2019版高考生物一轮复习选考部分生物技术实践课时跟踪检测(三十九)微生物培养与应用

课时追踪检测（三十九）微生物的培育与应用1．苯酚及其衍生物宽泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依照如图操作步骤，从办理废水的活性污泥中分别挑选酚降解高效菌株。请回答以下问题：酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，此中可作为碳源的有____________。(2)将收集到的样品接种培育，苯酚用量应随转接次数增添而渐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步____________，以便于菌落计数与分别。制备平板培育基时除了需要水、营养物质外，还一定增添________。右图为连续划线法表示图，在图中________(填图中序号)地区更易获取单菌落。采纳比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反响，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________________。管号123456苯酚浓度(mg/L)1假如废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释________(填序号：①5②10③20)倍后，再进行比色。分析：(1)富集培育基中蛋白胨、苯酚都是含碳的有机物，可作为碳源。(2)欲富集酚降解菌，随转接次数的增添，应渐渐增添培育基中苯酚的含量；若接种培育后平板上菌落过于密集，则应进一步稀释后再进行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计数与分别；平板培育基是固体培育基，除含有水、营养物质(碳源、氮源、无机盐等)外，还需增添琼脂作为凝结剂。(3)利用连续划线法接种时，最后的划线地区(③)中，菌体的密度较小，简单获取单菌落。(4)因系列浓度梯度中6号比色管中苯酚浓度为1mg/L，故1～5号比色管中的苯酚浓度应分别为0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L；依据题意，废水为50mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，要使稀释后的苯酚残留液浓度介于0～1mg/L，需将残留液稀释20倍左右。答案：(1)蛋白胨、苯酚(2)增添稀释涂布凝结剂(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③12．(2018·临沂模拟)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下边程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答(已知莠去津在水中溶解度低，含过度莠去津的固体培育基不透明)：由图推测，从A瓶到C瓶液体培育的过程称为______________，目的是__________________________。在将C瓶菌种接种到固体培育基以前往常要进行________________，将菌种接种到固体培育基的方法有平板划线法和__________________法，从图中看本实验采纳的是__________(填“前者”或“后者”)。一段时间后，培育基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们挑选的目的菌是菌落中__________的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来自__________。为弄清固体培育基中的非目的菌落来自C瓶菌种仍是培育基，应怎样设置比较组？__________________________________________________________________________。分析：(1)图中从A瓶到C瓶液体培育的过程称为选择培育，目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提升其密度。(2)将菌种接种到固体培育基的方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种，由图中固体培育基上的菌落散布可知，该接种方法是稀释涂布平板法，包含梯度稀释操作和涂布平板操作。(3)依据题目信息“莠去津在水中溶解度低，含过度莠去津的固体培育基不透明”可知，能够降解莠去津的目的菌会使菌落四周出现透明圈，所以能够选择菌落四周存在透明圈的细菌。因为培育基中只有莠去津一种氮源，所以分解莠去津的微生物所需的氮元素主要由莠去津供给。(4)为弄清固体培育基中的非目的菌落来自C瓶菌种仍是培育基，应设置灭菌后不接种菌种的培育基，与实验组放在同样条件下培育，若培养基上无菌落出现，则非目的菌落必定来自C瓶菌种，若培育基上出现菌落，则说明非目的菌落可能来自培育基。答案：(1)选择培育初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提升其密度(2)梯度稀释稀释涂布平板后者(3)有透明圈莠去津(4)配制的培育基灭菌后不接种菌种，与实验组放在同样条件下培育3．图甲是从土壤中挑选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。2图中选择培育基应以________为独一氮源；鉴识培育基还需增添________作指示剂，产脲酶细菌在该培育基上生长一段时间后，其菌落四周的指示剂将变为________色。(2)在5个细菌培育基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培育一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采纳的接种方法是__________________，每克土壤样品中的细菌数目为________×108个；与血细胞计数板计数法对比，此计数方法测得的细菌数较________。(3)现有一菌株的脲酶因为基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增添了70个核苷酸，使图乙序列中出现停止密码(停止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，停止密码为________，突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。