漏芦对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学研究

1、漏芦对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学研究【关键词】漏芦摘要：目的讨论漏芦RhapntiuuniflrL.D.，RU对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学变化。方法96只大鼠随机分成4组：胆总管结扎BDL组、胆总管结扎加用腹腔注射漏芦RU组、手术对照sha组、正常对照N组。采用胆总管结扎术制作大鼠梗阻性黄疸模型，腹腔注射RU，各组大鼠分别在术后3，7，14，21d处死，观察肝脏光镜、电镜的形态学变化。结果术后3d肝脏损伤开场变化，7，14d严重，21d肝细胞明显出现再生现象，与BDL组比拟，BDL-RU组变化较轻。结论RU对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学有一定的改善作用。关键词：漏芦；肝损伤；梗阻性黄疸梗阻

2、性黄疸对机体的损伤是非常重要的复杂的课题，其病变可累及肝、肾、心等多个脏器组织，可造成肝、肾等多个器官功能衰竭。既往研究发现，漏芦具有良好的抗氧化、抗衰老作用，同时还具有保护生物膜，改善微循环，增强纤维系统活性的作用1。本实验讨论漏芦RU对梗阻性黄疸肝损伤的保护作用，为临床治疗梗阻性黄疸肝损伤提供实验根据。1材料与方法1.1材料漏芦采自吉林省长白山，经延边大学药学院刘永镇教授鉴定为真品。漏芦切碎后，用90%乙醇回流提取1h3次，温度100，合并3次滤液，减压浓缩，得漏芦乙醇提取物1g漏芦有效成分相当于7.3g漏芦生药，其他试剂均为国产分析纯。JEN-1200型电子显示镜，倒置显微镜。istar

3、大鼠，雌雄各半，体重约180200g，由吉林大学白求恩医学部实验动物部提供。1.2方法取安康istar大鼠96只，雌雄各半，体重约180200g，随机分成4组，每组24只。1胆总管结扎组BDL组：24只，术前禁食12h，采用氯胺酮麻醉，无菌操作下行上腹正中切口长约1.5，充分显露胆总管，用7/0丝线双重结扎胆总管，1/0丝线双层连续缝合腹壁切口。麻醉清醒6h后自由进食、饮水。2胆总管结扎加用腹腔注射漏芦组BDL-RU组：手术操作同BDL组，于术后第1天起，每天RU按0.1g/Kg剂量腹腔注射1次。3手术对照组sha组：术中充分显露胆总管后，肝门区游离胰腺前段胆总管而不予结扎。围手术期处理同BD

4、L组。4正常对照组N组：无手术及麻醉操作。BDL组、BDL-RU组、N组及sha组又根据胆总管结扎术后时间的不同分为术后3，7，14，21d组，每组6只。实验过程BDL组手术后7d死亡1只，BDL-RU组手术后20d时死亡1只。以上各组大鼠分别在术后3，7，14，21d处死，取出肝脏，40%甲醛溶液固定24h，石蜡包埋做成45的切片，常规HE染色；切取肝脏211大小规那么组织块，迅速置于2%戊二醛溶液固定24h，常规电镜包埋、选材、超薄切片常规锇酸染色。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1HE染色N，Sha组肝索肝细胞排列规整，肝细胞无肿胀，肝小叶构造正常，无胆管增生，无瘀胆及淋巴细胞浸润，核仁

5、明晰，无染色质边聚。BDL组与BDL-RU组：1BDL组术后3d，肝索排列尚规整，肝小叶构造正常，肝窦及肝细胞中可见少量褐色胆汁栓；BDL-RU组肝索排列更规整。2BDL组术后7d，肝细胞排列欠规那么肝索迂曲加重，肝窦内仍可见少量胆汁栓；BDL-RU组与BDL组改变相似，但可见核仁明晰，并可见多个核仁，有肝细胞增生现象。3BDL组术后14d，肝窦扩张，部分肝小叶正常构造丧失，肝索排列紊乱，肝细胞肿胀，核染色加深，染色质聚集成碎块，部分染色质边集；BDL-RU组肝细胞肿胀轻，肝素迂曲较轻，肝小叶构造破坏较少，且肝窦内仅见少量胆汁栓，无明显的核边聚现象。4BDL组术后21d，肝细胞水肿重，部分肝细

