小柴胡汤对肺炎链球菌感染模型动物的治疗作用

小柴胡汤对肺炎链球菌感染模型动物的治疗作用

发烧是临床上常见的症状。引起发烧的原因很多，治疗方法也很复杂。小柴胡汤源于张仲景所创,疗效肯定,应用广泛,被历代奉为经典,目前仍是临床使用概率最高的方剂之一。文献记载,小柴胡汤主治病症中,以发热最多。有作者调查了1984-2002年间关于小柴胡汤治疗发热的报道,显示小柴胡汤所治疗的发热以高热居多,适合疾病种类广泛,其中感染性发热较多,同时对非感染性发热(包括癌性发热、免疫系统等引起的发热)和不明原因发热亦有效。为进一步了解小柴胡汤抗感染、解热作用及其可能的机理,笔者复制动物感染及发热模型,观察其对细菌感染及内毒素诱导发热实验动物的影响。1材料和方法1.1动物、药品和试剂实验动物健康昆明小鼠45只,体重18~22g,雌雄各半;健康SD大鼠30只,体重220~250g,雌雄各半,我院动物中心提供。在室温(20±2)℃环境下饲养,光照12h。1.1.2药品和试剂小柴胡汤(柴胡12g,黄芩9g,半夏9g,生姜9g,人参9g,甘草6g,大枣9g),由我院中药房提供。肺炎链球菌、大肠埃希菌内毒素,均购自中国药品生物制品检定所。1.2实验方法1.2.1中药生药试验小柴胡汤及板蓝根按常规由本院中药制剂室协助配制,制成水溶液,经55.16kPa高压蒸汽灭菌后备用,试验时稀释浓度为每毫升含中药生药1g。1.2.2分组及研究方法小鼠在实验前适应环境饲养3d后,随机分为小柴胡汤组、板蓝根组、模型对照组,每组各15只。各组小鼠腹腔注射最小致死剂量的肺炎链球菌菌液(15×109CFU/ml),小柴胡汤及板蓝根组分别灌胃中药(用量相当于成人临床有效剂量的10倍),模型对照组灌胃等量蒸馏水,连续给药7d,1次/d,记录动物死亡数。1.2.3基础体温测定大鼠适应环境饲养3d后,合格大鼠(1d内间隔1h连续两次测得肛温变化≤0.3℃,连续3d)随机分为小柴胡汤组、板蓝根组、模型对照组,每组各10只。实验前10h开始禁食,排空直肠后测肛温两次,每次间隔1h,取平均值作为基础体温。各组大鼠实验当天均腹腔注射大肠埃希菌内毒素溶液10EU/kg,小柴胡汤及板蓝根组分别灌胃中药(剂量同前),模型对照组灌胃等量蒸馏水,分别于给药后1、2、3、4、6、8h测肛温,比较各测点大鼠体温变化情况,计算各组大鼠体温最高温差ΔT(发热时体温与基础体温的差值)。1.2.4统计方法计量资料采用t检验,记数资料采用χ2检验,统计资料由SPSS10.0统计软件进行分析。2小柴胡汤对小鼠致病性的影响2.1小柴胡汤对肺炎链球菌感染小鼠的保护作用小柴胡汤和板蓝根冲剂对肺炎链球菌所致小鼠感染均有一定的保护作用,可显著降低感染小鼠的死亡率(P<0.05);小柴胡汤组死亡数少于板蓝根组,但中药组间差异无统计学意义(P>0.05),见表1。2.2小柴胡汤对LPS致大鼠发热的影响小柴胡汤和板蓝根冲剂均能抑制LPS所致大鼠体温的升高,与对照组比较在不同时间点差异有统计学意义(P<0.05),小柴胡汤组降温效果略优于板蓝根组,但中药组间差异无统计学意义,见表2。3小柴胡汤的临床应用感染性疾病是临床几大常见疾病之一,严重危害人类的生命和健康。抗菌药物的出现与应用在预防和治疗感染性疾病方面发挥了巨大的作用,但同时抗菌药物的滥用也带来了严重的问题,如越来越多细菌耐药及抗菌药物不良反应。中医药是我国传统医学的宝库,中药制剂在感染性疾病治疗方面有着特殊的优势。许多中药制剂同时具有抗菌、抗病毒及提高免疫等多重功效,临床疗效好、不良反应小。小柴胡汤出自《伤寒论》,原文记载:“少阳之为病,口苦,咽干,目眩也。”;“伤寒五六日,中风,往来寒热,胸胁苦满,嘿嘿不欲饮食,心烦喜呕,……小柴胡汤主之”;“伤寒中风,有柴胡证,但见一证便是,不必悉具”。明确了小柴胡汤临床应用的要领,既用于邪入少阳,居于半表半里。方中柴胡为君,宣散透邪,使邪从太阳而解;黄芩为臣,清热燥湿,泻火除烦,清半里之邪;二药合用,既能宣透清解半表半里之邪,又能使气机升降复常;半夏降逆止呕;姜、枣调和营卫,甘草调和药性;邪入少阳,兼有正气不足,故以人参扶正。通过治疗宣透疏泄,使气机外达,邪从太阳而解;清热利胆,以绝邪入阳明之路;补脾益气,升清降浊,防止邪犯太阴,而有气机壅滞之变。全方寒温并用,升降协调,有疏利三焦,调达上下,宣通内外之功。小柴胡汤临床应用广泛,涉及到内、外、妇、儿各科疾病,其中以发热性疾病居多,包括感染性发热,也包括非感染性发热,对于治疗细菌性及病毒性高热,小柴胡汤疗效较好,有报道2d治愈率可约达85%;对不明原因性和疑难性发热亦有明显疗效。现代药理研究也显示柴胡、黄芩有显著的抗炎及抗病毒作用,柴胡对感冒病毒、肝炎病毒及牛痘病毒等多种病毒有抑制作用;黄芩能增强白细胞和网状内皮系统的吞噬功能,对多种细菌有明显的抑制效果。内毒素是革兰阴性菌细胞壁外膜中的脂多糖(LPS)成分,是效应性很强的细菌致热原,微量LPS就能引起剂量依赖性发热,其发热是由血液循环中内生致热原(EP)所介导的,LPS激活单核巨噬细胞,诱生EP释放入血,因此在药效学中常用于观察发热的病机及药物疗效。中医对内毒素早期临床表现常辩证为实热,认为内毒素是“热毒”的物质基础。板蓝根为常用的清热解毒中药,广泛用于多种感染性疾病,并被报道有抗内毒素作用。为了解小柴胡汤体内抗感染及解热作用,本研究以肺炎链球菌为感染源、内毒素为发热致热原,板蓝根为阳性对照,观察了小柴胡汤对内毒素诱导大鼠发热的抑制效果及肺炎链球菌感染小鼠的保护作用,发现小柴胡汤有较好的抗感染及