经典免疫学技术演示文稿

经典免疫学技术演示文稿现在是1页\一共有81页\编辑于星期四（优选）经典免疫学技术现在是2页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术现在是3页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应根据抗原与抗体反应的条件及附加因素，沉淀反应可分为两种主要形式：1．溶液中沉淀反应

2．凝胶中沉淀反应现在是4页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应根据抗原与抗体反应的条件及附加因素，沉淀反应可分为两种主要形式：

1．溶液中沉淀反应

2．凝胶中沉淀反应现在是5页\一共有81页\编辑于星期四1．溶液中沉淀反应

（Precipitationreactioninsolution）

是指在清彻透明的液体中，呈溶解状态的抗原与抗体在试管内或凹玻片上混匀，可凝聚成为肉眼可见的絮状或颗粒状的不溶性沉淀物。现在是6页\一共有81页\编辑于星期四溶液中沉淀反应

盐溶液抗原+抗体———沉淀

20~56℃、pH6～8

抗原：沉淀原抗体：沉淀素现在是7页\一共有81页\编辑于星期四1．溶液中沉淀反应

（Precipitationreactioninsolution）

（1）环状沉淀试验（2）免疫比浊法（3）免疫沉淀技术现在是8页\一共有81页\编辑于星期四（1）环状沉淀试验

环状沉淀试验

（ringprecipitationtest）或毛细管内沉淀反应 （precipitationin capillarytube）现在是9页\一共有81页\编辑于星期四现在是10页\一共有81页\编辑于星期四（2）免疫比浊法(immunonephelomytry）

可溶性的抗原、抗体在液相中特异结合，形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液出现浑浊。复合物的量与浊度成正比。与标准品比较即可计算出样品中的抗原或抗体含量。现在是11页\一共有81页\编辑于星期四现在是12页\一共有81页\编辑于星期四免疫沉淀技术现在是13页\一共有81页\编辑于星期四现在是14页\一共有81页\编辑于星期四免疫共沉淀现在是15页\一共有81页\编辑于星期四GSTpull-down技术

现在是16页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应根据抗原与抗体反应的条件及附加因素，沉淀反应可分为两种主要形式：1．溶液中沉淀反应

2．凝胶中沉淀反应现在是17页\一共有81页\编辑于星期四2．凝胶中沉淀反应（Precipitationreactioningel）

1968年Ouchterlong发明的。即将抗原抗体溶液放在琼脂凝胶板上的小孔中，使它们彼此对向扩散，在抗原抗体相遇的地方形成沉淀线。现在是18页\一共有81页\编辑于星期四2．凝胶中沉淀反应

此沉淀线的突出性质是：特异性抗原抗体不能通过；与沉淀线无关的抗原和抗体分子则可自由通过此沉淀线。现在是19页\一共有81页\编辑于星期四2．凝胶中沉淀反应（1）单相免疫扩散试验（2）双相免疫扩散试验（3）免疫电泳（4）火箭电泳试验（5）免疫印迹技术现在是20页\一共有81页\编辑于星期四单相免疫扩散试验现在是21页\一共有81页\编辑于星期四现在是22页\一共有81页\编辑于星期四双相免疫扩散试验现在是23页\一共有81页\编辑于星期四（3）免疫电泳（immunoelectrophoresis）现在是24页\一共有81页\编辑于星期四现在是25页\一共有81页\编辑于星期四（4）火箭电泳试验现在是26页\一共有81页\编辑于星期四现在是27页\一共有81页\编辑于星期四现在是28页\一共有81页\编辑于星期四又称Westernblotting电泳印渍及检测（5）免疫印渍技术（immunoblotting）现在是29页\一共有81页\编辑于星期四免疫印渍现在是30页\一共有81页\编辑于星期四现在是31页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术现在是32页\一共有81页\编辑于星期四第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

现在是33页\一共有81页\编辑于星期四第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

现在是34页\一共有81页\编辑于星期四1．直接凝集反应

（directagglutination）

是将细菌或红细胞与其相应抗体结合产生的细菌凝集或红细胞凝集现象。现在是35页\一共有81页\编辑于星期四1．直接凝集反应（1）微生物凝集反应 如诊断伤寒病的肥达氏（Widalreaction）反应（2）同种红细胞凝集反应如检查血型的血细胞凝集现象现在是36页\一共有81页\编辑于星期四现在是37页\一共有81页\编辑于星期四第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

现在是38页\一共有81页\编辑于星期四2．间接凝集反应

（indirectagglutination）

用可溶性抗原（或抗体）包被在一种与免疫无关的、具一定大小的不溶性颗粒（即载体颗粒，如：乳胶颗粒或红细胞）的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在有适宜电解质存在的条件下，结合产生的凝集现象。现在是39页\一共有81页\编辑于星期四2．间接凝集反应正向间接凝集反应：将抗原先吸附在载体表面，然后与相应抗体结合产生的凝集反应。反向间接凝集反应：将特异性抗体先吸附在载体表面，然后与相应抗原结合产生的凝集反应。既可检测抗原，也可检测抗体；方法简便、敏感。现在是40页\一共有81页\编辑于星期四正向间接凝集反应现在是41页\一共有81页\编辑于星期四