6、胞瘀胆，颗粒变性，嗜酸性变性，并见有肝细胞再生现象，假小叶形成。肝索紊乱明显，沤管区小叶间胆管增生扩张，纤维组织增生明显，胆管排列紊乱，可见瘀胆，并见淋巴细胞浸润；BDL-RU组肝细胞变性较轻，肝小叶正常构造部分破坏，小叶周边及汇管区纤维组织增生较轻，肝索紊乱较BDL组轻，也可见肝细胞再生现象。2.2超微构造观察N、Sha组肝细胞核可见核仁，染色质分布正常，胞质见较多线粒体，丰富粗面内质网及糖原颗粒，胆小管两端严密连接，内见微绒毛。BDL组与BDL-RU组：1BDL组术后3d，肝细胞核轻度固缩、线粒体嵴断裂、糖元颗粒略减少，内质网稍减少，核增大，核内染色质略增多，Kupffer胞质内溶酶体增多

7、，肝细胞溶酶体增多，可见髓样小体及大量脂滴；BDL-RU组肝细胞核，呈圆形，核仁清楚，胞质内可见大量粗面质网，线粒体减少，未见肿胀，胆小管两端严密连接。2BDL组术后7d，肝细胞核变小，呈不规那么形，胞质内粗面内质网减少，线粒体肿胀，嵴不明晰，糖原减少，胆小管腔面微绒毛减少，腔内有胆泥瘀积物，可见髓样小体、巨噬细胞与kupffer细胞，粗面内质网减少，轻度扩张；BDL-RU组细胞核大、胞质少，较多粗面内质网，游离的核糖体，并可见新生肝细胞，严密连接，中间有纤维成分，胞质有一些溶酶体。3BDL组术后14d，肝细胞核不规那么，核固缩，线粒体肿胀，呈空泡状，胞质内质网减少，线粒体构造不清，部分肿胀，

8、空泡状，胆小管两端连接不清，内有髓样小体，肝细胞间见大量胶原纤维，胞质内细胞器构造不清，贮脂细胞增多明显；BDL-RU组细胞核大、圆、胞质少，粗面内质网扩张，线粒体肿胀，可见较多线粒体，糖原颗粒减少。4BDL组术后21d，肝细胞核内有脂滴，线粒体增多嵴断裂，微绒毛减少，胆小管扩张，腔内有胆泥瘀积，相邻细胞间隙增大，肝细胞外表有类似髓样小体，Kupffer数量增多，胆管上皮细胞基底侧有胶原纤维形成；BDL-RU组肝细胞核内见核仁，较多线粒体，粗面内质网及糖原颗粒少，胞质部分变化轻，相邻肝细胞间见多个胆小管，小管周围可见连接构造，小管腔面微绒毛较多。3讨论梗阻性黄疸是临床外科常见病，可导致机体肝肾

9、功能衰竭和败血症等多种病理生理损伤，其中最主要的是肝脏损伤，也是其它并发症的重要诱因，动物实验和临床资料说明，肠源性内毒素血症是这些损伤发生的重要物质根底2,3。本实验光镜、电镜结果均说明：肝脏损伤3d开场变化，7，14d损伤严重，21d肝细胞再生现象明显。BDL-RU组与BDL组相比，肝细胞变性较轻，肝小叶正常构造部分破坏，小叶周边及汇管区纤维组织增生较轻，肝索紊乱较BDL组轻，可见肝细胞再生现象。本实验证实RU对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学变化有一定的改善作用。参考文献：1刘晓青，卢咏才，郭肇铮，等.漏芦对鹌鹑动脉粥样硬化形态学变化的影响J.中国医药学报，1989，43：22.2leentsD.aigue.ErinP,etal.BiffsiargdepressinprtekupfferellreveryisbstrutiveGut.2