肝功能中各检测项目的测定方法样本

1、肝功能中各检测项目的测定方法、测定原理和临床意义一、血清总胆汁酸TBA: 测定方法：A、酶循环法，B、3a-HDS法(3-a羟类固醇脱氧酶)测定原理方法A:胆汁酸被3 a羟基类固醇脱氢酶(3a-HSDH)及口-硫代烟酰胺嘌吟 二核苷酸氧化型特异性的氧化，生成3酮类固醇及硫代烟酰胺嘌吟二核苷酸还 原型。另外，生成的3酮类固醇在3 a羟基类固醇脱氢酶及B硫代烟酰胺嘌吟二 核苷酸还原型存在下，生成胆汁酸及B烟酰胺嘌吟二核苷酸氧化型。以上依据循 环酶而放大量的胆汁酸测定生成的B-硫代烟酰胺嘌吟二核苷酸还原型的吸光度, 计算血清中胆汁酸的量。方法B:在3-a羟类固醇脱氧酶作用下，各种胆汁酸C3上a位的羟

2、基脱氧 形成羰基，同时氧化型NAD还原成NADH随后NADH上的氢由黄递酶催化转移给硝 基四氮唑蓝(NTB)产生甲替，用磷酸中止反应，甲替的产量与总胆汁酸成正比， 在波长540nm比色,与同样处理的标准品比较，计算其含量。临床意义测定血清中胆汁酸可提供肝胆系统是否正常，肝、胆疾病时周围血循环中的 胆汁酸水平明显升高。急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时可增至正常值的100 倍以上。对肝胆系统疾病的诊断具有特异性。可敏感地反映肝胆系统疾病的病变过程。肝胆疾病时血清胆汁酸浓度的升高 与其它肝功能试验及肝组织学变化极为吻合，在肝细胞仅有轻微坏死时，血清 胆汁酸的升高，常比其它检查更为灵敏。据报道，急性肝炎

3、、肝硬化、原发性 肝癌、急性肝内胆汁郁滞、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸，其血清 胆汁酸均100 %出现异常。上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。二、丙氨酸氨基转移酶ALT测定方法：酶偶联法，赖氏法，连续监测法测定原理：L-丙氨酸+ a-酮戊二酸-altL-丙酮酸 + L-谷氨 酸丙酮酸 +NADH+HL-乳酸+NAD+临床意义：谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV携带者、重 型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析，ALT的升高只表 示肝脏可能受到了损害。除了肝炎，其它很多疾病都能引起谷丙转氨酶转氨酶升 高。在急性肝炎及慢性肝炎与肝硬化活动，肝细胞膜

4、的通透性改变，谷丙转氨 酶就从细胞内溢出到循环血液中去，这样抽血检查结果就偏高，转氨酶反映肝 细胞损害程度。但谷丙转氨酶缺乏特异性，有多种原因能造成肝细胞膜通透性的 改变，如：疲劳、饮酒、感冒甚至情绪因素等等。上述原因造成的转氨酶增高 一般不会高于60个单位，转氨酶值高于80个单位就有诊断价值，需到医院就 诊。另外需要注意，谷丙转氨酶活性变化与肝脏病理组织改变缺乏一致性，有的 严重肝损患者谷丙转氨酶并不升高。因此肝功能损害需要综合其它情况来判断。L-门冬氨酸 + a -酮戊二酸 AST 草酰乙酸 + L-谷氨酸草酰乙酸 + NADH + H +md L -苹果酸 + NAD +三、天门冬氨酸氨

5、基转移酶(AST)测定方法：酶偶联法测定原理：(3)临床意义：天冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞中含量最高，但肝脏损害时也 可使其血清浓度升高，临床常作为心肌梗死和心肌炎的辅助检查。天冬氨酸氨基 转移酶(AST)的正常值为040U/L,当丙氨酸氨基转移酶(ALT)明显升高, (ALT/AST)比值大于l时，就表示肝脏发生了实质性损害。四、碱性磷酸酶ALP测定方法：连续监测法测定原理：在pH=10的环境中，ALP催化磷酸二苯钠的水解，生成苯酚和 磷酸氢二钠，苯酚与4-氨基安替比林反应生成色素原，该色素原经铁氤化钾氧 化生成红色醍亚胺衍生物。测定红色物质的吸光度就能够计算酶活力的大小。临床意义：临床上测

6、定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊 断，特别是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工酶以 协助明确其器官来源。生理性增高。儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1 2倍。处于生长期的青少年，以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均能够升高。病理性升高(1)骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转 移等；(2)肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等；(3) 其它疾病如甲状旁腺机能亢进。3.病理性降低见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺 机能不全、贫血等。五、乳酸脱氢酶LDH测定方法：连续监测法、比色法、荧光法。测定原理：乳酸脱氢酶(LD

