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文档简介
纸色谱技术中药化学技术请用纸色谱法检识板蓝根乙醇提取液中的氨基酸。任务导入必备知识点纸色谱的原理和组成1纸色谱的应用特点2纸色谱的操作步骤33定义原理组成以滤纸作为载体,滤纸中的水分(或根据需要加在滤纸上的溶液)为固定相,用适当的溶剂系统为流动相进行展开的色谱操作技术。属于分配色谱,它是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同达到分离的目的。一、纸色谱的原理和组成支持剂(载体)、固定相、流动相与被分离成分。纸色谱技术一、纸色谱的原理和组成色谱滤纸的选择原则:①滤纸应有一定的纯度和机械强度。②滤纸必须质地均匀,全纸平整无折痕,以保证溶剂展开速度均匀。③色谱用滤纸分为快速、中速、慢速等规格。一、纸色谱的原理和组成色谱滤纸的规格快速----分离Rf值相差大的化合物或流动相粘度大的情况
中速最常用慢速薄型滤纸------定性分析厚型滤纸------定量分析如:正丁醇一、组成——固定相滤纸是纤维素构成的,通过氢键作用吸收的水分即为固定相。滤纸的特殊处理:分离亲脂性较强的成分,常用二甲基甲酰胺、丙二醇代替水作固定相,改善分离效果。分离某些弱酸或弱碱性成分时,可用不同pH值的缓冲溶液处理滤纸,或在展开剂中加入一定比例的酸或碱,以取得较好的分离效果。一、组成——流动相选择原则:展开剂的亲水性或亲脂性应和被分离样品的亲水性或亲脂性相适应。常用的流动相是与水能部分相溶的有机溶剂,如水饱和的正丁醇、正戊醇、酚等,有时加入少量有机酸、有机碱或一定比例的甲醇或乙醇。如欲分离极性大的化合物,可在展开剂中增加水、乙醇等极性溶剂的比例,以增大Rf值。二、纸色谱的应用特点(1)纸色谱对亲水性较强成分如氨基酸、糖类、苷类等的分离效果常比薄层色谱为好。(2)纸色谱展开往往时间较长,而且不能用腐蚀性强的显色试剂。与薄层色谱法基本相似。点样量一般是几毫克至几十毫克。注意:溶解样品的溶剂尽量避免用水。点样展开显色结果计算比移值:方法与薄层色谱法基本相似。上行法展开最常用。展开前通常使滤纸预先被展开剂的蒸汽所饱和,然后再展开。先观察有无颜色或荧光斑点,
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