此方法对检测微量抗原具有较高的敏感性。而且由于相关病原体的抗原成分一般情况下比血清抗体出现早，所以可用于某些传染病如钩端螺旋体抗原和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)或原发性肝癌AFP的检测等。反向间接凝集反应现在是42页\一共有81页\编辑于星期四现在是43页\一共有81页\编辑于星期四第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

现在是44页\一共有81页\编辑于星期四3．桥梁凝集反应

又称Coombs抗球蛋白试验。此试验用于检测不完全抗体。现在是45页\一共有81页\编辑于星期四现在是46页\一共有81页\编辑于星期四现在是47页\一共有81页\编辑于星期四第二节凝集反应1．直接凝集反应2．间接凝集反应3．桥梁凝集反应4．共同凝集反应

现在是48页\一共有81页\编辑于星期四4．共同凝集反应

又称协同凝集反应。指由两种颗粒成分相互作用而发生的凝集反应。现在是49页\一共有81页\编辑于星期四4．共同凝集反应（1）细菌抗体与携带蛋白A的金黄色葡萄球菌CowanⅠ系致敏，即通过其IgG的Fc段与蛋白A结合，再与相应细菌发生凝集反应。（2）玫瑰花结试验：主要用于研究各种淋巴细胞特性。现在是50页\一共有81页\编辑于星期四现在是51页\一共有81页\编辑于星期四E花环形成示意图现在是52页\一共有81页\编辑于星期四

B细胞EA、EAC玫瑰花环形成示意图

现在是53页\一共有81页\编辑于星期四淋巴细胞的分离现在是54页\一共有81页\编辑于星期四玫瑰花结现在是55页\一共有81页\编辑于星期四淋巴细胞与红细胞形成

玫瑰花结的主要模式玫瑰花结的类型红细胞的类型及处理淋巴细胞类型E花结绵羊红细胞T、50%NKEA花结抗体致敏的红细胞B、T、NK、粒细胞、单核细胞及巨噬细胞EAC花结补体致敏的红细胞B现在是56页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术现在是57页\一共有81页\编辑于星期四

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应现在是58页\一共有81页\编辑于星期四

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应现在是59页\一共有81页\编辑于星期四1．补体参与直接的

抗原抗体反应

（1）溶血反应（2）溶菌反应现在是60页\一共有81页\编辑于星期四（1）溶血反应

（hemolyticassay）

溶血反应常作为是否存在游离补体的指示系统。现在是61页\一共有81页\编辑于星期四（1）溶血反应1942年Rutstein和Walker根据补体能使兔抗羊红细胞抗体致敏的羊红细胞发生溶血的特点，建立了测定血清中总补体活性的方法（即50%溶血反应CH50

测定方法）现在是62页\一共有81页\编辑于星期四（2）溶菌反应

溶菌反应常作为某血清中是否存在相应抗体的检测方法。现在是63页\一共有81页\编辑于星期四

第三节

补体参与的抗原抗体反应

1．补体参与直接的抗原抗体反应2．补体参与间接的抗原抗体反应现在是64页\一共有81页\编辑于星期四2．补体参与间接的

抗原抗体反应

（1）补体结合试验（2）被动红细胞溶解试验（3）溶血空斑试验现在是65页\一共有81页\编辑于星期四（1）补体结合试验（complementfixationtest）

1901年由Bordet和Gengou首先应用溶血反应作为指示系统，建立的检测抗原抗体反应的方法。现在是66页\一共有81页\编辑于星期四现在是67页\一共有81页\编辑于星期四补体结合试验原理现在是68页\一共有81页\编辑于星期四现在是69页\一共有81页\编辑于星期四（2）被动红细胞溶解试验

即吸附抗原的红细胞在有相应抗体和补体存在时，出现红细胞溶解反应。抗原致敏红细胞——加入待测血清和补体——判断结果（阳性对照：加入相应抗体和补体）

现在是70页\一共有81页\编辑于星期四（3）溶血空斑试验

是测定B淋巴细胞产生和分泌抗体功能的一种体外试验方法。现在是71页\一共有81页\编辑于星期四现在是72页\一共有81页\编辑于星期四现在是73页\一共有81页\编辑于星期四溶血空斑试验现在是74页\一共有81页\编辑于星期四第一节沉淀反应第二节凝集反应第三节补体参与的抗原 抗体反应第四节中和反应第五章 经典免疫学技术现在是75页\一共有81页\编辑于星期四第四节中和反应中和反应（neutralization）：是免疫学和病毒学中常用于检测中和抗体是否存在及其效价的试验，反映抗体中和病毒感染性或细菌毒素的生物学效应。现在是76页\一共有81页\编辑于星期四

中和抗体：病原微生物侵入机体后，使之产生能中和相应微生物及其毒性产物（毒素），从而使病原微生物丧失感染能力或毒力的抗体。（中和抗体：能与病毒结合，使其失去感染力的抗体。抗毒素：能与细菌外毒素结合，中和其毒性作用的抗体。）现在是77页\一共有81页\编辑于星期四中和反应的原理

即将被检血清与病原微生物混合，经适当时间作用后，接种于宿主系统（包括动物、鸡胚或培养细胞），按照对其产生的保护效果的差异，可判断该微生物或毒素是否已被中和，并计算出中和的程度（中和指数），即代表中和抗体效价。现在是78页\一共有81页\编辑于星期四中和反应的特点：

（1）检测机体内是否存在中和抗体以及中和抗体的效价，直接反应机体