动物细胞融合与单体克隆抗体人教选修三PPT学习教案

1、会计学1动物细胞融合与单体克隆抗体人教选修动物细胞融合与单体克隆抗体人教选修三三 细胞融合是正常的生命活动细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用- -这是一这是一种自然融合种自然融合第1页/共35页病毒颗粒黏病毒颗粒黏 附细胞表面附细胞表面细胞膜连接细胞膜连接细胞膜被细胞膜被 病毒颗粒穿通病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞细胞融合、形成杂种细胞第2页/共35页第3页/共35页不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。第4页/共35页第5页/共35页第6页/共35页3.第7页/共35页医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病

2、毒？医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？ 二：动物细胞融合的成功应用二：动物细胞融合的成功应用 单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备第8页/共35页第9页/共35页 第10页/共35页 抗体抗体（3 3）人们获得抗体的传统方法是）人们获得抗体的传统方法是? ?将抗原注入动物体将抗原注入动物体, ,然后从动物血清中提取抗体然后从动物血清中提取抗体第11页/共35页第12页/共35页第13页/共35页第14页/共35页第15页/共35页(5)(5)杂交瘤细胞杂交瘤细胞 HAT筛选筛选大量培养大量培养PEGPEG诱导细胞融诱导细胞融合合B 脾脾骨髓瘤骨髓瘤瘤瘤 问题问题: : 在培养体系中在培养体系

3、中, , 有有3 3种细胞种细胞. B. BB B细胞、瘤瘤细胞细胞、瘤瘤细胞, ,和杂交细和杂交细胞。我们还是拿不到胞。我们还是拿不到McAb,McAb,怎么办怎么办? ? 筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛筛? ? 关键一步关键一步第16页/共35页第17页/共35页提取提取用特定的用特定的选选择性培养基择性培养基（HAT培养基）培养基）第18页/共35页第19页/共35页1、单抗的制备过程要点：、单抗的制备过程要点：第20页/共35页4 4）、如何进行第）、如何进行第2 2次筛选？次筛选？培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤

4、细胞。第第1 1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2 2次筛选得次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。问题强化：问题强化：1 1）、本过程利用了哪些原理？）、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2 2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有质，不仅具有B B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增细胞分泌抗体的能力，而且

5、还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体第21页/共35页 2 第22页/共35页第23页/共35页第24页/共35页 特异性强，灵敏度高，可大量制备。特异性强，灵敏度高，可大量制备。3 3、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用第25页/共35页第26页/共35页-生物导弹生物导弹第27页/共35页n动、植物细胞工程的比较：动、植物细胞工程的比较：植物组植物组培技术与动物细胞培养技术、植物培技术与动物细胞培养技术、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技体细胞杂交技术与动物细胞融合技术术第28页/共35页1在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正在动物细胞融

6、合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）确的是（）A结果是相同的结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同课堂练习课堂练习; ;第29页/共35页2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小

7、鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞A BC D C第30页/共35页第31页/共35页CD第32页/共35页B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案伤风杆菌单克隆抗体的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的