分析：(1)脲酶能够催化尿素水解开释出氨和二氧化碳，所以选择培育基中应以尿素为独一氮源。挑取单菌落接种到加有酚红指示剂的鉴识培育基中，培育一段时间后，菌落四周的氨增添，pH高升，酚红指示剂将变红。(2)该过程采纳的接种方法为稀释涂布平板法。利用稀释涂布平板计数法对细菌进行计数时，应选择菌落数在30～300的平板，所以平板上长出的细菌菌落均匀数为(156＋178＋191)÷3＝175个。每克土壤样品中的细菌数为175÷0.1×105＝1.75×108个。血细胞计数板计数法能将死细胞计算在内，而稀释涂布平板计数法只好计数活细胞(只有活细胞才能在平板上生长)，故一般血细胞计数板计数法要比稀释涂布平板计数法的结果大。(3)图乙从开端密码算起的碱基序号为271，前270个碱基决定90个氨基酸，从271位到箭头处能够决定1个氨基酸，而后插入70个核苷酸，可决定23个氨基酸，多出一个碱基，加上后边的AG恰好能够决定1个氨基酸，则后边UGA是停止密码。所以突变基因转录的mRNA停止密码为UGA，突变基因表达的蛋白质所含氨基酸数为90＋1＋23＋1＝115(个)。答案：(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75少(3)UGA1154．(2018·邯郸模拟)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基，成功挑选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图，请剖析回答以下问题：3培育基中加入化合物A的目的是____________________________________，这类培育基属于________培育基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源来自培育基中的________________。实验需要振荡培育，由此推测“目的菌”的代谢种类是________________。在上述实验操作过程中，获取纯净“目的菌”的重点是_______________________________。转为固体培育基时，常采纳平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是________，操作时采纳________灭菌的方法。实验结束后，使用过的培育基应当进行灭菌办理后才能倒掉，这样做的目的是________________________________________________________________________。(6)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他采纳10－4、10－5、10－6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培育皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组比较实验是________________________，此比较实验的目的是________________________。分析：(1)在选择培育基中加入特定物质，能够挑选出特定的微生物。(2)依据题目所给的培育基配方，“目的菌”生长所需的氮源和碳源只好来自培育基中的化合物A。异养需氧型细菌在培育时需要振荡。(3)获取纯净特定“目的菌”的重点是防备外来杂菌入侵。(4)用平板划线的方法进行接种，接种工具是接种环，操作时一般采纳灼烧灭菌。(5)为防备造成环境污染，实验结束后，使用过的培育基应当进行灭菌办理才能倒掉。(6)计数目的菌数量时，注意设置一组不接种的空白培育基比较实验，此比较实验的目的是证明培育基制备过程中未被杂菌污染。答案：(1)挑选目的菌选择(2)化合物A异养需氧型(3)防备外来杂菌污染(4)接种环灼烧(5)防备造成环境污染(6)不接种的空白培育基查验培育基制备过程中能否被杂菌污染5．研究人员成功地从土壤中挑选到能产生纤维素酶的微生物。请就“怎样从土壤中获得纤维素分解菌”回答以下问题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般以为它起码包含三种组分，即C1酶、CX酶和__________酶。(2)刚果红能够与纤维素等多糖形成红色复合物，但其实不与__________和__________发生这类反响。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反响；第二种是在________时就加入刚果红。________(填“第一种”或“第二种”)方法会使菌落之间发生混淆。假如察看到产生________的菌落，说明可能获取了纤维素分解菌。为了确立是纤维素分解菌，还需要进行______________________的实验。纤维素酶的测定方法一般是采纳对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的____________进行定量的测定。4分析：(1)纤维素酶包含三种组分，分别是C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)刚果红能够与纤维素等多糖形成红色复合物，但其实不与纤维二糖和葡萄糖发生这类反响。刚果红染色法有两种，第一种是先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反响；第二种是在倒平板时就加入刚果红。第一种方法因为加刚果红时已经形成菌落，所以会使菌落之间发生混淆。(3)纤维素分解菌能够分解培育基中的纤维素，所以菌落四周会出现不变红的透明圈。为了确立是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是采纳对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。答案：(1)葡萄糖苷(2)纤维二糖葡萄糖倒平板第一种(3)透明圈发酵产纤维素酶葡萄糖6．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长久使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分别降解苯磺隆的菌株和研究其降解体制的实验过程如图甲、乙所示。