药物分析维生素类药物的分析

药物分析维生素类药物的分析第一页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

维生素类药物维生素又称为维他命（Vitamin），从结构上看，维生素类药物没有很强的共性特征，不同的维生素有不同的结构和性质。按溶解度来说，维生素可以分为脂溶性维生素和水溶性维生素。前者常在油状物中存在，如鱼肝油中富含丰富的维生素A和E。本章主要讲述维生素A、维生素E、维生素B1、维生素C。第二页，共四十五页，编辑于2023年，星期一维生素类药物脂溶性维生素维生素A维生素D维生素E维生素K水溶性维生素维生素B维生素C维生素B1维生素B2维生素B4维生素B6维生素B12第三页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

1.

结构与特点环己烷共轭多烯醇（四）支链全反式维生素A（天然）根据双键的顺反VA

的立体异构体应有16种，但由于空间位阻实际上只有6种存在。维生素A的分析醋酸酯棕榈酸酯醇㈠6种立体异构体第四页，共四十五页，编辑于2023年，星期一6种立体异构体第五页，共四十五页，编辑于2023年，星期一第六页，共四十五页，编辑于2023年，星期一2.官能团与分析方法SbCl3（SbCl5）＋（RCOOSbCl5）CHCL3中618～620有强吸收，可用于鉴别、含测（无水，<＋1℃，10秒内测定）定性，定量。Ｐ.245共轭双键的紫外吸收无水乙醇中有一个单峰，当在酸催化下脱水生成脱水VA,增加一个双键，吸收红移，同时在350～390出现三个峰。亮蓝色紫红色第一次测定

第二次测定第七页，共四十五页，编辑于2023年，星期一第八页，共四十五页，编辑于2023年，星期一3含量测定

各国药典均采用UV法，相对简单、可靠。但VA原料、制剂中含有相当量的VA2、VA3、VA醛、VA酸、中间体、稀释用油等，对其构成干扰。研究中发现干扰成分的吸收在316、328、340成一直线，所以建立了三点校正法。λ２λ１λ３Ａ１Ａ３Ａ２A328(校正)=3.52×（2A328－A316－A340）第九页，共四十五页，编辑于2023年，星期一（1）测定Ai

和计算Ai/A2

（328）将Ai/A2

与药典规(5波长)定值进行比较(P.249)，如果差值：①均不超过±0.02,不用校正,直接用A2

计算含量或标示量％②有一个波长处Ai/A2超过±0.02者,则计算误差然后用下一原则.分析原则为：

误差

-15％-3％03％用第二法测定用A328(校正)计算

用A328计算用第二法测定误差％=A328(校正)－A328A328×100％A328(校正)=3.52×（2A328－A316－A340）第十页，共四十五页，编辑于2023年，星期一（2）样品含量及标示量％的计算样品的含量是以效价（IU/g）表示效价-每g样品中所含维生素A的国际单位数第十一页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

换算因子==

已知:1IU=0.300ug全反VA醇;1IU=0.344ug全反VA醋酸酯全反VA醇E1%(异丙醇)325nm=1820;

全反VA醋酸酯E1%(环己烷)328nm=1530

1000,000ug

所以：VA醋酸酯的换算因子=0.344ug=1900②效价（IU/g)E1CM1％1530效价（IU/g）单位E1%相当的效价第十二页，共四十五页，编辑于2023年，星期一则样品的含量（以IU/g

表示）P（IU/g）VA醋酸酯=E1%（328）×1900E1%（328）=

A328（校正）100×W×L×D×100是将样品浓度由g/ml换成g/100ml见P.248样品的标示量%=含量/标示量×100%对样品进行皂化，提纯后再测定。（提取物为VA醇，溶剂为异丙醇，）其A315（校正）=6.815×A325－2.555A310－4.260×A334

IU/g

=

E1%×1830（3）第二法

稀释体积第十三页，共四十五页，编辑于2023年，星期一第十四页，共四十五页，编辑于2023年，星期一第十五页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

其

A315（校正）=6.815×A325－2.555A310－4.260×A334

IU/g

=E1%×1830第十六页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

维生素B1的分析１.结构

嘧啶亚甲基噻唑连成的季铵盐化合物白色结晶或结晶性粉末，吸水性强，易溶于水。·第十七页，共四十五页，编辑于2023年，星期一２.官能团与分析方法··HCl二个碱性基团可与多数生物碱沉淀剂三硝基酚K2HgI4I2生成组成恒定的沉淀可用于鉴别和含量测定。可用非水碱量法进行含量测定。硫化铅反应硫色素反应样品NaOH开环-H2OK[Fe(CN)6]合环[O]硫色素蓝色荧光，加H＋荧光消失加OH－荧光又出现。用于鉴别和含量测定。P.258Na2SPb(Ac)2PbS黑鉴别-2HNaOH共热第十八页，共四十五页，编辑于2023年，星期一K[Fe(CN)6]第十九页，共四十五页，编辑于2023年，星期一非水滴定法（ChP所用方法）3.含量测定第二十页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

硅钨酸重量法

硫色素荧光法

紫外分光光度法246nm第二十一页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

维生素C的分析1.化学结构特点：

六碳五员环内酯(四羟基烯醇)，分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是L（+）-抗坏血酸第二十二页，共四十五页，编辑于2023年，星期一D(-)-异抗坏血酸L(+)-异抗坏血酸L(+)-抗坏血酸D(-)-抗坏血酸第二十三页，共四十五页，编辑于2023年，星期一２.官能团与分析方法

