blot 乙脑疫苗、狂犬疫苗流感灭活疫苗、HAV、HBV疫苗第二节第二节 病毒感染的特异性预防病毒感染的特异性预防人工主动免疫人工主动免疫灭活疫苗：减毒活疫苗： 脊髓灰质炎疫苗 麻疹