动物肝组织中丙二醛含量测定方法的改进

1、动物肝组织中丙二醛含量测定方法的改进【摘要】 目的初步探讨糖类物质对肝组织中丙二醛（MDA）含量测定的干扰并450nm532nmMDA532nm MDAMDA 含量的【关键词】 丙二醛； 灵芝多糖； 葡萄糖； 直线回归法丙二醛（Malomdialdehvde，MDA）是机体内的氧自由基攻击生MDA过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度1。传统的测定方法是利用过氧 化降解产物中的丙二醛与硫代巴比妥酸（TBA）在高温和酸性条件下缩合，形成的 红色产物三甲川（3，5，5-2，4-二酮）532nmMDAMDA材料动物清洁级昆明种雄性小鼠，1820 g，222565%80%。试剂丙二醛（MDA）学试剂

2、均为分析醇。752（上海精密科学仪器有限公司）；TGL-16C（上海安亭科学仪器厂）；解剖剪。方法481820 g文献34（control group，CG）、多糖高剂量组（high-dose group，HG）、多糖中剂量组(medial- dose group，MG)、多糖低剂量组（low-dose group，LG），120.3 ml/d30.3 ml/d200，100，50 mg/(kgd)。实验期间小鼠自由5130 d。100 g7 L水，8550 min0.1 L0.1 L4 过夜沉淀，4 000 r/min20 min解，冷冻干燥得到的褐色粉末为灵芝粗多糖。4200.05 mol

3、/L PBS5%酸法4进行测定。TBATBAMDA-TBAMDA200 l 50 mg/ml0.6%TBA（50%冰醋酸溶解配制）3.2 ml，80 min4 000 r/min10 min，752400700 nmMDA0.5 ml 5%1.5 ml 50%2080 min0.5 ml 5%1.5 mlpH7.02 ml DNS5min5540 nm 处吸收值的变化。MDA-TBA取不同浓度（050 mg/ml）的葡萄糖溶液，按照丙二醛（MDA）0.6%TBA（50%冰醋酸溶解配制）3.2 ml，80 min4 000 r/min5min450 nm532 nm其中的相关关系5。两种方法测定

4、小鼠肝组织 MDA 含量的比较方法 1：步骤同试剂盒说明书所述一致，各组小鼠肝匀浆样品显色后测定 450nm、532nm 波长下的吸光度值 OD450、OD532，根据532nmY532。D532Y532MDA-TBA532 nmMDA 含量。方法 2：以试剂盒上提供的传统方法测定 MDA 含量。结果与分析小鼠肝组织中糖类物质的含量经过多糖灌胃的小鼠，其肝组织中糖类物质的含量均比对照组小鼠高。组、HGMGLG(36.456.70)， (47.059.57)，(40.152.34)，(38.649.41) mg/g组与试验组之间存在着较大差异。TBATBATBA400600 nm 450 nm6

5、的研究表明，MDA TBA450 nm450 nmMDA-TBAMDA-TBA2TBA450 nm，532 nmTBA450 nm532 nm0.999 8。其直线回归方程为：Y532=0.3284+0.001 7OD450450 nm、532 nm532 nmY532，MDAY532，MDAMDAMDA3MDA较大影响。MDAMDA1MDA4%8%，1 两种方MDA（略）讨论MDADNA、膜蛋白、酶发生交联反应，使膜通透性增加，导致细胞膜结构、功能和代谢发生改变，对机体造成损害甚至死亡7，8MDA定可指导人们对机体的受损程度或耐受程度进行正确的评价，有助于医学、生物 MDA9、荧光法10、比

6、色法， 前两种方法由于仪器昂贵而难以普及，所以操作快速简便的MDATBA532 nmMDAMDA4%8%。尤其是当样品中糖类物质的含量间存在的差异越MDA参考文献1陈钧辉.生物化学实验M.北京:科学出版社，2003:43.2孙 群.肉制品脂类氧化:硫代巴比妥酸试验测定醛类物质J.食品科学.2002，23(8):331.3卫生部卫生监督司. 保健食品检验与评价技术规范S. 北京: 中华人民共和国卫生部，2003:87.4张惟杰.复合多糖生化研究技术M.上海：上海科学技术出版社， 2003：308.5张松山，刘 海，马长伟.三种 TBA 方法用于测定腌腊肉制品脂肪氧化程度适用性的研究J.肉类研究，

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