内酯结构,碱性水解。

烯二醇结构—酸性。▲C3-OH，pKa=4.17(共轭效应)▲C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基)

一元酸.能与Na2CO3作用生成钠盐。还原性去氢抗坏血酸L-二酮古罗糖酸VC的结构很象糖结构，具有糖的反应蓝色荧光邻苯二胺去氢抗坏血酸鉴别CP第二十四页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

反应的摩尔比是1∶13.含量测定

a.碘量法第二十五页，共四十五页，编辑于2023年，星期一操作

终点颜色：无色→蓝色1ml0.05mol/L碘液1ml8.806mgC6H8O6第二十六页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

酸性，使VC在空气中氧化速度减慢。溶剂新沸放冷的水，减少水中溶解氧的影响。还原性物质的影响及排除，注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂.

排除：加入丙酮或甲醛。反应条件+→第二十七页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

在酸性下2,6-二氯吲哚酚氧化型是红色的;还原型是无色的酸性下直接用2,6-二氯吲哚酚滴定，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，不需要另外的指示剂。b.

2,6-二氯吲哚酚滴定法++氧化型（红色）还原型（无色）终点的颜色是溶液由无色变为红色。第二十八页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

维生素E的分析一.结构苯并二氢吡喃醇醋酸酯十三烷旋光性：天然VE为右旋体，合成VE为消旋体。性状：黄色透明的黏稠液，溶于有机溶剂，不溶于水。紫外吸收：苯环的共轭结构。易水解及氧化变色（酚羟基）。α—生育酚第二十九页，共四十五页，编辑于2023年，星期一二.官能团与分析方法Ar-OHH＋HNO3生育红KOH△75℃Fe3＋＋Fe2＋Fe〔〕〔〕32＋UV血红色VE的0.01%无水乙醇液：λmax=284nmΛmin=254nmCP性状对生育醌生育酚

cp鉴别Ce(SO4)2Fe3紫红色第三十页，共四十五页，编辑于2023年，星期一维生素E的鉴别第三十一页，共四十五页，编辑于2023年，星期一检查游离生育酚:ChP2000P.798取0.1g样品，按铈量法用Ce(SO4)2(0.01mol/L)滴定，以二苯胺为指示剂，消耗Ce(SO4)2液不得超过1.0ml。亮黄→灰紫反应式，计算

P.2753.杂质检查第三十二页，共四十五页，编辑于2023年，星期一a.铈量法

原理：

VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。终点：亮黄→灰紫空白试验

反应的摩尔比是1∶2

4.含量测定第三十三页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

反应条件：⑴

VE在H2SO4酸性条件下水解为宜，碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。⑵

Ce(SO4)2溶于酸水溶液，不溶于醇,α—生育酚溶于醇而不溶于水,滴定过程中应有一定浓度的乙醇。

⑶

本法适用于纯度高的VE供试品。第三十四页，共四十五页，编辑于2023年，星期一b.气相色谱法：Chp2000色谱条件及系统适应性试验色谱柱：2m×4mmI.D.硼硅玻璃柱，内装硅藻土（80~100目）固定相：硅酮（OV-17）涂布浓度2%载气：N2，流速:含2%固定相：以18~20分钟为宜；含5%固定相：以30~32分钟为宜第三十五页，共四十五页，编辑于2023年，星期一柱温：265℃内标：正三十二烷检测器：FID（氢火焰离子化检测器）性能要求：理论塔板数按VE峰计算应不低于500，VE峰与内标物质峰的分离度应大于2。

溶液配制：内标溶液：正三十二烷的环己烷溶液（1.0mg/ml）第三十六页，共四十五页，编辑于2023年，星期一对照溶液：对照品溶解于内标溶液中(1mg/ml)供试品溶液：供试品约50mg，用内标溶液，溶解并稀释至50ml4、供试品测定。

mg=F×Ax×Ms/As

Ax：供试品峰面积

F：校正因子

As：内标物的峰面积特点：简便快速、专属性强，适用于VE、VE制剂及多种维生素制剂中VE的测定。

第三十七页，共四十五页，编辑于2023年，星期一第三十八页，共四十五页，编辑于2023年，星期一

电位滴定法

１．原理和方法：电位滴定的仪器装置如图．在化学反应计量点（附近）,离子浓度发生根本的变化,引起指示电极电位发生相应的突变．如用AgNO3滴定Cl－,化学反应计量点前,过剩的是Cl－或者Cl－为主体离子,计量点时CCl-≈CAg+（KspAgCl）,计量点后Ag+为主体离子,溶液的性质发生了改变,电极电位也发生质的变化.电位滴定法是在滴定过程中,借助指示电极的电位突变从而确定终点的分析方法．－间接电位法－．第三十九页，共四十五页，编辑于2023年，星期一每加入0.1mL~0.2ml，测量一次电动势

电位滴定法的基本原理及装置第四十页，共四十五页，编辑于2023年，星期一5.00622310.02.315.0085225.004.420.00107162.008.022.00123151.001523.0013880.501623.50146150.305023.80161130.206524.0017490.109024.10183110.1011024.20194390.1039024.30233830.1083024.40316240.1024024.50340