微生物生长生殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类，该实验所用的选择培育基只好以苯磺隆作为独一碳源，其原由是______________________________。(2)与微生物培育基对比，植物组织培育的培育基常需增添生长素和______________，这些植物激素一般需要预先独自配制成____________保留备用。纯化菌株时，往常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培育后，第一划线地区的划线上都不中断地长满了菌，第二划线地区所划的第一条线上无菌落，其余划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________________________________________________________________________________________________。为研究苯磺隆的降解体制，将该菌种的培育液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________________，该实验设计能否合理？为什么？______________________。分析：(1)微生物生长生殖需要的主要营养物质包含碳源、氮源、水和无机盐四类。根据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是研究其降解体制，因此，需要分别出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，应选择培育时为了清除其余碳源的扰乱，培育基中的独一碳源只好是苯磺隆。(2)与微生物培育基对比，植物细胞培育的培养基需要增添生长素和细胞分裂素，用于调理植物细胞再分化；这些植物激素一般需要预先5独自配制成母液保留备用。(3)纯化菌株时，往常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培育后，发现第一划线地区的划线上不中断地长满了菌，第二划线地区所划的第一条线上无菌落，而其余划线上有菌落。造成此现象的原由可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线地区第一条线时未从第一地区尾端开始。依据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是研究目的菌株能否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺乏不加蛋白酶溶液、其余条件同图乙的空白比较。答案：(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长生殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一地区尾端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺乏空白比较7．(2018·银川模拟)微生物的实验室培育，最为重点的是不单要为微生物供给适合的营养条件和环境条件，还要能解决杂菌对培育物的污染问题。请联合微生物的实验室培育知识回答以下问题：培育基能为微生物供给营养。各样培育基的配方不一样，但一般都含有________________________，如蛋白胨除了供给氮源以外，还供给______________；此外，培育基还需要知足微生物对____________________________的要求。获取纯正培育物的重点是防备外来微生物入侵。对实验操作的空间、操作者的穿着和手，需要进行洁净和______(填“消毒”或“灭菌”)；而一般对培育基往常选择________法进行灭菌。微生物的接种方法好多，其核心都是要防备杂菌污染，保证培育物的纯正。微生物接种最常用的方法是__________________和____________________。对分别的微生物作进一步判定和挑选，常需要借助生物化学方法，如在以__________为独一碳源的培育基中加入__________可用来判定纤维素分解菌；而挑选纤维素分解菌，则依照培育基能否产生__________(特点)来挑选。分析：(1)培育基的配方中应含有碳源、氮源、无机盐、水等各样成分，配制时还应试虑知足微生物对pH、特别营养物质、氧气等的要求。蛋白胨可供给碳源、氮源和维生素等营养物质。(2)为防备外来微生物入侵，往常对实验操作空间、操作者的穿着和手进行消毒，而对培育器皿、接种器具、培育基等进行灭菌。对培育基往常选择高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)接种微生物最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。(4)对分别的微生物作进一步判定，常需要借助生物化学方法，如判定纤维素分解菌时，在以纤维素为独一碳源的培育基中加入刚果红，而挑选纤维素分解菌则以培育基能否产生透明圈来挑选。答案：(1)碳源、氮源、无机盐、水碳源和维生素pH、特别营养物质、氧气(2)消毒高压蒸汽灭菌(3)平板划线法稀释涂布平板法(4)纤维素刚果红透明圈8．分别挑选降解纤维素能力强的微生物，关于解决秸秆等荒弃物质源的再利用和环境6污染问题拥有理论和实质意义。研究人员从土壤和腐化的秸秆中分别挑选出能高效降解纤维素的菌株，并对挑选出的菌株进行了初步研究。对培育基进行灭菌的常用方法是_____________。为在培育基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用_____________法进行接种。先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培育基长进行挑选获取初筛菌株，再将初筛菌株接种到以_____________为独一碳源的培育基培育2～5d，加入___________溶液后，依照出现的颜色反响进行挑选，察看菌落特点并丈量_______________________。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培育基中，恒温振荡培育8d，察看滤纸条的损坏状况，结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强，你的解说是____________________________________________________________________________