梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程

梅毒螺旋体抗体测试标准操作规程杭州余杭邦尔医院检验科发布了免疫室项目SOP文件，其中包括了梅毒螺旋体抗体测定的标准操作规程。此规程由刘凤婷编制，经钟剑审核，由张延亮批准，生效日期为2018年1月1日，版本号为1/4，页码数为101-102页。检验申请可单独申请梅毒螺旋体抗体（速写TP），也可以作为性病检测和输血前监测的组合项目之一。临床医生可根据需要提出检验申请。标本采集时，采用含高效促凝剂或含分离胶的真空采血管，常规静脉采血约2ml，无需抗凝。检验申请单和血标本试管上必须标上统一且唯一的标识符号，急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。标本采集后与检验申请单一起及时送至检验科，专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。不合格标本包括标本量不足、无法确认标本与申请单对应关系的以及标识涂改、标本试管破裂等情况。标本接收后在30min内将标本离心分离出血清。血清室温下可稳定48h，在冰箱中（2～8℃）可稳定7天，-20℃放置12个月。为避免标本中水份挥发使血清浓缩，对保存超过1天的标本均加塞密闭或覆盖保鲜膜。已完成测试的标本需保存完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7天备复检。采血前需使受检者保持平静、松弛状态。不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。梅毒螺旋体抗体测定方法采用胶体金免疫检测技术和层析原理，定性检测血清（血浆）样本中的梅毒螺旋体抗体。检测时，样本中梅毒抗体可与胶体金标记抗原（大肠杆菌表达）结合形成抗原抗体复合物，由层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原（大肠杆菌表达）结合形成“Au-TPAg-TPAb-TPAg”夹心物而凝聚显色。游离的胶体金标记梅毒抗原（大肠杆菌表达）则在对照线处与预包被的兔抗TP抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照处显色。试剂及其他用品的具体信息未在文章中给出。4.1该试剂盒为梅毒螺旋体抗体试验试剂盒，由英科新创（厦门）科技有限公司生产。4.2试剂盒应在4-30℃干燥保存，有效期为18个月。4.3取出试剂后应尽快进行试验，避免长时间暴露在空气中导致受潮。8标本检测步骤：8.1从原包装铝箔袋或试剂筒中取出试剂。8.2加样：将样本按箭头所示方向插入，同时开始计时。注意：样本液面不应高于试剂的“MAX”标记线。8.3等待15-20分钟，等待紫红色条带出现。30分钟后判读无效。9检验结果的解释：9.1阳性（+）：两条紫红色条带出现，一条位于检测区（T）内，另一条位于质控区（C）。表明梅毒螺旋体抗体阳性。9.2阴性（-）：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，检测区（T）内无紫红色条带出现。表明梅毒螺旋体抗体阴性。9.3无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明操作过程不正确或试剂已变质损坏。应重新检测，如问题依然存在，应停止使用此批号产品并联系供应商。10检验方法的局限性。11检验结果的报告及范围：11.1报告单上应标明结果的正常参考值、报告日期、时间、操作者和审核者的签名，并包含与申请单相同的医学信息。11.2报告类型为阴性或阳性。11.3如收到的标本质量可能影响测定结果，应在报告单上指出。11.4审核后确认准确无误后发出报告。12操作性能：该方法的有限性及干扰因素：严重溶血或黄疸可能导致假阳性结果。13参考范围及医学决定水平：参考范围为阴性。如检测到阳性应及时通知临床进行确诊试验。14临床意义：梅毒螺旋体抗体为TP感染后产生的特异性抗体，是TP感染的标志，为非保护性抗体。该方法通常用于流行病学筛查。15结果审核以及分析与相关项目的联系：15.1资深专业人员负责审核检验结果。15.2审核者应认真审核每一个测定结果，并对发出的报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：如果出现与临床不符甚至相悖的情况，应该进行分析并查找原因。在16章中，有关引用程