7、H)在辅酶I的递氢作用下，使乳酸脱氢而生成 丙酮酸。氧化型辅酶I( NAD+)还原成还原型的辅酶I( NADH),引起340nm处 吸光度的改变，其吸光度的增加速率与标本中LDH浓度成正比。临床意义：1、用于AMI和亚急性MI的辅助诊断：AMI后818小时开始升高，peaktim为 2472小时，持续时间610天。AMI时LD的升高倍数多为56倍，个别可高 达10倍。2、由于LD特异性低，一般可用于观察是否存在组织、器官损伤。如LD持续正 常，可除外组织、器官损伤；如LD总酶活性升高，可能有组织、器官损伤，常 见于广泛性癌症化疗时的监测医学教育、网搜集整理。3、 各种疾病的急性时相、血液病（巨

8、幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫 血）、心肺疾患（AMI、肺梗塞）、肝胆疾患（肝炎、肝硬化、阻塞性黄疸、 心力衰竭和心包炎时肝淤血）、恶性肿瘤、肾疾患、脑血管病变、肌病、休 克等LD及其病变部位相应优势的同工酶含量均可增高。六、谷氨酰转肽酶YGT（1）测定方法：速率法（2）测定原理：Y -谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+甘氨酰甘氨酸-Y -谷氨酰甘 氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸。生成的5-氨基-2-硝基苯甲酸在410nm波长 处有吸收峰，其形成的速率与血清中Y -GT活性成正比，故经过测定吸光度增 加的速率即可测出Y-GT的活性（3）临床意义：（1）原发性或转移性肝癌时，血中GGT明显

9、升高。其原因是癌细 胞产生的GGT增多和癌组织本身或其周围的炎症刺激作用，使肝细胞膜的通透 性增加，以致血中GGT增高（2）阻塞性黄疸、急性肝炎、慢性肝炎活动期、胆 道感染、肝硬化等都可使GGT升高。（3）其它疾病如心肌梗塞、急性胰腺炎及 某些药物等均可使血中GGT升高。谷氦酰转肽酶（y-GT）,正常值为50单位。 急性乙肝时可升高，但持续1个月左右就会下降；如果长期升高不降，可能会 向慢性肝炎转化。慢性乙肝有时可达200单位或更高，且不容易消失，当前还缺 少特效使其下降其它如酒精性肝病、脂肪肝、胆石病、肝内胆管结石等也能 够升高；黄疸长期不消退（胆汁淤积）时也会升高。要注意的是，若发生肝癌时

10、, y-GT的上升值可达正常值的1 0倍以上，对其升高者一定要结合临床其它资料 加以综合分析。七、胆碱酯酶CHE（1）测定方法：纸片法（2）测定原理：丁酰硫代胆碱被ChE水解，生成硫代胆碱和丁酸；所释放的硫 代胆碱与二硫代硝基苯甲酸反应生成黄色的硝基苯甲酸衍生物，在405nm波长 下检测吸光度变化的速率就能够检测ChE的活性。（3）临床意义：急性病毒性乙肝：乙肝患者血清胆碱酯酶降低与病情严重程度 有关，与黄疸程度不一定平行，若持续降低，常提示预后不良。慢性乙肝：慢 性迁延型乙肝患者此酶活力变化不大，慢性活动性乙肝患者此酶活力与急性乙 肝患者相似。肝硬化：若处于代偿期，血清胆碱酯酶多为正常，若处

11、于失代偿 期，则此酶活力明显下降。亚急性重型乙肝：亚急性重型乙肝患者特别是肝昏 迷患者，血清胆碱酯酶明显降低，且多呈持久性降低。 肝外胆道梗阻性黄疸: 患者血清胆碱酯酶正常，若伴有胆汁性肝硬化则此酶活力下降。急慢性肝 炎、肝硬化、肝功能不全时胆碱酯酶明显降低，慢性胆道疾患，肝癌合并肝 硬化时胆碱酯酶降低。有机磷中毒、营养不良、感染及贫血也可使胆碱酯酶 降低。脂肪肝、肾脏病变、肥胖则出现血清胆碱酯酶增高。八、腺苷脱氨酶ADA（1）测定方法：Kaplan法 奈氏显色法、Kalckar氏法PNP法（2）测定原理：ADA催化腺嘌吟核苷脱氨转变为次黄嘌吟核苷，再经嘌吟核苷 磷酸化酶（PNP）作用生成次黄嘌吟，次黄嘌吟经次黄嘌吟氧化酶（XOD）作用转 变为尿酸和过氧化氢（H2O2）。H2O2在过氧化物酶（POD）存在的情况下，可与 N-乙醛-