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文档简介

实验四酵母细胞的固定化高大响一、实验目的和要求了解固定化细胞的原理。掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。二、实验原理工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性，海藻酸钠在水相中加热溶解呈溶液状。将细胞加入混匀，滴入氯化钙溶液中，由于离子的转移作用而凝固，形成凝胶颗粒，凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用，细胞在空格中可新陈代谢（固定活细胞），也可以利用细胞中的酶进行酶促反应（固定死细胞）。本实验利用海藻酸钙凝胶包埋酵母生长细胞。酵母细胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml

36～38℃的温水中活化15～20分钟，酵母细胞活化时体积会变大，活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。四、实验方法和步骤酵母细胞的固定化在冷却至45～50℃左右海藻酸钠溶液中，加入5mL预热至35℃的酵母培养液，混合均匀。将混合液装入注射器中，装上大好针头，以缓慢而稳定的速度将其滴入1.5％CaCl2溶液中，边滴边摇动三角瓶，即可制得直径为3mm左右的凝胶珠。在CaCl2溶液中钙化30min，即可使用。四、实验方法和步骤

加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环一定要溶解彻底，在溶解过程中不断搅拌，在降温过程中不能低于45℃，否则会凝固。

五、注意事项

海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。

五、注意事项

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